Введение к работе
Актуальность темы. В связи с индустриализацией свиноводства, :согда содержание и разведение десятков тисяч животных осуществ-ілется в замкнутом цшеле, особешо актуально стоят вопросы максимального сохранения поголовья шівотннх. Возникновение в таких хозяйствах трансмиссивного гастроэнтерита свиней (ЇГС) наносит зцугишй экономический ущерб свиноводству.
Бхкное значение в успешной борьбе с отш заболеванием имеют луб окно знания различии биологических свойств вируса ЇГС как иконных, тек и эпизоотических ытаиыов, что обязательно при производства вакцин и диагностических препаратов, шеются некоторые іведения о различной устойчивости вируса ЇГС к действию температур окружающей среды (С.Христов и др. і 1275; Л.П.Закстильская, і.В.Шеоолдов, 1977; В.Т.Котоп, Л.Г.Гіахов, 1973; Л.Мотовски и др., .981; А.И.Собко, 1981; J./MU
Качество выпускаемых средств спецнфпчзско! профилактики про-ив ЇГС зависит не только от условий хранения вирусного сырья, :о также от успешного шбора систег.ы кульгішірозгшіл вируса.
При создаїиіи вакцин, диагностических препаратов п получении гтоі(уированшх штаммов необходимо учитмвать осїссгйошіуп варка-ишюсть вирусов и гетерогенность их популяций 2 биоценозах,ко-орце иногда енглалт их ценность (й.Л.Цедписгнн, 1988; B.A.ibe-іічнов, іі.Л.Грабачев, Н.С.Гарин, 1977).
ІЗ ряде случаев нелатогеншо вирусы, :і гак:::з ,;a-:>Hj і?!Чу!Ш і: здавлешой вирулентностью способны шідуїурогагь іг/т'-ірп (Г.'1Л.'.у--іевекая, л.Л.лукаи, Г.Л.Чайковпкуя, 1970; Ге^шеї.пон О.'.М..'Г. К. Гу :елскул, ІУЇЬ; НЛ1Лшпты:х, К.ч.Есчароя, ІІ.Н.'1і.г>-.!ііек;;х,ІСг4). эз'гшшвенпо аберраций хромосом ;::пгот:«к нар:, цс-до'ггноС'.'Ь
генома и его функционирование. В связи с этим большое значение приобретает проблема создания безвредных в генетическом аспекте антивирусных препаратов.
Решение поставленных задач в успешной борьбе с вирусным
трансмиссивным гастроэнтеритом свиней возможно только на строго
научной основе. ,
Цель исследований. Изучение биологических свойств как вакцинных и эпизоотических штаммов вируса ТГС и их изменение в результате воздействия ряда факторов, а такие изучение влияния вируса ТГС на генетический аппарат клеток свиней и определение зависимости мутационного процесса в клетке ст применяемого штамм/-ьируса.
Основные задачи исследовпшй:
установить воздействие вируса ТГС на генетический аппарат клеток свиней;
разработать методы по предупреждению и выявлению вирусной контаминации культур клеток';
изучить процесс репликации вируса ТГС п культуре клеток при его адаптации к ней для определения различий между штаммам." л изучить влияние системы культивирования;
установить изменение инфекционной активности вакционных и эпизоотических штаммов вируса ТГС при пассировании в культурах меток, а тагско при использовании клеточного шнослоя разного возраста и смеси разных культур;
исследовать изменение структуры популяций вакцинных и snino отических штаммов вируса ТГС в зависимости от уровня naccarsi в культуре клеток, условий хранения, а также установить зависимость уровни инфекционной, активности с составом виру зной популяции;
- определить влияние услоЕій хранения вируса ТГС на его гп-
дать кариологическую оценку культура клеток с целью определения еа пригодности для проведения исследований по шявлеіптю мутагенной активности вируса;
раз работать методі; веские рекомендацій по анализу и учету аберраций хромосом свиней при вирусных инфекциях (гастроэнтеритах).
Научная новизна. Впервые описана динамика репродукции вируса 1ГС нескольких штаї.о.іов по скорости деструкции клеточного моко-сдол в зависимости от уровня пассажа в культуре клеток, применительно как к одинаковым, гак и различным ее сериям.
