Введение к работе
Актуальность теки. В Кыргызской Республике ежегодно регистрируется до 15 нозологических единиц инфекционных болезней овец. . Наиболее широкое распространение имеют сальмонеллез, хламидиозннй аборт и бруцеллез, представляющие потенциальную опасность для здоровья человека и животных. Удельный вес этой группы абортогенных инфекций овец по отношению к другим заразным заболеваниям составляет: бруцеллеза- 48.2%, хламидиозного аборта - 131 и сальмонеллеза - 3Z.
Установлено, что эпизоотические вспышки абортогенной патологии овец проявляются в форме ассоциативной (смешанной) инфекции, а общепринятые методы их специфической профилактики при этом являются мало эффективными (Матвиенко Б.А., 1964, Сафаров К.М. с сотр., 1967, Волкова А.А. с сотр., 1971, Байтурина О.Ш. с сотр., 1986). С учетом широкого распространения сальмонеллеза, хламидиозного аборта и бруцеллеза овец и особенностей их эпизоотического проявления, разработка и усовершенствование существующих методов иммунопрофилактики остается актуальной задачей современной ветеринарной науки и практики.
Цель работы. Повысить эффективность специфической вакцинопрофи-лактики сальмонеллеза, хламидиозного аборта и бруцеллеза с применением комплексного метода иммунизации, что будет способствовать обеспечению эпизоотического благополучия в овцеводстве республики по абортогенным инфекциям.
Задачи вссдедованка.
изучить краевую эпизоотологию и распространение сальмонеллеза, хламидиозного аборта и бруцеллеза овец в Кыргызское Республике;
изучить нозоареал ассоциативной формы абортогенных инфекций овец; '.'....-
изучить динамику формирования группового иммунитета при комплексной иммунизации овец против сальмонеллеза, хламидиозного аборта и бруцеллеза овец;
разработать и апробировать схему вакцинации и рекомендации по комплексной иммунопрофилактике сальмонеллеза, хламидиозного аборта и бруцеллеза овец.
Научная ноаязва. Впервые в Кыргызской Республике установлены эпи-зоотологическая особенность и нозоареал ассоциативной формы сальмонеллеза, хламидиозного аборта и бруцеллеза овец.
Разработан метод комплексной иммунопрофилактики трех абортогенных
инфекций овец с учетом их ассоциативной формы проявления эпизоотических вспышек.
Определен иммунологический статус и динамика образования иммуна-компетентных клеток в организме овец при комплексной иммунизации против группы абортогенных инфекций.
Практическая значимость работы. Выяснен нозоареал абортогенных инфекций - сальмонеллеза, хламидиозного аборта и бруцеллеза овец в республике и течение их в ассоциативной форме.
Разработан комплексный метод иммунопрофилактики этих инфекций, использование которого способствует сохранению эпизоотического благополучия республики. При этом предотвращаются возникновение и распространение сальмонеллеза, хламидиозного аборта и бруцеллеза, сокращаются аборты овцематок в 3.8 раза, мертворождения в 4 раза. Одновременно с этим сокращаются сроки вакцинации, затраты труда ветеринарных специалистов - в 2-3 раза и уменьшается стрессовый фактор у прививаемых животных.
Для практического использования данного метода разработаны рекомендации и схема комплексной иммунопрофилактики сальмонеллеза, хламидиозного аборта и бруцеллеза.
Основные положения, выдвигаемые на защиту:
материалы изучения краеиой эпизоотологии и распространение сальмонеллеза, хламидиозного аборта и бруцеллеза овец в Кыргызской Республике,. ..-,'.
нозоареал и эпизсотологические особенности проявления * абортогенных инфекций в ассоцизтивной форме.
динамика формирования группового иммунитетачпри комплексной иммунизации овец против абортогенных инфекций.
схема комплексной вакцинации в целях специфической профилактики абортогенных инфекций овец и оздоровление овцеводческих ферм (хозяйств) от сальмонеллеза, хламидиозного аборта и бруцеллеза.
Апробация работы. Материалы диссертации доложены на заседаниях ученого Совета Кыргызского НИШ (1991-1995 гг.); Межреспубликанской конференции по проблемам вирусологии и микробиологии (КазНИСХИ, 1994 г,); Республиканской конференции "Совершенствование мер борьбы с болезнями сельскохозяйственных животных" (г.Бишкек, 1994 г.); Заседании Научно-Технического Совета Научно-производственного Объединения по ветеринарии (1996 г.); межлабораторном заседании Кыргызского научно-нсс-ледовательсаэго института (1996 г/). Схема по комплексной иммунизации
против сальмонеллеза, хлачидиозного аборта н бруцеллеза овец апробирована в АО "Достук" Аламудунского района (1995 г.).
Публкязпки. По теме диссертации опубликовано ? научных работ, в том числе рекомендации - "Комплексная иммунопрофилактика савьыонелле-за, хламидиозного аборта и бруцеллеза овец".
Обтьец и структура диссертации. Диссертация излажена на 114 страницах машинописного текста и включает введение, обзор литературы, собственные исследования, обсуждение результатов исследовании, выводы, и практические предложения. Работа иллюстрирована 18 таблицами, 9 рисунками.
Список литературы включает 127 источников, в том числе 14 иностранных.
Исследования проводились в лаборатории по изучению болезни овец Кыргызского научно-исследовательского ветеринарного института (Кырг. НИВИ) НПО по ветеринарии Кыргызской аграрной академии. Основные исследования диссертационной работы выполнялись в течеюш 1991-1995 гг. в соответствии с планом НИР института, утвержденного комитетом по науке и новым технологиям МОН Кыргызской Республики (тема 05, N госрегистрации 190.0025495).
