Введение к работе
Актуальность проблеми. Успешнс:іу решению продовольственной -
программы., страны содействуют ликвидация а профилактика инфекционное болезней жппотних, в том числе и бруцеллеза. Эта болела тлеет широкое распространенно во многих странах млр\. Іїзучещів бруцеллеза я разработка мер 1орьбы с ши приобрели характер международного значогяя.
ііробіема борт>бн с бруцеллезной :пкзкциеіі, наносящей" больпої' экономический ущерб и имеющей социальное значение, г-есша сйїіуаіиіь-на 7: срази с нгнпряхешюй эпизоотической оостановкой э отдельных регионах страны.
Л», .нчпвгткгт ^p-t-^e.v.caa л^ямоул телекс при условии применении -uOOoO&pj'ieKTJUMMx средств специфической профилактики в комплексе с организационно-хозяйственными и ветерииарис—сашітарнши меропрш* ятиями ( Орлов Е.С. и др.,1971; Уласевнч П.С.,1971; Салмаксл К.М., 1975; Студекцов К,П., 1975; Нгяицкнй А.А., 1978; Юсупов 0,Ю, к. др., IS84; Забродин В.Л. и.др., IS80; Джупина СИ., 1985; Косшш Я.А., 1985; Сочнев В.В., 1988; Алиев Э.А.,1987; Иванов Н.П. ,1988; .Сим В.И., 1989 и др.).
С этой целью исследователями било разработано к прел.'кгапо болг.-;;ое количество убитых и ждьих вакцин, п том числе из осмоле;*-ю-г культур бруцилл С Котлярова X.С, 1950; Жсковец П.К. ,ГК-?, Новскил ІЇ.И. ,19Г0; Сал;.:«.«ов K.LI., IS6I; Клочков А.А.. Т964; Іршіспко П.А., I9G5; Рягузов B.C.,1957; Кдваник ГГ.H.t др., 1964; !і]у;.ішіо:ч К.В., 1984 и др.). Но, несмотря на достижения мировоіі ветеринарной науки все еще нет яадежіпес о; дств специфической профилактики бруцеллеза крупного рогатоі-о скота.
В настоящее время для этих целей широко используются ЖИВН8 вакцини аз шташов 82 и 19. Однако они шевт сущест еняые wv.oc-татки. После иммунизация вакциной из штамма 19 животине телгое врегя остаются серопозитивнші; { Гринько В.К. и др. ,1289; Сбъад-ков Г.А,, 1909), что затрудняет проведение взтеринаг"'э-санятарных мероприятий, дифференциацию вакцинированных животных от больных и определен;:- эпизоотического статуса поголовья скота пс лррт»1;-леэу.
При комиссионной проверке ( І969-І97С, 1971-Tv?'-! ) разлитых противобруцеллезшх вакцин, организованной Главяіг.г управлением ветеринарии МСХ СССР, наиболее эффективной оказалась вакцина из штамма 82. Она обладает слабоазтлмтЕШШШыми и иммуяогеаадмд
- 4 ""
свойствами. Быстрая утрата привитыми животными положительных по зателей РА и РСК дает возможность оздоравливать хозяйства от бр целлеза в более короткие ороки. О высокой эффектнш. сти этой ва цины сообщают многие последователи ( Локтева Ф.П, и др., 1877; Еазалей O.K. и др., 1980; Белобаб В.И. и др.,1980; Исхаков 0.3. и др.,1980; Косилов'И.А. и др., 1986 и др.).
Однако, наряду с положительными качествами, она является ре. тогеняой при первичном применении на беременных коровах ( Салма К.М. и др. ,1880; Алексеев К.К. и Лукин А.К., 1980; Алиев Е.А.. и Садико^ СР., 1983; Бронников А.К.,1987 и др.), вследствие чег штампом 82 не рекомендуется прививать маточное поголовье, Имму. низация же животных по мере растела значительно растягивает сроі вакцинаціш.
