Введение к работе
Актуальность темы. Овцеводство - Еакная отрасль в структуре лшЕотноводотва России и поэтому профилактика и борьба с инфекционными болезнями имеет первостепенное народнохозяйственное значение
К числу таких заболеваний относится казеозный лимфаденит (псевдотуберкулез). Ежегодный экономический ущерб ОТ' этой инфекции только по (лиской области составляет I млн. 307 тыс. рублей (в ценах 1983 г.), что обуславливает необходшюоть более глубогого изучения болезни.
В настоящее время изучены некоторые вопросы эпизоотологии, этиологии, течения и клинического проявления болезни, разработаны катоды диагностики.
Особенно мало изучены вопросы хщщопрофилактики и химиотерапии данного заболевания. Ь отечественной и зарубежной литературе сведения о хшиотерапевтичеоких вешеотвах, активных в отношении (чувствительность, лвчение)недоогаточны и противоречивы.
Исходя аз этого изыокание хшшотврапевтачеоких препаратов,, которые бы обвопачавали лечение казеозного лшфданата овец, имеет большую актуальность.
Цель работы. Изучать чувствительность коринебактарий казеозного лимфаденита к химиотврапевгичеоким вешвотвам и разработать метода лечения на экспериментально заразенннх животных.
Задача исследования: ' I, Екявить в опытах^ ^//^чувствительность
коринебактериіі к хиілпотерапевтпческим Еешествам разных групп: антибиотикам (канаыщану, рифакпицину,. бензилпенициллину), HACK, етоїшю, производным никотиновой, параокоибензойной кислоты И 0КСІШШ0ЛИН0В.
-
Изучить влияние химиотерапевтических соединений на ультраструктуру коршебактерий.
-
Изучить химиогерапевтическую активность препаратов в опытах на лабораторных животных.
-
Изучить лечебную эффективность антибиотиков при экспериментальном казеозноы лимфадените овец.
-
Изучить действие наиболее перспективных препаратов на клинические, гематологические, биохимические показатели,
а также на состояние неопеїщфаческой резистентности организма.
Научная новизна. Изучено бакгериостатическое действие хиыногерапевтическйх препаратов разных групп на штампы коринебактерій. Изучена ультраструктурная характеристика коринебактерій пооле воздействия бензилленициллша и рифампицина. Установлено, что лечение рифаьшишшоы, бензшшенищшшном и канашщином оказывает благоприятное влияние на клинико-гемато-логичеокий отатуо и биохимические показатели организма овец, стимулирует неопецифачеокую резпотентнооть. Определена лечебная эффективность втих препаратов при экспериментальном к'азеоз-ном лимфадените овец.
Практическая ценнооть. На основании проведенных иооле-доваиюй&іЛ/Ф Ніл liVP определены лекарственные препараты, проявляющие бактериоотатичеокое и бштерицдцное Действие на возбудителя казеозного лимфаденита. Разработаны схемы лечения овец ^^?^wsx../(>seud/%tfi>e/ta{&SCi-. , о применением кана-і.'.іодша,рп$аьшиціша к бекзилпвНЕДШШша.
Апробация работы. Материалы диссертационной работы доложена на внугривузовских конференциях преподавателей и аспирантов Омского института ветеринарной медицины в 1993, 1994 гг.
Публикации. По материалам дисоертации опубликовано четыре статьи.
Объем и структура дисоертации. Работа изложена на 148 страницах машинописного текста и включает: введение, обзор литературы, собственша иссльдования, обоузэдвнив полученных результатов, вывода, практические предложения, список" литературы и приложение. Диссертация иллюстрирована 18 таблицами, -U7 рисунками. Список используемой литературы включает 95 источников, из них 70 иностранных.
Основные положения, выносимые на защиту;
-
Материалы по определению чувствительности коринебактерій к химиотералевтическим веществам.
-
Материалы по изучению лечебной эффективности антибиотиков в опытах на овцах и лабораторных яивотных при экспериментальном казеозном лимфаденита.
-
ДеіістЕиа бензилленициллина и рифампицина на суб- -микроскопические структуры коринебакгерий.
