Введение к работе
1.1 Актуальность темы. Со времени первого описания в 1830 году и до
іаших дней классическая чума свиней (КЧС) представляет серьезную
проблему для свиноводства как в развивающихся, так и развитых странах с
ффективной системой ветеринарно-санитарного надзора. Широкое
іаспространение и экономическое значение данной болезни послужило
>сновой для ее постоянного изучения на протяжении последних
[есятилетий в иммунологическом и патогенетических аспектах. С середины
!0-х годов в результате применения подходов с использованием
юноклональных антител и генноинженерных конструкций был достигнут ущественный прогресс в представлениях об иммунном ответе при КЧС іа молекулярном уровне. В то же время публикации по изучению іатогенеза КЧС с привлечением современных методов остаются весьма [емногочисленными. До сих пор окончательно неясна последовательность юбытий, инициируемых вирусной инфекцией и приводящих к видимым гатологическим провлениям. Фрагментарность данных о механизмах іатогенеза КЧС особенно заметна при сравнении с результатами ісследований патогенеза модельного вирусного гепатита, церебральной малярии, болезни Борна. Вместе с тем, несмотря на повсеместное грименение вакцин, эпизоотологическая ситуация в Российской Федерации характеризуется постоянной регистрацией случаев КЧС среди привитого юголовья [Куриннов В.В. и соавторы, 1992], причем причины их юзникновения не всегда понятны. Кроме того, описаны случаи неудачной іакцинации против КЧС, приведшие к массовой болезни и убою свиней Джупина СИ. и соавторы, 1995]. В связи с вышеизложенным представляется весьма своевременным выявление тех стадий в шфекционном процессе, которые обладают патологическим потенциалом і реализацию которых впоследствии можно регулировать. Эти стадии логут опосредоваться компонентами, влияющими на гемостаз; іротеиназами, активными при нейтральном значении рН; медиаторами
2 воспаления; иммунологическими цитолитическими реакциями; реакциями
ГЗТ.
1.2. Цель и задачи исследования. Основная цель данной работы
состояла в выявлении механизмов и реакций, инициирующих развитие
патологических процессов при КЧС и участвующих в них.
Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:
- оценить активность протеолитических ферментов в лейкоцитах
свиньи, зараженных вирусом КЧС;
- определить уровни активности фактора некроза опухолей в
сыворотках крови инфицированных свиней, а так же способность
зараженных лейкоцитов свиней секретировать данный медиатор;
- оценить уровни синтеза и секреции прокоагулянтных веществ в
зараженных in vitro и in vivo лейкоцитах свиньи;
- охарактеризовать активность естественных киллеров при разных
формах КЧС;
- изучить возможность индукции цитотоксических Т-лимфоцитов в
организме свиней, инфицированных вирусом КЧС.
- охарактеризовать развитие гиперчувствительности замедленного
типа при КЧС и определить возможность ее регуляции.
1.3. Научная новизна диссертационной работы заключается в том,
что впервые охарактеризована реакция на инфицирование вирусом КЧС
естественных мишеней - лейкоцитов свиньи - в плане синтеза и секреции
ими патофизиологических медиаторов - прокоагулянтов, фактора некроза
опухолей, протеолитических ферментов. Впервые показано, что
вызываемый вирусом КЧС инфекционный процесс у подсвинков приводит
к формированию цитотоксических Т-лимфоцитов (ЦТЛ) и зффекторої
гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ). Выявлена динамике
активности естественных киллеров (ЕК) свиней при острой форме КЧС і
вакцинации. Установлено, что нейтрализующие антитела в титрах
обеспечивающих защиту вакцинированных подсвинков, не предохраняю:
вакцинированных иммуносупрессированных подсвинков от развития клинических признаков болезни после заражения вирулентным вирусом.
1 ^.Практическая значимость работы состоит в разработке методических указаний по тестированию медиаторов замедленного типа при классической чуме свиней. Методика определения активности протеиназ адаптирована к постановке в микроварпанте; модифицированы методики определения фактора некроза опухолей и прокоагулянтов. Сформулированы предложения по конкретной реализации и использованию научных выводов.
1.5. На защиту выносятся следующие положения:
- новые данные о синтезе и секреции инфицированными вирусом КЧС
лейкоцитами свиньи прокоагулянтов, фактора некроза опухолей и
протеолитических ферментов;
- особенности формирования реакций клеточного иммунитета
(действия ЦТЛ, ЕК , эффекторов ГЗТ) у свиней, инфицированных вирусом
КЧС;
экспериментальное обоснование патофизиологической активности прокоагулянтных веществ и эффекторов ГЗТ при КЧС;
- схема реализующихся при КЧС биохимических и иммунологических
механизмов с патофизиологическими проявлениями.
-
Апробация работы. Материалы, вошедшие в диссертацию, были доложены на научно-практической конференции ВНИИВВиМ "КЧС-неотложные проблемы науки и практики" (Покров, 1994), заседании Ученого Совета ВНИИВВиМ (1996), представлены на республиканской научно-практической конференции по животноводству и ветеринарной медицине (Витебск, 1994), Всероссийской научно-практической конференции "Вирусные болезни сельскохозяйственных животных" (Владимир, 1995), 10 международном вирусологическом конгрессе (Иерусалим, 1996).
-
Публикация результатов исследований. Материалы диссертации опубликованы в 8 печатных работах, вошедших в сборники тезисов
4 докладов перечисленных выше конференций, и в центральных журналах
"Вопросы вирусологии" (1995, N4), "Молекулярная генетика,
микробиология и вирусология" (1995,N2; 1997.N3) и "Доклады
Россельхозакадемии" (1996, N6).
1.8. Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 126 страницах, включает введение, обзор литературы, материалы и методы, результаты исследований, обсуждение результатов исследований, выводы, практические предложения и рекомендации, список сокращений и обозначений, список литературы из 162 первоисточников и приложение. Диссертация содержит 14 таблиц и 25 рисунков.