Создание лекарственных препаратов на основе фитохимического изучения некоторых видов наиболее распространенных растений, применяемых в народной медицине Монголии Дэнсмаагийн, Дунгэрдорж

Введение к работе

Актуальность работы. Изыскание эффективных лекарственных ;дств на основе природных продуктов для профилактики и лечения !личных заболеваний относится к числу важнейших задач мединской и фармацевтической науки. Из этого следует, что особое ічение придается химическим исследованиям лекарственных расте — й, разработке технологии и стандартизации лекарственных Маратов и сырья.

В настоящее время лекарственные вещества растительного прохождения составляют около 30% всех препаратов, применяющихся в іременной медицине. Практика показывает, что во многих случаях :арственные препараты из растений предпочтительнее синтетичес — (с. При лечении сердечно —сосудистых, желудочно-кишечных іолеваний, болезней печени и почек доля растительных лекарствен — х препаратов особенно высока.

В Монголии зарегистрировано более 2200 высших растений, из с около 750 известны как лекарственные. Между тем химическое гчение биологически активных веществ лекарственных растений галось лишь в последние 25 — 30 лет.

Актуальность поиска новых источников биологически активных цеств побуждает нас постоянно обращаться к опыту монгольской )одной, в частности тибетской медицины. Лечебный эффект лекар — енных композиций, применяемых в традиционной монгольской и іетской медицине широко подтверждается практикой. Известно, что [им из основных принципов монголо—тибетской медицины является ение всего организма больного, поэтому в ней используются не гничные растения, а сложные лекарственные смеси. Эта тенденция івела к выбору лекарственных растений не по семействам, а по ,ельным растениям, входящим в рецептуру.

Следовательно, химическое изучение природных соединений действенных растений Монголии, выяснение действующего начала жных лекарственных смесей, поиски новых путей применения их в чной медицине и сельском хозяйстве, а также разработка совре — шых технологий получений препаратов, являются актуальными.

Поэтому химическое изучение биологически активных веществ, работка технологии некоторых растительных композиций, облада— [их желчегонным, противовоспалительным, гепатозащитным и ибактериальным действием, является одним из основных направ — ий данной работы.

Актуальность поиска и изучения биологически активных веществ

и их препаратов, в частности предназначенных для лечения и профилактики повреждений органов гепатобилиарнои системы определяете тем, что заболевания печени и билиарнои системы занимает большо удельный вес /более 40%/ в группе нозологических форм, относящихся к патологии пищеварительной системы.

Более того, на высоком уровне устойчиво сохраняется заболеваемость населения вирусными гепатитами, многообразными стал токсические лекарственные и аллергические поражения органов гепатобилиарнои системы. В этой связи актуальность и необходимое! продолжения поиска и изучения новых эффективных лекарственны препаратов, предназначенных для лечения и профилактики заболеваний печени и желчевыводящих путей еще более возрастает.

Поэтому поиск лекарств среди растительной флоры Монголи имеет важное значение.

Как известно, биологическая активность растения обусловлеї наличием веществ, относящихся к разным классам природных соеди нений. Мы изучили главные компоненты исследуемых растениі такие как алкалоиды, кумарины, флавоноиды, ксантоны, иридоиді терпеноиды и др.

Цель и задачи исследования. Целью настоящей работы являете создание лекарственных препаратов, обладающих желчегонным, ге патозащитным, противовоспалительным и капилляроцкрепляющи действием, на основе химического изучения некоторых видов наиболее распространенных и широко применяемых в народной медицин лекарственных растений Монголии.

Для достижения этой цели решались следующие задачи:

1. Поиск перспективных растений, которые могли бы служи'
сырьевыми источниками биологически активных веществ желчегон
ного, гепатозащитного, противовоспалительного капилляроукрепля
ющего действия.

1. Разработка методов выделения и очистки биологически актив ных веществ из изучаемых видов растений.

2. Изучение химических, физико—химических и спектральных ха рактеристик полученных веществ.

4. Установление структуры новых и идентификация известнь
соединений.

5. Исследование метаболизма флавоноидов на примере кверцетин

6. Разработка технологии получения препаратов и нормативно
технической документации на лекарственное сырье и препараты.

Теоретическая значимость и научная новизна работ]

В Монголии впервые организовано химико — фармакологическс

ледование в области химии природных биологически активных ве — :тв. В результате изучения 12 видов лекарственных растений, [меняемых в монгольской народной и тибетской медицине выделено природное соединение, в том числе 4 алкалоида, 42 флавоноида, 16 нтонов, 4 иридоида, 3 кумарина, и 2 эфира тритерпеновой кислоты, них 6 оказались новыми, а 65 идентифицированы с известными.

эти вещества впервые найдены в изучаемых видах растений Мон — ии.