Эпизоотологические исследования проведены в шести областях республики, в том числе в неблагополучных хозяйствах Сокулукского, Аламудунского, Ысык-Атинского и Джети-Огузского районов, с применением се-" рологических, бактериологических методов и статистических.данных.
Особенности эпизоотической ситуации в республике по абортогенным инфекциям свец изучали по материалам экспертйзных данных межрайонных, областных и Республиканской ветеринарних.лабораторий, отчетности НПО по ветеринарии за последние 15 лет (1980-1995 гг.) и собственных исследований. Изучали распространенность бруцеллеза, сальмонеллеза, хламидиозного аборта овец в республике, прослеживалась динамика заболеваемости, учитывалось количество абортов' и мертвороддений. плода, особен^ ности распространения и проявления заболеваний. По методике И.А.Баку-лова; (1982) определяли заболеваемость овец абортогенньми инфекциями в пересчете на тысячу голое восприимчивого поголовья, вычисляли их удельный вес по областям и в целом по республике по отношения к другим заразным заболеваниям. По данным регистрируемости заболеваний составлена карта распространения абортогенных инфекций в Кыргызской Респуб-
- б -
лике.
Для проведения лабораторных и научно-производственных опытов пс комплексной шшунизашш овец, против сальмонедлеза, хламидиозного аборта и бруцеллеза были использованы вакцины: эмульсин-вакцина, инактивн-рованная против хламидиозного аборта овец; живая сухая вакцина протш сальмонедлеза из шташа 274 НАН Кыргызской Республики; живая суха* вакцина из штамма 19 Brucella abortus.
Комплексная иммунизация проводилась согласно наставлений по применению вышеуказанных биопрепаратов: хламидиозную вакцину вводили і верхню» треть шеи, подкояно в дозе 1 мл; садьмонеллезную - внутримышечно, в область внутренней стороны бедра в дозе 2 мл; бруцеллезную -подкожно, в бесшерстную часть локтевого сустава в дозе 40 млрд. микробных клеток в объеме 2 мл.
Ассоциированная вакцинация проводилась смесью трех испытываемы? препаратов в объеме 5 ыл, подікяшо, в область верхней трети шеи овцы. Смесь вакцин против хламидиозного аборта и садьмонеллеза вводили подкожно в бесшерстную часть бедра в количестве 3 мл.
Изучение антигенной совместимости, реактогенности и конкуренцш вакцинных штаммов при комплексной иммунизации проводили в опытах на 4С морских свинках. Основные опыты ставили на 150 овцематках, клиническі 'здоровых, сэронегативннх на абортогенные инфекции. До начала и в период опыта определяли клинико-гематологические и серологические показатели по общепринятым методам лабораторных исследований.
Динамику образования антител изучали по реакции агглютинации (РА] с бруцеллезным и сальмонеллезным антигенами и реакции связывания комплемента (РСК) с хламидиозным антигеном. Реакцию считали положительно! с хламидиозным антигеном в титре 1:16, с бруцеллезным -*1:25 и с саль-монелдезным в титре 1:50.
Для изучения образования колострадьного иммунитета у ягнят, родившихся от комплексно иммунизированных овцематок, в течение 3-5 днеі после ягнения серологически исследовали сыворотки молозива.
При экспериментальном заражении комплексно вакцинированных « контрольных групп морских свинок и овцематок использовали эталонные штаммы сальмонелл и хламидий, полученных в институте биохимии и физиологии НАН Кыргызской Республики. Инокуляцию возбудителя хламидиозногс аборта шта«м "Ш" в инфекционном титре Ig 6.5 10е-33 а/Щ-50/0,3 ш произвели подкожно в область бедра. Инокуляцию возбудителя сальмонедлеза штамм Salmonella abortus ovis - 372 в инфекционном титре (для бе-
лых мышей массой 14-16 г - 100-200 тыс. микробных клеток) ЛД-50 -2х105 м.к. провели в дозе 4 ылрд. м.к. внутримышечно в область бедра.
Контрольных и моновакцинированных животных заражали соответствую-щиии эталонными штаммами в инфекционных дозах.
Изучение клеточного иммунитета у комплексно иммунизированных ди-вотных проводили по методике П.А.Триленко (1976) при определении опсо-но-фагоцитарной активности лейкоцитов и по методике В.Л.Солодовникова (198>> при выявлении розеткообразующих Т- и В-лимфоцитов. Розеткообра-зувщкми считали лимфоциты, плотно окруженные несколькими (не менее трех) зритроцитарнши маркерами, присоедннивэнкися к их поверхности. В качестве эритроцитаркых маркероз для определения Т-димфоцитов использовали свежеприготовленную взвесь эритроцитов козла, а В-лимфоцитов -эритроциты быка.
Для патоморфологическнх и гистологических исследований брали от б забитых овец кусочки тканей с мест инокуляции вакцин, из внутренних паренхиматозных органов и регионарных лимфатических узлов. Пробы орга-~ нов фиксировали в 1ОХ-ном растворе нейтрального формалина, а затем обезвоживали, уплотняли в спиртах возрастающей концентрации и заливааи цедлуидгогам. Гистосрезы окрашивали гематоксилином и эозином. . '
. Научно-производственные опыты по комплексной вакцинации овец проводили в АО "Достук" Аламудунского района,, неблагополучного по сальмо-неллезу, хламидиозному аборту и бруцеллезу. Опыты ставили на.2068 головах шести отар овцематок,- идентичных по иммунному фону,- возрасту и находящихся в аналогичных условиях содержания.
Статистический анализ полученных цифровых" данных проводили с оценкой среднеарифметических значений и их стандартных отклонений, используя метод оценки критерия Стьюдента (t) согласно методикам, описанным И.П.Ашмариным и А.А.Воробьевым (1962).