Материалы и методы исследований , Исследования проводили с 1091 по 1994 год в лабораториях кафедр кикробиологии, эпизоотологии и патологической
анатомии Омского института ветеринарной медицины. Биохимический анализ сыворогкл крови проводили н областной ветеринарной лаборатории и межотраслевой биохимической лаборатории 0ІИШ. Изучение активности химиотерапевтических препаратов на овцах, наблюдение за клиническим состоянием животных, отбор проб сыворотки крови и цельной крови проводили на базе учебного хозяйства "Камышювское" Любинского района Омской области.
Объектом для исследований служили лабораторные животные (69 белых мышей и 30 морских свинок), CG баранов 1992 г. рождения породы Советский'меринос.
Материалом исследования служили итамьш и культуры
C.pjeudetufeAeufrUL в/1,^ ,-формах: Ш 70-/?, 74-/?, 209-/?,
146-5, депонированные в ЕЛКИ КІ.В. Заболотних, Н.М. Колычевым
и И.Г. Трофимовым в 1991 году, а также Ш 37-У, 220-У?, 61-ft
70/33-п, выделенные от больных казеозным лимфаденитом овец
в хозяйствах Омской области (И.Г. Тізофшов, 1984, М.В. Забо
лотних, 1989). '
При выполнении работы использовали следующие метода: клинический, аллергический, бактериологический, биологичеокйП» патологоанатомический.
Культивирование коринебакгерий осуществляли ка шоо-поптонном агаре (ША), кровяном телдуригОТШ агаре (КТА), сывороточном теллуритовом агаре (OTA), шоо-пептонном бульоне (ЬШБ) и сывороточном мясо-пепгоннои бульоне о 10$ нормальной лоишдшшой сыворотки, Ш оред 7»2-7,6.
Инкубирование пооевов проводила в обычном тершотаге
при температуре 37 С в течение 2-5 дней. , '
Для изучены активности коринебактерий к химиотерапевти-ческим веществам применяли метод серийных разведений в МПБ о добавлением 10$ нормальной лошадинной сыворотки и без нее.
Для исследований нами были отобраны следующие химиотера-певтяческие соединения:
-
Производные никотиновой кислоты - изониазид, альдозон.
-
Производные окоихинолинов - бромоксин.
-
Производные параоксибензойной кислоты, ее эфирц: метиловый г нипагиа и лрошдавый - нипазол.
-
Чатввртачша еоюнвевые основания, детергенты - атоний. б. Парашияоаадтаиювая кнодота (ПАСК).
-
Антибиотика - канашвди, рифампивдн, бензидпеницшшн.
Изучение активности антибактериальных препаратов продолжили аа лабораторных mbqthhx а овцах.
Возбудителем казеозаого дшфадеаята заражали 45 белых шавйі Вавеоь готовила на физиологическом раотвора из двух-еугочаоа культуры, наращенной да ШІА. Культуру из. штамма № 70 вводила внутриоршшшо а дозе 500 .ллн. микробных тел. Еивотных разделала на девять групп по пять в каждой. В первой, четвертой а оадьмоЦ олнкш группах белых мышей лечили ри$ампяциноы пер-орально! s доза SO мг/кг, беазялленшцшшном внутримышечно в доза 10 мг/кг {четвертая группа) я, «анамицкном внутримышечно в доза 10 ідг/кг (оеды/ля гр. ) о третьего дня после заражения. Лабораторным виаоташ второй! пятой и восьмой ОПытннх груда эти препарата вводощ 6 седьмого дня после заражения в течение 21-го дня ежедневно один »аэ а день, Трэтья, шаотал и девятая группы слузгали контрольнім - в них лечения не проводили, „ і4орехзх сшмяк в «оджчеатва 30-тн разделила на щаоть
групп по пять в каздоіі. Первые три группы' заразили штаммом ,-. коринебактерий й 70, четвертую, пятую и шестую заразили штаммом И 37 подкожно в области иеи в дозах 250 и 500 млн. микробных тел. В первой и четвертой опытных группах животные получали рифамлицин перорально в дозе 20 мг/кг и канаыицин внутримышеч-но в дозе 10 мг/кг (четвертая гр. ) с первого дня заражения. Лабораторных животных второй и пятой групп лечили этими антибиотиками с седьмого дня после заражения в течение 21-го дня ежедневно один раз в день. Третья и шестая группы - контрольные," где лечения не проводили.