На основании спектральных данных /ИК —, УФ —, 'Н —, ^,3С — ЯМР, :с —спектры/ и химических превращений установлено строение овых природных соединений, 4 из которых относятся к алкалоидам, злавоноидам и одно к ксантонам. Среди новых веществ большой ерес представляет алкалоид, полученный из остролодочника мяг — [гольчатого — / + / — N — никотинол—2 — фенил — 2 — оксиэтиламин, орый оказался первым алкалоидом, производным фенилэтиламина, іющим в своем составе пиридиновый остаток.

Впервые в видах рода астрагал выделен агликон рамноцитрин, з астрагала перепончатого-редко встречающийся агликон-кумата— [ин, который в данном растении находится в свободном виде, делено новое природное вещество, не описанное в литературе и ванное пропингозидом.

Выявлена тенденция к существованию природных соединений в арственных растениях Монголии в отличие от других регионов в еа окисленной /гидроксилированной/ форме.

На основании анализа результатов исследований обоснована це — ообразность и доказана перспективность создания лекарственных паратов с желчегонным, гепатозащитным, противовоспалительным апилляроцкрепляющим действием.

Показано, что для развития этих исследований перспективны оторые виды горечавковых /семейство Gentianaceae/, астрагалов itragalus L./, остролодочников /Oxytropis DC/ и т.п. Они актеризуются оригинальным составом биологически активных (еств, имеют достаточную сырьевую базу и признаны научной ,ициной.

На примере кверцетина изучены пути метаболизма флавоноидов ультуре клеточных суспензий Nicotiana Tabacum и обнаружена >реляция между структурой и биологической активностью дленных веществ и их промежуточных метаболитов.

Практическая значимость работы и внедрение результатов :ледования. Результаты химического, фармакологического и нологического исследования изучаемых видов растений

позволили получить 6 новых медицинских препарато: /Биофлавон пропингозид, таблетки Силодин, Генцихол, Галехол сухой экстракт остролодочника шишковидного и гранулы Гепахол/ оригинальность которых защищена 18 авторскими свидетельствам] и патентами.

Разработана и утверждена нормативно —техническая документация на сырье и предложенные препараты. Технологи: производства созданных препаратов внедрена в медицинску* практику Монголии.

На защиту выносятся следующие основные положения:

Результаты химического изучения 12 видов дикорастущих лекарственных растений флоры Монголии на содержание алкалоидш ксантонов, флавоноидов, кумаринов и других классов природных соединений;

Разработка схем выделения и разделения вышеуказанных классов природных соединений;

Установление строения 6 новых природных соединений и иден -тификация 65 веществ;

Разработка технологии и нормативно — технической документа -ции для получения 6 новых медицинских препаратов и их внедрени в медицинскую практику Монголии.

Апробация. Результаты исследования доложены и обсуждены н I Международной конференции по химии и биотехнологии биологически активных веществ /Варна, 1981 г., Болгария/; IY Всесоюзно симпозиуме по химии природных соединений /Тбилиси, 1983 г., отчете за 1984—1985 гг. по программе сотрудничества стра членов СЭВ и СФРЮ по проблеме «Исследования в облает биологической физики» /Пушина, 1986 г./; республиканско конференции «Реализация научных достижений в практическо фармации» /Харьков, 1991 г./; конференции молодых учены Института химии растительных веществ, посвящении 60—летию СССР /г. Улан-Батор, 1990 г./; очередных конференция Института химии АН МНР /г. Улан-Батор, 1979, 1982, 198 1985, 1987, 1989 гг./; научно —практических конференция преподавателей Монгольского государственного медицинскої университета /г. Улан-Батор, 1978 — 1996 гг./; республиканскс научно — практической конференции по вопросам производств потребления, снабжения лекарств и изучения лекарственного сыр] /г. Улан-Батор, 1990 г./; Международной научно — практическс конференции «Традиционная медицина Монголов» /г. Улан —Бато

Э5 г./; научно —практических конференциях национального этра медицины Монголии /г. Улан-Батор, 1986 — 1995 гг./.

Публикации. По результатам исследований опубликовано 59 ра — г, получено 12 авторских свидетельств и 6 патентов.

Объекты и методы исследования. Объектами исследования слу— ли надземные части 12 видов растений (таблица №2), заготовленные

время цветения в различных регионах Монголии экспедициями редры фармации Монгольского Государственного Медицинского иверситета и лаборатории химии растительных веществ Института нии АН Монголии, а также полученные растительные препараты и овые лекарственные формы-настойки, гранулы и таблетки.

Получение биологически активных веществ осуществлено по об — принятым методам, в частности экстракцией органическими :творителями и перегонкой эфирного масла с водяным паром. Для ^деления и выделения флавоноидов, алкалоидов, ксантонов, кума— іов и иридоидов использовали методы колоночной и препаративной [кослойной хроматографии, а для терпеноидов-высокоэффективной овой хроматографии. Окончательную идентификацию выделенных ідинений проводили методами ИК —, УФ — , *Н—, ^,3С — ЯМР спек — эскопии, масс— и хроматомасс — спектрографии, а также шческими методами.