Учитывая это, ветеринарной секцией Научно-технического сов* МСХ СССР от 27 июля 1976 года (протокол № 74) Казанскому ветеринарному институту им.Н.Э.Баумана было рекомендовано обратить особое внимание на совершенствование иммунизации против бруцеллі за взрослого поголовья крупного рогатого скота, ъ том чіхле бері менных коров и нетелей.
Исходя' из вышеизложенного, возникает острая необходимость і .разработке схем специфической профилактики животішх с использовг наем таких, вакцинных препаратов, которые бы создавали у всех в< растных вруїш крупного рогатого скота напряженный иммунитет, но і ;, обладали реактогенныг.ш свойствами и позволяли проводить диагностику в максимально короткигероки после вакцинации.
Цель и задачи исслэдст'.апи?. Целью настоящих исследований . является; изыскать наи< слео зйфскт віше средства и методы специфической профилактики б, уцб ілега тутного рогатого скота, в том числе с'эремешшх коров h НЄЇЄЛЄІ.
В соответствии с этим были поставлены следущие задачи:
изыскать способ иммунизации вакциной из штамма 82 беремеї них коров и нетелей против бруцеллеза;
получить из различных штаммов бруцелл" мутанты и изучить их культу'рально-морфологическае, биохимические, агглютияабельны< и другие свойства, с такае их ста» яльнооть и ультраструктуру;
изучить антигенные, вирулентные, иммуногешше и реактогеї ныв езойства штамма В. «tortus 82-ПЧ на лабораторных животных и крупном рогатом скоте;
провести ишуноморфологнческую оценку вакцини из штамі, і 82-ПЧ на морских свинках и крупно:.? тагатоїл скоте;
испытать вакцину пз штамма 82-ГЛ на маточном поголовье крупного рогатого скота в произволетвенных условиях;
разработать технологию и изготовить опытно-промышленную партии живой сухс вакцины из штамма 82-ПЧ;
разработать оптимальную систему лготивобрунеллезннх мероприятий в скотоводстве и предложить ее для производства.
Научная новизна работы. Разработана зтодика отбора мутантов бруцелл для получения вакцинных штаммов.
Получен новы;" вакцинный штамм В. abortus 82-ПЧ - пеницил-лшю-чувствителыгый вариант штьмма 62 ( А.С. й 1034400 от 10 апреля 1983 года).
Вакцинный шташ 82-ПЧ всеотсровне изучен н^ лабс лторннх животных и крупном рогатом скоте в эксперимент зхышх и производственных условиях. Определены параметры его стабильности, а также агглотиногенных, иммуногенных :г реактогенных свойств.
Установлен уровень шмуногенных свойств и поврзвдащего деітствия шкцлны из штамма 82-ПЧ на организм лабораторных и сельскохозяйственных (крупный рогатый скот) животных путем опрегчленил ультраструктурных и патоморфологпческих наделений в органах л тканях привиты:-: -чпвотннх в динамике иммуногенеза.
В экспериментальных и производственных условиях пгдтвердь,ена высокая эффективность вакцины из штамма 82-ПЧ на грудном рогато.м скоте для хозяйств с различно:: эпизоотичес^;'! обстановко.': по бруцеллезу, а также отсутствие у нее абортогенности, агышчшогеи-нссти и способности создавать у привитых животина напряженный імг.іунитет.
Разработана система специфической профилактики оруцелл:зз крупного рогатого скота с использованием только вакцины из штамма 82-ПЧ или в эмплекое с вакциной из шташа 82.
Разработана технология изготовления яатлвной и с^хой живой вакцины из штачма 82-ПЧ и освоен их выпуск соответственно в лаборатории бактерийных инфекций ВНИВИ и на Щелковском бкоко:.:бюито. ( Получено положительное решение ШЖГПЭ на видачу патента от 26 ноября 1991 года по заявке '№ 487341/13 ( 090465) иа живую вакцину .^з штамма 82-ПЧ).
Практическая згючі^ос"ь. Полученный штачм В. abortus 82-414 депонирован в лаборатории-музее (банк) ШИШ и представлен в ВГШО-1 ветпрепаратов в качестве производственного для изготовления вакцины. Справка о депонировании от 15 мая IS8I года, регистрационный ног.'вр 28. Акт об апробации штамма в ВГНКИ от 25.02.91 года.
