Введение к работе
Актуальность проблемы. Проблема острых лихорадочных заболеваний остается одной из вашшх для здравоохранения ию -г:н' стран мира. Ее актуальность обусловлена многообразием видового состава возбудителей!, тяжестью клинической картины многих ваболеваний,недостатком или отсутствием для них средств диаг ностики,профилактики и лечения.
Одну.яз частих причин возникновения острых лихорадочных заболеваний человека представляют арбовирусы,среди ісоторьіх наиболее многочисленны представители семейства Bunyaviridae. К ньстояиіему времени на территории бывпего СССР выделен 21 ви-' рус,относящийся к этому семейству,в том числе bocetth - патогенных для человека. Несмотря на то,что последний случай виде ления вирусов ;.;оскитных лихорадок на территории СССР относится к 1948 г. ,в настоящее время з средне.-азиатской регионе а пределах ареала Phlebotomus papatasi у грызунов - прокормителей москитов обнаруживаются антитела" к вирусу неаполитанской мое китчой лихорадки (НМЛ). Это свидетельствует о продолжающейся циркуляции вируса в природе и возможности возникновения новых вспышек.
Наличке сегментированного генома,одновременная актишиит в эндемичном районе яву:: или нескольких близких Суньяаиру.-'.л1.. обя'лооаь видового состава их естественных переносчиков и резервуаров создам реальные предпосылки для появления ген^ти чески измененных вариантов, в том числе обладающих 6ontr выраженными патогенным! свойствам,чем исходные вирусы. Реалі.
ныш, хотя и нэмнргочисленныш, примэращ могут СЛ^ййїЬ данные об изменении патогенних свойств вирусов ли::орадкк долины Рифт и Пунта Торо (Anderson G. ,1988: bfeegari J. ,1977), принадлежащими наряду с вирусами сицилийской (СИП) и неаполитанской {НМа> москитных лихорадок к роду Phlebovirus.
Для выявления закономерностей эволюции флебовирусов необходимо накопление фундаментальных давних о патогенных, биологических и антигенных свойствах новых сеогреііичеокш: изолятоа.
В 1986. и 1987 гг. из проб крови,вгитых /больных во время вспышек москитной лихорадки в Афганистане были выделены три штамма вируса НМЛ {Аф-130, Аф-1008 и Аф-1038) и два чгаемма СШІ (Аф-83 и Аф-1028). Особый интерес к згим вспышкам был обусловлен тремя причинами: заболевание наблюдалось ерди советских военнослужащих,прибьшших из неэндёмичных райоаов; фсебовирусы в Афганистане, были обнаружены впервые; выделений гаамми вируса неаполитанской москитной лихорадки отличались от прототип-ных.
Цель и задачи работа
-
Совершенствование специфической диагностики москитных лихорадок; выбор чувствительной клеточной системы для выделения и культивирования вирусов.
-
Определение нейротропносги афганских изолятов в опытах на лабораторных животных.
-
Классификация новых штаммов. Сравнительное определение молекулярной массы структурных и неструктурных протеинов афганских и прототипного штаммов вируса НМЛ.
-
Изучение антигенных связей и серологическая идентификация
-o-
выделенных штаммов методами кммунофлюоресценции (Иф), реак ции связывания комплемента (РСК), лантанидной иммунофлюорее ценцни (ЛИФА) и иммуноблбта (ИБ).
Научная новизна работы.
Впервые проведено изучение биологических свойств и серологическая идентификация пяти штаммов (Аф-83, Аф-130; Аф-1008, Аф-1С28 и Аф-1038), выделенных из крови людей, заболевших мос-китноЯ лихорадкой в Афганистане. Впервые 'клеточная культура ВНК-21 рекомендована ісак оптимальная и универсальная модель in vitro для выделения и изучения флебовирусов. Впервые на осно--валил результатов серологической идентификации в РСК в составе серокошлекса вируса НМЛ Еыделены три антигенные группы (1-вирусы НМЛ, Тоскана и Тегеран. 2 - включающая афганские штамш (Аф-130, Аф-1008 и Аф-1038) и 3- вирус КаримаОад). Впервые определена молекулярная масса структурных и неструктурных протеинов для афганских и прототипного штаммов вируса НМЛ. Впервые показана связь вируса Кзримабад с другими представителями се рокомплекса НМЛ по нуклеокапеидному белку.
Практическая ценность радоты.
На основании полученных результатов сформулирован ряд но лоу^нкй. способствующих усовершенствованию тактики специфичго кой вирусологической и серологической диагностики москитные лихооадок.
Основные положения, выносите на зашиту. 1. Выделенные в Афганистане в 1986-6? гг. штаммы лф''< ;
- б -
Аф-1028 идентичны вирусу сицилийской москитной дахорадгаї (штам;,» Sabin).
2. Шоляты Аф-150. Аф-1008 и Аф-1036 представляют ооОой атаммы вируса неаполитанской москитной лихсрадки, .отличающиеся друг от друга и от прототипного штамма.
-
Оптимальные биологическими системаш для» рєптюдугліий вирусов СШІ и НМЛ (в эксперименте) являются мозг новорожденных белых мышей и клеточная культура ВНК-21.
-
Антигенные свойства вирусов серокомплекиа НМЛ отражают общую тенденцию буньявирусов к пестроте антигенных связей, которые неодинаково проявляются в различных серологических тестах.
-
Для индикации вирусспецифических антигенов серокомплекса НМЛ наиболее чувствительным является метод дантанидной имму-нофлуоресценцим.
Публикации.
По теме диссертации опубликовано 2 работы.
Объем и структура диссертации