Разделение и выделение индивидуальных веществ. Для

уучения суммы алкалоидов использовали хлороформную :тракцию. Индивидуальные основания получили из суммы алоидов с применением различных органических растворителей, юльзуя растворимости как самих оснований, так и их ей, колоночную хроматографию и другие методы выделения.

Что касается выделения фенольных веществ-ксантонов, кумари — і, флавоноидов и других соединений, проводили экстракцию [ртом. Индивидуальные вещества выделили с помощью различной творимости и хроматографических методов.

Известные соединения отождествлялись сравнением физико —хи — іеских констант /состав, т.пл., /а/„ и данных спектральных /ИК —, —, ¹Н —, ¹³С—ЯМР —, масс —спектров/.

В таблице I приведен перечень выделенных соединений из изу— ;ных некоторых видов лекарственных растений Монголии.

Таблица № Природные соединения, выделенные из изученных лекарственных растений флоры Монголии

1. Ы-Бензоил-2-фенилэтиламнн

2. (+)-М-Бензоил-2-фенил-2-окснэтиламин

3. (-) Г<-Бензонл-2-фенил-2-оксиэтилаиин

4. (-) М-Нняотвноил-2-фенил-2-окснэтиламин

5. 1,5,8-тригидрокси-3-метоксвксавтов

6. 1Д8-трвгидрокса-4,5-диметоксиксантон

7. 1,3,5,8-тетрагидроксяксавтон

8. 8-0-рЧ)-глюкопнранозил-1,5-дигндрокси-3-монометокснксантон 8-0-{М)-глюкопвравозил-1,3,5-трвгидроксиксаятов 2-С-{И)-глюкопвравозил-1,3,6,7-тетрагидроксиксантов І-иовогндрокси-3,7,8-триметохсиксантов 1 -мовогидрокси-3,5,6-трннетокснксантон 1,8-дигидроксн-3,5-днметоксиксантон 1,7-дигидрокся-3,8-дннетоксихсантов 7-0-|Ю-глюі«ниранозил -І-моногидроксв-3,8 -дяметоксикинтоя l-O-jJ-D-глюиширавозил-3,7,8-триметоксихсантон l-O-p^-D-глюкопвравозил-7-мовогидрокси-3,8-диметоксиксантон 3,7і8-триметоіси-1(6-1)-примеїерозилксантон 3,8^-диметокси-7-мовогидрокси-І-О-Р-О-Сб-І)-првмеверозилісавтоп

Примечание: В пункте 5 таблицы номер соответствует номеру :тения в списке. В пункте б таблицы номер соответствует поряд— вому номеру опубликованной работы.

Установление строения некоторых алкалоидов, ксантонов эфирных масел проведено совместно с учеными Института Химии AI Монголии Д.Батсурен и О.Пурэв.

Таблица № СПИСОК ИЗУЧЕННЫХ РАСТЕНИЙ

Сем. Fabaceae lindl

9. Oxytropis muricata (Fall) DC-остролодочник мягкоигольчатый

10. О. Strobilacea Bge-остролодочник шишковидный

11. О. Trichophysa Bge-остролодочник пушисто — пузырчатый

Сем. Gentianaceae

4. Gentiana Barbata Froel-горечавка бородатая

5. G. Acuta L.-горечавка острая

6. Lomatogonium rotatum (L) Fries-ломатогониум колесовидный

Сем. Leguminosae

7.. Astralagus Mongolicus Bge-астрагал монгольский

8. A. propinguus B. Schischk-астрагал сходный

9. A. membrenaceus Fisch-астрагал перепончатый

10. A. Dahuricus DC-астрагал даурский

Сем. Umbellifeiae

11. Bupleurum scorzonerifolium Willd-володушка козлецелистная

12. В. Sibiricum Vest-володушка сибирская

1. Строение' N-бензоил-фенилэтиламина. Новый ациклически алкалоид /1/ состава C_I5H₁₅NO/MCBP/M⁺255, хорошо растворяете в метаноле, диметилсульфоксиде, хуже в ацетоне. УФ —спектр л-_т 208, 226 нм, характерен для веществ, содержащих ароматическс кольцо. В ИК —спектре алкалоида I обнаружены полос: поглощения NH —СО группы при 3390 и 1650 см^-1 . В масс —спектр его отмечены пики ионов с m/z 225 /М ⁺ / 134, 105, 104, 91, 7' Образование осколков с m/z 105 и 77 указывают н присутствие в молекуле 1 бензоильного остатка, а пиков ион с m/z 104 и 91-на возможное содержание в нем фенилэтильного радикала, который с учетом ИК —спектра и иок с m/z 134 (С H₈NO) связан с бензоилом посредство

Н-группы. Данное предположение всецело подтверждается ^э 'Н спектром соединения I (500 МГц, ДМСО-сі₆, 8) 2.84 /т., J-6.5 Гц, С₆Н_в-СН₂ /; 3.48 (м., 2H,-CH₂-NH-); 7.12 (т., 1Н, '.5 Гц, Н6); 7.24 (д., 2Н, J = 7.5 Гц, Н-4, Н-8); 7,29 (т., 2Н, Л = 7.5Гц, 5, Н-7); 7.44 (т., 2Н, J = 7.5 Гц, Н-3¹, Н-5¹); 7.51 (т., 1Н, J = 7.5 Гц, 4¹); 7.81 (д., 2Н, J = 7.5 Гц, Н-3¹, Гц Н-2¹, Н-6¹); 8.55 м.д. (уш.с, -NH —). Сравнение физико-химических констант и спектральных іктерстик I с таковыми известных алкалоидов показывает, что I ієтся природным новым алкалоидом — N —бензоил — 2 — фенил — іамином.

