Введение к работе
Актуальность. В последнее десятилетие отмечается четкая тенденция роста заболеваемости и смертности от болезней легких ( Чучалин А.Г., 1991 ). В этих условиях особую значимость приобретают поиск, разработка и внедрение в медицинскую практику эффективных отечественных препаратов, способных сократить продолжительность некротической фазы процесса заживления и обеспечить более быстрое и полное восстановление поврежденных клеток легких. Наибольший интерес с этой точки зрения представляют регуляторные пептиды, способные участвовать в различных физиологических процессах организма с обеспечением многих жизненно важных функций. Исследованиями последних лет установление, что легкие являются пептидергическон системой, продуцирующей довольно много пептидных соединений ( Сыромятникова Н.В.,1987;Чучалин А.Г.,1989; Булгаков С А., 1991 ), поэтому синтезированные отечественные пептиды ( бомбезин, даларгин, фактор роста нервов, карнозин и др. ) можно рассматривать в качестве потенциальных лекарственных средств, способных влиять на регенерацию тканей легких. В ходе скрининга 10 природных соединений, влияющих на внутриклеточный метаболизм, установлено, что наиболее эффективно влияет на регенерационные процессы дипептид карнозин, ускоряя процесс заживления экспериментальной раны легкого в 2 раза ( Корнилова ЗХ., 1991,1992 ). В связи с высокой биологической активностью карнозина открываются новые возможности его использования в пульмонологии в качестве ранозажнвляющего средства.
В настоящее время на С.-Петербургском заводе мед.препаратов разработана оригинальная технология субстанции карнозина из отходов производства АТФ, а также из мышц крупного рогатого скота
( A.c. 4695347,1989 ). Однако до настоящего времени какие-либо лекарственные формы карнозина отсутствуют. В связи с этим, разработка и внедрение в медицинскую практику эффективных отечественных лекарственых форм карнозина является актуальной проблемой.
При разработке лекарственной формы карнозина отдано предпочтение инъекционным растворам, поскольку они обеспечивают более длительное сохранение высоких концентраций карнозина в очаге поражения за счет замедления процессов его расщепления. Кроме того, инъекционные растворы наиболее универсальны в плане использования при различных патологических состояних.
Цель и задачи исследования. Целью настоящего исследования явилось теоретическое обоснование и экспериментальная разработка составов и технологии стабильных, эффективных, безвредных инъекционных растворов карнозина.
Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:
- теоретически и экспериментально обосновать составы
комплексных стабилизаторов растворов карнозина, выявить факторы,
влияющие на их устойчивость на всех стадиях технологического
процесса;
узучить возможность проведения дополнительной очистки карнозина;
апробировать имеющиеся, а при необходимости разработать новые физико-химические методики оценки качества инъекционных растворов;
исследовать стабильность разработанных растворов карнозина в процессе хранения, установить сроки их годности;
-изучить специфическую активность инъекционных растворов карнозина в качестве рзнозаживляющего средства;
-составить проект ВФС на инъекционный раствор карнозина для представления в Фармакологический комитет Минздравмедпрома РФ России.
Научная новизна исследований. На основании экспериментального изучения веществ с различным механизмом антиоксидантного действия обоснованы комбинации стабилизаторов, обеспечивающие стабильность 5% раствора карнозина в течение 2-х лет хранения (время наблюдения ).
Впервые изучению влияние чистоты субстанции на стабильность 5% раствора карнозина. Теоретически обоснованы и экспериментально разработаны технология изготовления и методики анализа 5% раствора карнозина. Показана возможность повышения качества карнозина, выпускаемого С.-Петербургским заводом, путем осуществления дополнительной очистки субстанции методом переосаждения и с использованием селективных для металлов ионообменных смол. Экспериментально установлены оптимальные условия разделения основного действующего вещества - карнозина и примесей аминокислот р - аланина и L -гистидина при их совместном присутствии хроматоспектрофотометрическим методом.
Впервые в ходе экспериментальных исследовании выявлен антиоксидантный эффект раствора карнозина разработанного состава, по силе действия сходный с ионолом. В опытах на животных изучено ранозаживляющее действие 5% растворов карнозина с различными значениями рН ( 8,3 и 5,4 ). Установлена выраженная специфическая активность, биологическая безвредность и стабильность в процессе длительного хранения предложенного для ВФС 5% раствора карнозина.
Практическая значимость работы. Разработаны составы, методы анализа и воспроизводимая технология эффективных и стабильных 5% растворов карнозина. Составлен проект ВФС на 5% инъекционный раствор карнозина, изготовляемый из заводской субстанции.
Разработана хроматоспектрофотометрическая методика количественного определения карнозина в присутствии сопутствующих примесей аминокислот.
В связи с выявленным, сходным с ионолом, антиоксидантним эффектом предложенного для ВФС состава раствора карнозина даны рекомендации по возможному его использованию для стабилизации липидов и фосфолитщов с целью предотвращения процессов липопероксидации.
С целью получения субстанции карнозина с более высоким содержанием основного действующего вещества, разработана методика проведения дополнительной очискы карнозина в лабораторных условиях.
Апробация работы. Результаты исследований доложены на Всесоюзной конференции биохимиков " Карнозин - биологическая роль и применение в медицине " ( Москва, февраль, 1992 ), на научных конференциях кафедры технологии лекарственных форм ММА им. И.М.Сеченова ( май 1992, октябрь 1992 ), на межкафедральной конференции кафедр технологии лекарственных форм, фармацевтической химии и фтнзиопульмонологии ММА им.И.М.Сеченова (декабрь 1992 ).
Публикации. По теме диссертации опубликовано 3 работы.
Связь задач исследований с проблемным планом фармацевтических наук. Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом научно-исследовательских работ ММА
им.И.М.Сеченова по теме : " Разработка рациональных лекарственных форм и их исследование ", относящейся к проблеме 10.06. Фармация.
Положения выдвигаемые на защиту. На защиту выносятся результаты исследований по теоретическому обоснованию и разработке составов и технологии 5% инъекционных растворов карнозина в зависимости от степени чистоты субстанции; результаты разработки методов контроля качества и изучения стабильности 5% инъекционных растворов карнозина , а также результаты исследования их специфической активности и биологической безвредности.
Объем и структура диссертации. Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы, 4-х глав экспериментального исследования, общих выводов, библиографии и приложений. Работа изложена на страницах, содержит 29 таблиц, 23 рисунка. Список ліггературьі включает 260 источников, из которых 77 на иностранных языках.