Введение к работе
Актуальность темы.
Одной из основных проблем свиноводства, особенно связанной с селекцией и разведением - нарушение репродуктивных функций у свиноматок и гибель новорожденных поросят. Проблема многофакторна; связана с нарушением кормления, содержания, зоогигиенических и санитарных условий, нарушением обмена веществ, незаразными, инфекционными и паразитарными болезнями.
В период с 1987 по 1992 г.г. свиноводы в странах Северной Америки и Западной Европы заявили о массовом проявлении у свиноматок заболевания, проявляющегося нарушением, ^воспроизводства и не поддающегося диагностированию. Только в 1991 году вирусологами Центрального ветеринарного Института (Лелистад, Нидерланды) была установлена вирусная природа возбудителя (Wensvoort et al., 1991), и после некоторых дискуссий болезнь названа репродуктивно-респираторный синдром свиней (РРСС). В 1994 болезнь внесена в список МЭБ.
Болезнь не поддавалась лечению испытанными химиотерапевти-ческими средствами, быстро распространялась среди свиней и без строжайшего соблюдения ветеринарно-санитарных и организационно-технических норм поставила хозяйство перед необходимостью полной смены поголовья. Важно было установить этиологию болезни, разработать методы быстрой и эффективной диагностики, которые позволили бы обнаружить и дифференцировать указанный вирус от возбудителей клинически сходных заболеваний.
В 1991 году в колхозе "Россия" Медвенского района Курской области ветеринарными специалистами установлено заболевание у свиноматок с признаками нарушения воспроизводительных функций (аборты, рождение мертвых, нежизнеспособных поросят). В результате исследо-
вания патологического материала в Центральном ветеринарном институте (Лелистад) был поставлен диагноз - РРСС.
Всвязи с обнаружением новой нозоединицы, вируса репродуктив-но-респираторного синдрома свиней, ввиду высокой контагиозности возбудителя, отсутствия действенных средств специфической профилактики и методов борьбы с репродуктивно-респираторным синдромом , данное заболевание вошло в число первых по размерам нанесенного экономического ущерба свиноводству в тех хозяйствах Российской Федерации, где это заболевание имеет место.
Данная работа является результатом исследований по разработке средств и методов лабораторной диагностики РРСС, выполненных во ВНИИВВиМ.
Цель работы
Целью наших исследований являлась разработка средств и методов лабораторной диагностики болезни репродуктивно-респираторного синдрома свиней.
Задачи исследования.
-
Изучить репродукцию вируса РРСС in vitro и in vivo; в различных культуральных клеточных системах различного происхождения;
-
Разработать способ получения специфической сыворотки к вирусу РРСС на чувствительных животных, пригодной для изготовления диагностических препаратов;
-
Разработать технологию изготовления диагностических препара тов;
-
Отработать методы исследования для лабораторной диагностики РРСС;
-
Изучить диагностическую ценность разработанных средств и методов лабораторной диагностики РРСС для обнаружения специфического антигена и выявления антител у больных и переболевших животных;
-
Разработать схему лабораторной диагностики болезни РРСС.
Научная новизна
Научная новизна и практическая ценность работы состоит в том, что в результате проведенных исследований:
изучены основные морфологические, физико-химические и биологические свойства вируса РРСС;
обнаружение антигена и выявление' антител к вирусу РРСС проводится в культурах клеток MARC-145, АМС реакцией непрямой имму-нофлуоресценции и гистохимическим вариантом иммуноферментного анализа;
Разработана схема диагностики РРСС;
Практическая значимость На основании экспериментальных исследований разработаны и
рекомендованы для включения в схему диагностики РРСС чувствительные и специфичные реакция непрямой иммунофлуоресценции и гистохимический вариант иммуноферментного анализа, предназначенные для обнаружения антигена вируса и выявления специфических антител.
Изготовлены лабораторные образцы "Набора препаратов для лабораторной диагностики репродцетивно-респираторного синдрома свиней", которые успешно прошли межлабораторную комиссионную апробацию.
Разработана нормативно-техническая документация "Набора препаратов для лабораторной диагностики репродуктивно-респираторного синдрома свиней" (Временная инструкция по изготовлению и контролю;
Технические условия; Методические указания и Наставление по применению набора), утвержденные директором ВНИИВВиМ.
Разработанные средства и методы лабораторной диагностики ре-продуктивно-респираторного синдрома свиней внедрены в ветеринарную практику страны, что позволяет своевременно диагностировать данное заболевание и проводить эффективные мероприятия по предупреждению распространения инфекции.
Апробация работы
Материалы диссертации доложены на научных конференциях и на заседаниях ученого совета ВНИИВВиМ (г. Покров 1994-1996).
Публикации
По теме диссертации опубликовано 6 научных работ.
Основные положения диссертационной работы, выдвигаемые на зашиту
-
Результаты экспериментальных исследований по разработке реакции непрямой иммунофлуоресценции и гистохимического варианта иммуноферментного анализа для диагностики репродуктивно-респираторного синдрома свиней и ее дифференциальной диагностики от клинически сходных болезней свиней.
-
Результаты апробации методов гистохимического варианта иммуноферментного анализа и реакции непрямой иммунофлуоресценции на практике.
3. Результаты изучения вируса репродуктивно-респираторного
синдрома, выделенного из экспертизного материала Самарской облас
ти.
Объем и структура диссертации.
Диссертация изложена на 134 листах машинописного текста и включает: введение, обзор литературы, материалы и методы, результаты собственных исследований, обсуждение, выводы, практические предложения и список литературы ( 225 источник, в том числе 29 отечественных). Работа иллюстрирована 15 таблицами и дополнена приложениями.