СНг-СНз-НН

_-r-O

2. Строение (+) N—бензоил-2-фенил-2-оксиэтиламина. Алкало —

/2/ состава C_I5H_I5N0₂ (МСВР)-новое оптически активное !\инение /a/_D+35,2 (с 0,68; метанол). В ИК —спектре 2 присутству—

полосы поглощения активного водорода /3350 см^-1/ и амидного бонила /1650 см—¹/, а его УФ —спектр (А,_тм нм, 207, 204 /плечо/ ти идентичен с таковым мурикатинина. ПМР —спектр 2 отличается :пектра 1 лишь тем, что вместо картины, типичной для группировки -СН₂—СН₂ —Ph—С = 0 в нем присутствуют сигналы, характерные

структуры:

Они проявляются в спектре в виде АВМХ системы при 3,51 (м.д. .1Н, J_BX=5,0 Гц; Л_ВА=8,0Гц; Л_вм=14Гц, Н-В), 3,91/ддд, 1Н, ^=3,5 ^ = 7,0 Гц; ^=14 Гц; Н-М), 4,95 м.д. (дд, Ш, ^ = 3,5 Гц, ^ = 8,0 Н-А/

Эти данные, а также разница в массах молекулярных ионов 1 и 2 ная 16 м.е. показывают, что в молекуле 2 при С —2 расположена роксильная группа. Следовательно, алкалоид 2 имеет строение ( + )

бензоил—2 —фенил—2 —оксиэтиламина, что хорошо согласуется с

масс спектром /схема 1/.

m/z(-H> 104(0

Масс — фрагментация соединений 1, 2 и 3.
I т/г 10« (3)

-щ/z 105(1,2;

^ і. r«h,x=ch o^«s;

/Г

2. R.0H, X-CH <М**41)

3. R.0H, X*N (M*ZM)

Схема 1

—«"/г (+h; ijsu;, із5(з;

— nyz (+*0136(3J

3. Строение /-/М-никотиноил-2-фенил-2-оксиэтиламиш

Алкалоид/3/ новое оптически активное соединение, имеет т. пл. 157-158С /из ацетона/, /и 2/ 25,3/с0,79,метанол/. В масс —спектре 3 схема 1/ имеется незначительный по интенсивности пик молекулярного иона C₁₄H_uN₂0₂ (МСВР), с m/z 242 и интенсивные пики ионов m/z 135, 136, 107, 106, 79, 78. Близкие аналогии между масс —спектрами 2, 3 и смещение пиков в последнем на 1 м. е. в сторону высоки масс по сравнению с 2 присутствие в составе этих ионов дополнительного атома азота /например, с m/z 106, C₆H₄NO/, свидетельствук о замене в 3 бензоильного кольца в ацильнои части молекулы 2 г гетероароматическое. Его структура, а также подтверждение предполагаемого строения всей молекулы вытекает из сравнительно! анализа ПМР —спектров 2 и 3.

В ПМР —спектре 3 /500МГц, ДМСО —d₆, рис. 1/, как и в спектр 2, имеются сигналы протонов Ph — СН(ОН) — CH₂NH — группиров* при 3,30 м. д. (м, IH, Н-С-Н); 3,48 (м, Ш, Н-С-Н), 4,77(м, IH, Н С-ОН; 5,49 (д, IH, J = 2,5 Гц; ОН) и 8,70 м.д.(т, IH, J = 5 Гц, № Однако в области резонанса ароматических протонов спектры зті соеднений различаются. Сигналы протонов фенильного радикала име ющийся в спектре 2, проявляются в спектре 3 при 7,22 м. д. (т. IH, J_op = 7,0 Гц, Н-6); 7,31 (т 2Н, J_OPro =7,0 Гц, Н5, N-7); 7,35 м. д. (д, 2] J_OPTO =7,0 Гц, Н —4, Н —8), а сигналы протонов бензоильного остаті отсутствуют. Вместо них обнаружено 4 четких однопротонных сигна. при 7,45 (дд. IH, J' = 5,0 Гц Л"_орто=8,0 Гц, Н-5'); 3,13 (дт, Jll_OPTO =8, Гц; J_META =1,3 Гц, Н-4'); 8,65 (дд, Ш, J'_OPTO = 5,0 Гц; J_№TA= 1,3 Гц, Н 6'); 1,95 м.д. (д, Ш,7 =1,3 Гц; Н —2'), химическиесдвиги мультиплетность которых свойственны протонам-замещенного пири динового кольца /Эмоли Дж. и др./

i.o m

_-t

_{-A -. і"}

«.« &M

_L+

-—?r

:. 1 ПМР-спектр /-/ 1М--никотиноил-2-фенил-2-оксиэтиламина.