Лабораторных кивотных, павших по ходу опыта, вскрывали. При макроскопическом осмотре обращали внимание на наличие, спе-' пифических поранений в органах и тканях (воспалительные явления, гнойно-незротическпе очаги), делали из них мазки-отпечатки й ' посевы на питательные средн. После окончания опыта всех белых-. мышей и морских свинок убивали и проводили такие ке исследования.
Для аллергической диагностики применяли аллерген "прейсц-нокардин Е", который вводили в дозе 0,2 мл в подхвостовуга складку при помощи беэигольного инъектора БИ - 7 типа "Шмель". Учет реакции проводили через 24 часа.
После проведения аллергического исследования из. 36-ти баранов сформировали три опытные группы - по девять животных, в каждой, в овога очередь кавдую опытную группу делили на три под- ' группы - по три барана в каждой и контрольную четвертую группу-девять животных, так же разделили на три подгруппы. Для удобства эти группы и подгруппы обозначили цифрами, например опытная группа три, подгруппа один - 3.1. и т.д. (рис. I).
Всех баранов заразили штаммом коринебактерий В 70:
Рисунок I
Сжема опыта на овнах
1.2
подгруппа
подгруппа
2.1
Э «араичиха
4.3
З варанчик-а
36 баранчиков
2.3
3 ёаранчиха
2.2
3 варанчиха
4.1
3 баранчика1
| подгруппа
4.2
ІЗ <аранчиха
кивотных первой опытной группы и контрольной подгруппы 4.1. заражали в дозе 500 млн, второй опытной и контрольной подгруппы 4.2. задавали в дозе I млрд., третьей опытной и контрольной подгруппы 4.3, заракали в дозе 2 млрд. микробных тел.
Овцам опытных подгрупп І.І., 2.1,, 3.1. со дня заражения вводили бензилпешщкллин внутримышечно в дозе 20 ыг/кг, рифам-пицин пероралыю в дозе 15 мг/кг (подгр. 2.1.), канамицин внутримышечно в дозе 20 мг/кг (подгр. 3.1.) ежедневно в течение 14-ти дней. їлшоаньш опытных пидгуупп 1.2., 2.2., 3,2. препараты начинали вводить о седьмого дня посла заражения в течение 21-го ' дня: бензішіенициллпн и канашщин (подгр. 1.2. и 3.2.) в дозе 15 мг/кг, рифамшщин (подгр. 2.2.) в дозе 10 мг/кг лшвого веса. Баранов подгрупп 1.3., 2.3., 3.3. лечили о 30-го дня после заражения в течение 21-го дня: бензилленициллин и канамицин (подгр. 1.3. и 3.3.) инокулирозали в дозе 15 мг/кг, ріфампицин (подгр. 2.3.) в дозе 10 мг/кг живого веса.
. Антибиотики животным опытных групп вводили ежедневно диа раза, в контрольной четвертой группе лечение не проводили.
7 всех опытных и контрольных баранов за девять дней до начала опыта и на 12-й, 23-й, 52-й дни после заражения в цельной крови и сыворотке определяли содержание гемоглобина, лейкоцитов, эритроцитов, кальция, фосфора, общего белка, альбуминов, альфа-, бета-, гамма-глобулинов, каслотпукг емкость и бактерицидную активность сыворотки крови.
Для алектронномикроскопического исследования действия антибиотиков на субмикросколичзокие элементы бактериальной клетки били взяты коринебактерии-штамма Я 70 ,Л .
Статистическую обработку результатов исследований проводи ли на персональном компьютере//^PC/AT" процессор 286/287,
с применением программ 'StS", "Stat^a/tAm ", й&и#1-2-3". Набот материалов осуществляли по программе ^Й^/З^й?/, на npHHTepe^W/ST- 1050.