Впервые описана закономерность изменений в клеточном ыопослов (по характеру деструктивного действия) как у вакцшзгсго штамма "Риме", так и у опизоотического штамма "Л 1439/81", что связано со сроком проявления деструктивного действия вируса _1ГС и сменой структуры вирусной популяции.
Изучена в динамика смана состава популяции вируса ТГС по отдельным итаїдмам в зависимости от уровня пассата, сроков и типа, используемо;* культуры клеток, длительности и услоілій хранения, ь. такжи в связи с инфекционной активностью.
доказало елшлио многократного замораклвания - оттаивания на ин^екшошне свойства вируса ТІ'С как вакцинных, так и отшзооїи-чоскиг. итаммов.
Обнаружен стабильный компонент в популяции вируса, не изменяющийся при различных условиях.
Впйршя изучено влияние коропавируеа ТГС на нделодствелпый аші.х.т-т юн.-ток :і*к-]:ок:;тап:;і:х (гняглеп (лутагоізаі-і ізі^ічї).
.-.морену едода-а попытка уатаьомг:\ъ связь i.ie-ivZy мг^пг'-лмисніми рсзл.ічияип бі'.слсї'ііч'.:скн;: свойств rsipvca у его і у га:,и'"'0:'! wwa-
биологические свойства вируса ТГС штаммов "Риме", 41-4211. "Пур-дью-115',' "Миллер", "П 14^9/81" и "Л 123/79" применяются для их оценки и использования некоторых из них в качестве вакцинных.Применительно к коронавирусу ТГС определен штаммозависшиый мутоген-ный эффект, что позволит стбирсть для производства вакцин штаміьі вируса, не оказывающие гювраждаслцего воздействия на геном живоїг ного.
Методика по предупреждения и выявлению вирусной контаминации культур клеток изложена в "Методических рекомендациях по выявлению и предупреждению контаминации микоплазмаш и вируса.чи кдетсч пых культур", рассмотренных и утвержденных методическое' комиссией' Украинского научно-исследовательского ветеринарного института Г-ноября 1981 года (протокол If п), и изданных і/сссогісі тиражом
Экономический pfr*eкт. Полученные результаты по биологически..; свойстгам вируса ТГС используются при подготовке стаммов в нлча
СИЗО BaiayJIDSit И нрИМОНЯеШХ В ЕИрОкОЫ ПРОИЗВОДСТВЕННО..! Omii-j.
Используемая вакцина из штамма "П 1439/81' позволяет уменьшите ладе;;: :: потери ь привесах у низ от і ых. При атом экономический -.mj-,'окт составлпа"' РО ОХ руб. в год на 1 хоонйстяо с Zj 00С> ыи^.п--'v:\,
AiI2-lft5t'iiJci''iiii;- СсНОЗНЫО ПОДОциіИЛ ДИССерТаЦПИ Ди/UJ.'v.Ohi-'
конференциях молодих ученых и специалистов УкрШІВИ, г.Київ (1983-1985 гг.);
республиканской тучно-практической конференции, г. Киев, жтябрь 1983 г.;
республиканской тучно-производственной конференции, Киев, декабрь 1907 г.;
республиканской научной конференции молодых ученых, похищенной 70-летию ШШ1, г. Харьков, УШШЭВ, ноябрь 1988 г.;
второй Всесоюзной конференции по цитогенетике сельскохо-іяЛсjвенных животных, г. Ленинград-Пушкин, май 1988 г.;
научно-теоретической конференции молодых ученых к аспиран-'ов Каменец-Подольского с/х института, г. Кпменец-ііодольский, гай 19(39 г.;
республиканской научно-производственной конференции, г.Вп-'ебск, сентябрь 1990 г. J
расширенном меялабориторюм заседании сотрудников УкрІ-ІИЗИ т 29 октября 1990 г.
Публикация. Ш теме диссертации опубликовано II работ.
Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на столицах маииношхного текста, иллюстрировала 31 таблицами, IS ри~ укками. Объем текстовой части работы составляет 141 страниц, остоит из введения, обзора литературы, собстпешлх исслодсоа-ий, обсуждения результатов исследований, міводов и практических родлояениП. Список использованной литературы включает 277 ис~ очника, в том «тело 142 - отзчественных и 1.3:3 - сарубоетіх аз~ эроп.