Следоватеьно, алкалоид 3 отличается от 2 тем, что его ацильная ть представлена не бензойной, никотиновой кислотой. Отсюда [ него следует строение ( —) N — никотиноил — 2 — фенил —2 — :иэтиламин, которое подтверждается присутствием в масс— спектре [нтенсивных пиков никотиноильного и пиридинового ионов с m/z

и 79.

ОН _н

j^^Y СН- CRi-NH-C XsJ

Таким образом впервые был найден нами в природе алкалоид с шм заместителем никотиноила, относящийся к группе яилэтиламина, что позволяет расширить число и номенклатуру алоидов данного типа.

Важность масс — спектрометрической информации в дальнейшем іудила нас более детально изучить поведение соединений 1, 2 и 3 і электронным ударом.

Особенности масс — спектрометрической фрагмантации соединений 2 и 3 /Схема 1/ определяются характером ацильного остатка т. е. лчием бензамидной /1, 2/ либо никотинамидной /3/ группировки, гакже присутствием гидроксила при р —углеродном атоме дилэтильной группы /2, 3/. Последнее обстоятельство приводит к гтабильности молекулярных ионов 2 и 3, ввиду повышенной онности к разрыву связи — СН/ОН/ —СН₂ —. Наряду с простым

разрывом этой связи имеет место перегруппировка с миграцией атом водорода к а углеродному атому, что дает пики ионов максимальної интенсивности с m/z 135 /2/ и 136 /3/. Происхождение этих ионо подтверждено измерением их точной массы и спектрам: метастабильной дефокусировки. Часть продуктов распада молекулярны ионов 2 и 3 стабилизируется в виде /М —Н₂0/⁺ с m/z 223 и 22 соответсвенно.

Молекулярный ион 1 намного стабилнее. Ион с m/z 131 (C₈H₈NC в его спектре имеет среднюю интенсивность, перегруппировочный ио: с rn/z 135 не образуются, а максимальным является пик бензоильног катиона с rn/z 105. В спектре 2 пик этого иона второй п интенсивности, а в спектре соединения 3 аналогичный ион п происхождению пиридиноильный катион с m/z 106 является средни] по интенсивности. Другое свидетельство присутстви гетероциклического кольца—наличие пика иона пиридина C₅H₅N (m/ 79), превосходящие по интенсивности пика фенилкатиона с m/z 77.

Что касается фрагментов, образуемых за счет фенилэтильной част молекулы, то наиболее характерным является С₈Н₈ с m/z 10^ появляющийся в спектре соединения 1. Ион тропилия с m/z 9 значительно уступает ему по интенсивности. Это объясняете устойчивостью нейтрального фрагмента молекулы бензамида —пр образовании иона с m/z 104.

Пики оксибензильных катионов С₆Н₅СН = ОН с m/z 107(2 и І также невелики по своей высоте. Спектры 2 и 3 дополнительн характеризуются пиками ионов с m/z 122 (C₇H₈NO, 2) и 123 (C₆H₇N₂C 3), представляющими собой протонированный бензамид и никотинами соответсвенно. Кроме того в этих спектрах имеются пики ионов с m z 117 (C₈H₇N, 3),и 118 (C₇H₆N₂, 3), анализ происхождения которы потребовал дополнительного экперимента. Спектр МД ионов с rn/z 11 (2) и 118 (3) показал качестве предшественников ионы (М —Н₂0) и m/z 135 (2) и 136 (3). Из этого следует, что рассматриваемые ионі возникают в результате последовательного альтернативного удалени Н₂0 от амидной группировки и разрыва связи — СН (ОН) —СН₂— Дл них характерна следующая структура:

Х-О* (Я) X*N (3)

1. 1,5,8 — Тригидрокси — 3 — метоксиксантон представляет собо игольчатые кристалы. Имеет молекулярную массу М⁺274 и элементны