В результате проведенных исследований разработаны и утверздены:
Технические условия на живую нативную вакцину из штамгла 82-ПЧ против бруцеллеза крупного-рогатого скота, утвержденные ІУВ МСХ СССР Т5 октября 1986 года.
Технические условия на с: :ую яшвуга вакцину из штамма 82-ПЧ против бруцеллеза крупігого poravoro скота, утвержденные ІЗ ноября 1991 года, гув МСХ СССР.
Временное наставление по лршенешш хшой сухой вакцины из штамма 82-ГЛ против бруцеллеза крупного рогатого скота, утвержденное ІУВ МСХ СССР 13 ноября 1991 года.
Нормативно-техническая документация (технические условия, инструкция и наставление) на изготовление, контрой», и применение нативной и сухой ватины из штамма 82-ПЧ против бруцеллеза крупного рогатого скота,, утъерященная директором ВНИК! в 1983, 1986 и 1990 годах.
Основные положения диссертационно.'! работа, выносимые на защиту;- изыскание новых вакцинных штаммов бруцелл и способов иммунизация крупкого рогатого скота против бруцеллеза, в том числе беременных коров;
получение различных мутантов бруцелл;
получение и изучение гэвой давоЯ гакцшга из штамма 82-ПЧ;
эффективность првлапегі. ч н тивтои вакцлны из лтаг-ыа Е2-ПЧ на крупкам рогатом скоте в гроа. водзтвлыых условиях;
пазработка системы мероприятий по борьбе с бруцеллезом крупного рогатого скота с применениш вакцины из штамт-ч 82-ПЧ;
освоение промышленной технологии изготовления шівоіі сухей бруцеллезной вакцины из штамма 82-ПЧ на твердых и жиких питательных средах.
Апробация работь. Основные полож ния диссертационной работы доложены и обсувдены на заседаниях методической комиссии и ученого совета БНИВЙ в виде ежегодных рабочих программ и отчетов ( 1976-1992 гг.), координационнк.. совещаниях по проблеме 0.СХ.6І
за 1984 год (Новосибирск, 1985), аа 1988 {Махачкала, IS89), Всесоюзной научно-производственно:* конференции по.борьбе с бруцеллезом крупного рогатого ск> та Казань, 1979), совецанпи ветеринарних специалистов строїш на Qui К ( Москва,1982), всесоюзной н?..учкЫконференции но проблемам эпизоотологии ( Казань,1963), республика;,скоіі аучно-пропзводственпоп :-,онфєренции( Казань, І98Б-Т092), совещании-семинаре практических и научных ветспециэ-листов (Новосибирск, ISS7), семинарах і'-.тср'.тарннх специалистов Оренбургской обллсти (1983), Агероп;:д>.<ана (1988), Армении (1989/, 'той Осетии (1990).
Публикации. По ..іаігіоин.'им ?ч«->гт7:игп::: йііуйщжон'їно -58 ««""№ трупов;20 отчетов, 20 научных статей, 2 технических условия, 2 временных наставления, 2 временные инструкции, получено одно авторское свидетельство и лза положительных решегпя па выдачу патента, 3 удостоверения на рационализаторские цреллог.ешія.
Объем и структура диссертации. Материалы диссертации изло-авнн и af/c страницах машинописного текста и включают введение, 12 глав собственных исследований, заключение, выводы, тактические предложения. Список литяратуот состоит из чЗВ петтннкг.в, л:\ которни (с8 п;;о<г. ганшіх. /цгеертздкя иллюстрирована С~ іяг>-.":-:і;є.:ц :; 36 рко7;;;;л-.т;;. В приложении предстаете.ш докумстн, .' .-- тв.'.р.^і'.гаиі''' ^""" .':-.":,' гщслі.ннх этапов раСоти, vx ла> "<>!.;.> я .;ракт:гчс.ску.ч пчш'.сс.: .