ав C_uH,_e0₆ т. пл. 275 —278С. В УФ спектре вещества наблюдаются іктерньїе максимумы поглощения при 254, 279, 330, 340 /нм/ [ениях, свидетельствующие о принадлежности соединения к [тонам, дополнительно, при снятии УФ —спектра вещества с гностическими реагентами (AICI₃, AICI₃/HCI, NaOAc) гистрированы следующие максимумы поглощения, указывающие оличество и положение функциональных групп в молекуле. А1С1₃ — 284, 330,390, AICI/HCI- 255,286, 330,378, NaOAc-269, 290, 368. Как видно из спектра, снятого с А1С1₃ наблюдается батохромный г в первой полосе поглощения на 50 нм, что указывает на наличие іодной гидроксильной группы в положении С —1 или С —8. В нейшем при добавлении HCI к тому же раствору изменяется іение максимума поглощения в первой полосе в сторону >хромного сдвига на 12 нм, что указывает на разложение тлексов, образующихся между двумя хелатным гидроксилами /С — С —8/ . При снятии УФ спектра с NaOAc не выявлено отличия по нению с основным спектром, что свидетельствует об отсутствии іодньїх гидроксильных групп в положениях С —3 и С —6. В ПМР спектре, снятом в ДМСО имеется синглет с интенсивностью ротонов при 3,91 м.д., указывающий на присутствие одной жсильной группы в положении С —3 молекулы вещества. При 11,9 ,2 м.д. значениях зарегистрированы два синглета с одно протонной шсивностью в слабом магнитном поле, что подтверждает наличие іодной гидроксильной группы в положении С —5. Таким образом, >лекуле данного ксантона найдены 4 функциональные группы. Как істно, в основном скелете ксантона, 4 положения ароматичесого і должны быть не замещенными.

Это подтверждается следующими данными спектра. Так, при 6.42 53 м.д. (д.д. по 1Н, J = 2.3 Гц, Н-4) п 7.27 и 6.66 м.д., по 1Н, J=8.9 Н-6 и Н-7) (/Рис.1, Табл.3/

Для доказательств количества и положения свободных эоксильных групп, допольнительно получено ацетильное изводное и для него сняты ПМР —спектры. ПМР —спектр -ильного производного содержит сигналы при 2,49 м. д. (СН, СОСН₃, С-1 и С-8) и 2,34 м.д. (с.ЗН, ОСОСН₃ С-5). Для определения количества углеродных атомов в молекуле были ы ^!3С-ЯМР спектр в ДМСО: 161. 9/C-l/, 97.4/С-2/, 167.0/С-92.9/С-4/, 157,3/С-4а/, 137.2/С-5/, 123,8/С-б/, 109,5 /С-7/, /С-8/, 107,4/С-8а/, 184,0 /С-9/, 102,1 /С-9а/, 143,3 /С-10а/ ,2/С-ОСН₃/.

По данным результатам ¹³С —ЯМР спектра обнаружены 14 родных атомов, положения которых интерпретируются согласно «ратурным данным (Kurt Hostettmann, 1978).

Рис.2 ПМР спектр вещества 1, 5, 8 тригидрокси — 3 — метоксиксантош

В масс —спектре кроме молекулярного иона М⁺274 присутствую пики иона с m/z 245 /М-29/+, 231 /М-43/+, 203 /М-71/+.

На основании вышеуказанных спектральных данных веществ идентифицировано с 1.5.8 — триокси —3 —метоксиксантоуном илі белли — дифолином.

2. 1.3,8 —тригидрокси —4,5—диметоксиксантон получено в вид желтого игольчатого кристалла, состава С₁₆Н₁₂0₇ с температуро; плавления 263 —268С /из метанола/.

В УФ —спектре вещества наблюдаются 4 максимума поглощения МеОН —255, 275, 339, 350. В УФ —спектре с диагностическим] реагентами / нм/: А1С1₃-255, 279, 350, 390, NaOM - 279, 370, NaOAc-278, 350, NaOAc /Н₃В0₃-278, 355, 390, AICI₃, /HCI-255, 281, 356, 39С Батохромные сдвиги УФ —спектра с А1С1₃ и NaOAc/40 нм и 3 ні соответственно указывают на наличие гидроксильных групп положениях С —1 или С —8 и С —3 или С —6. Эти предположения і дальнейшем подтверждаются 'Н — ЯМР и ^,3С—ЯМР — спектральным] данными. В ПМР спектре проявляются протоны при 3.83, 3.88, м.д. , с.с. по ЗН, 2хОСН₃, С-4, С-5/, 6.30 м. д. /с. 1Н, Н-2/, 7.48, 6.73 м д. /д.д. 1Н, Н-6, Н-7, J=1069 Гц/, 11.26, 11.57 м.д./с по 1Н, 1-ОН.8-0Н/ /Рис. 3/

В ПМР спектре ацетильного производства СНС1₃ присутствуют I протонный синглет ацетильных групп при 2,39 м.д. /с пл 6Н, 2хО-СОСН₃/, который свидетельствует о наличии хелатного гидроксила і положениях С — 1, С —8. А также 3-х протонный синглет при 2,34 м.д.

орый соответсвует ацетильной группе в положении С —3. В масс — ктре наряду с молекулярным ионом М+ —304, имеются пики ионов . 274, 246, 231. 185.

»-z

_JbuL.

J« L_

тг*?,)

»-t

*-t

_X.

(Ч

Ш-

-' ,2, '-

s-**

_JLli

4*jL_A*b-V.

Рис.3. ПМР спектр вещества 1,3,8—тригидрокси-4,5—диметоксиксантона.

На основе вышеуказанных данных и по сравнению их с гературными данными его характеризовано с 1.3.8 —триокси —4.5 — летоксиксантоном или коримбиозином.

3. 1, 3, 5, 8 — тетрагидроксиксантон. Игольчатые желтые кристаллы, еют элементный состав С₁₃Н₈О_в Т.пл.310 —312С. По данным УФ ;ктра оно относится к 1.3.5.8—тетразамещенным ксантоном. Это утверждается изучением ПМР спектра /ДМСО/, где проявляются 'налы протонов при 6.21,6.41 м.д. /которые соответстуют Н —2 и Н — V J=1.0 Гц/, 7.24, 6.63 м.д. /д.д. по Щ, J = 8.6 Гц, Х-6, Н-7/, 11.9, 7 м.д./с.с. по 1Н, 1-ОН,8-0Н/.

В ПМР —спектре ацетильного производного содержатся сигналы ;тильных протонов при 2.46 м.д /2хОСОСН₃ в положениях С—1 и -8/ и 2.39 м.д. /2хОСОСН₃в положениях С-3 и С-5/.

Положения функциональных групп и свободных протонов юлнительно доказано ^,3С — ЯМР спектром /Рис 4 и Табл. 4/

*Ц

) І

trntHtitytvA****""* '**»»

і і ' t^m

Рис. 4. ^UC —ЯМР спектр вещества 1, 3, 5, 8 — тетрагидроксиксантона

Иа основе Уф, ПМР, ¹³С —ЯМР —спектральных данных онс идентифицировано, как 1.3.5.8 — тетраоксиксантон илі дезметилбеллидифолин.

4. 8 —0 —b —D —глюкопиранозил— 1,5 — дигидрокси — 3 — моно — метоксиксантон — кристаллы светло-желтого цвета, состава С₂₀Н₂₀О_пН₂С

u_

(

_jjtl

Рис. 5. ПМР —спектр вещества свертианолина.

пл. 210 —212С /из метанола/. В УФ —спектре наблюдаются эактерные поглощения МеОН /нм/:254, 276, 325 свидетельствующие принадлежности соединения к ксантонам. В ПМР —спектре дечаются следующие характерные сигналы: 6.37, 6.58 м.д. /д.д.Н —2, -4, J = 2.3 Гц/, 7.28, 7.12, м.д. /д.Н-6, Н-7, J=-9.2 Гц/, 3.89 м.д. ЗН, С —3, ОСНЗ/, сигнал аномерного протона /д. 1Н, J = 7,6 Гц/ при 1 м.д. /Рис.5 Табл.3/

Из ¹³С—ЯМР — спектра /ДМСО/ видно, что одна метоксильная шпа находится в положении С —3 /56.2,ОСН₃/ /Табл.4/

При кислотном гидролизе вещества свертианолина обнаружены лкон, идентичный веществу беллидифолин и сахар — D — глюкоза. В 4Р —спектре ацетильного производного наблюдаются ароматические стильные группы при 2.34 м.д. /по ЗН, IxOCOCH,, С —5/ 2.40 м.д. 5 ЗН, 1хОСОСН₃, С—1/, это подтверждает, что одна из хелатных фоксилов /1—ОН или 8 —ОН/ замещена остатком сахара. Таким разом, это вещество охарактеризовано с 8—0—р—D— окопиранозил—1.5 —дигидрокси —3 —метоксиксантоном или фтианолином.

5. 8 — 0 — р —D — глюкопиранозил— 1.3.5 — триоксиксантон или
рсвертианолин.

6. 2 —С —р —D— глюкопиранозил—1.3.6,7

Таблица №3.

'Н - ЯМР спектр ксантоновых соединений горечавки острой.

Таблица г

¹³С - ЯМР спектр ксантоновых соединений горечавки острой

7. 1 — моногидрокси — 3, 7, 8— триметоксиксантон получено в ві кристаллов желтого цвета, состава С₁₆Н₎₄О₀ с температурой плавлен 154— 158С /метанол/. Имеет молекулярную массу М⁺302. В УФ спект вещества наблюдаются 4 максимумы поглощения: МеОН /нм/ —2 254, 314, 380.

ПМР спектр /СНС1₃/: 6.21 м.д. /p.2H.J = 2.5 Гц Н-2, Н-4/, 7.21м, Д.2Н, У=9Гц,Н-5,Н-5,Н-6/, 3.86 м.д./с.ЗН,ОСН₃, С-3/, 3.91 м, С.ЗН,ОСН_з1 Н-7/, 3.98 м.д./ с.ЗН, ОСН₃, С-8/, 13.24 м.д./ с ОН, С 1/ /Табл.5/. В масс —спектре кроме молекулярного иона М⁺3 присутствуют пики ионов с фрагмантацией 287, 284, 273 характери для 1.3.7.8 замещенных ксантонов. На основе его спектральн:

иных оно идентифицировано, как 1 — моногидрокси — 3.7.8 — яметоксиксантон.

8. 1 —моногидрокси — 3,5,6 —триметоксиксантон —игольчатые, этло —желтые кристаллы, состава С₁₆Н_м0₆ с темпратурой плавления 4-215С. УФ спектр /нм/ 252, 273, 328, 370. В ПМР спектре метаются следующие характерные сигналы: 3.94 м.д./с 6Н, 2хОСН₃/ .84м.д. /с ЗН.ОСН₃/, 6.44, 6.31 м.д. /д.д. 1Н, J = 2.5 Гц, Н-1, Н-2/ І.62 м.д. /д. 1Н. J=8.8 Гц,Н-6/, 7.22 м.д. /д.Ш, J=8.8 Гц, Н-7/, .16 м.д. /1Н,ОН/. На основании спектральных данных и по авнению со стандартным образцом, оно охарактеризовано как изомер кусатина.

9. 1,8—дигидрокси —3,5—диметоксиксантон. Представляет собой ->лтые кристаллы, состава С₁₅Н₍₂О_в М ⁺ 288 т.пл. —182— 184С етанол/. УФ спектры с диагностическими реагентами являются эдующими /нм/: МеОН-230, 255, 333, 392., NaOAc-255, 276, 334,, С1₃ -266, 288, 333, 392. В ПМР спектр /СНС1₃/ отмечаются їдующие протоны: 6.34 м.д. /д. 1Н, J = 2.5 Гц, Н —2/, 6.53 м.д. /д. 1Н,

2.5 Гц, Н-4/, 6.70 м.д. /д. 1Н, J = 9.0 Гц, Н-6/, 7.22 м.д. /д. 1Н, 9.0 Гц, Н-7/ 12.48 м.д. /с. 20Н, С-1 С-8/, 3.88 м.д. /с. ОСН₃,С-3.94 м.д. /с, ЗН, ОСН₃, С —5/. Следовательно, его охарактеризовано 1.8—дигидрокси —3,5—диметоксиксантоном. Это предположение в \ьнейшем подтверждается спектральными данными ацетильного оизводного.

Таблица №5.

Щ-ПМР спектр ксантоновых соединений Ломатогониума колесовидного

10. 1,7—дигидрокси —3,8—диметоксиксантон. С₁₅Н₁₂0₆ т.пл. /С/'-
192 — 193 /метанол/. Оно составляет более 30% от суммі
у-пиронов. Масс-спектр /т/е/: 280М⁺, 270 /М-18/+, 259 /М-29/">
245 /М-43/+. ПМР-спектр /WP-200^, в СДС1₃ /: 6,33 /д. 2H, J = 2F
J = 2,l Гц, H-2, H-4/, 7.21, 7,15/ д.д. по IH, J = 9,0 Гц H-5, Н-6/, 3,8
/с. ЗН, ОСН₃С-3/, 4,01 /с ЗН, ОСН₃С-8/, 13,12 /с. ОН, С-1/
5.29/ СОН, С-7/. ¹³С-ЯМР-спектр /СДС1₃/: 180,49 /С-9/, 166,02
С-6/, 162,82 /С-8/, 156,68 /С-13/, 149, /37//С-1/, 146,98 /С-2 /
145,32 /С- 12/, 124,38 /С-4/, 114,83 /С-11/, 113,06 /С-3/, 103,25
С-14/, 96,70 /С-7/, 91,72 /С-5/, 60,97 /8-ОСН/, 55,96/3-ОСН₃/
Оно харектеризовано с 1,7 дигидрокси —3,8 диметоксиксантон.

11. 7 —О — p — D —глюкопйранозил— 1 — моногидрокси — 3,8—димето
ксиксантон С₂₁Н_мО_и, т.пл. —150—152 /метанол/, по данны]
УФ-спектр /МеОН/-244, 256, 302, 365 относится к 1, 3, 7,
тетразамещенным ксантоном. Это подтверждается изучением ПМ
спектра //ДМСФ d_e, —шкала/, где проявляются сигналы протонов пр
7,36 и 7,20 /оба д. 5 = 9,0Гц, Н-6 и Н-5/, 6,86 и 6,72 /оба д. J = 2,5rr
Н-4 и Н-2/, 5,30 /д. J = 6,0 Гц Н-118 386 /с ЗН, 3-ОСН/, 3,94
с. ЗН, 8-ОСН/, 13,12/с. ОН, С-1/

Спектр ПМР —ацетильного производного, полученног ацетилированием этого соединения уксусным ангидридом в пиридин содержит сигналы протонов четырех ацетоксильных групп углеродно: части при 1,90 — 2,10 м.д. и одной Аг—ОСОСН₃—группы при 2,40 м.,г

Действительно, при кислотном гидролизе гликозида веществ получены агликон состава С₁₅Н_]20₆ т. пл. —192—195, идентичный 1, дигидрокси —3,8—диметоксиксантону и D —глюкоза.

УФ —спектр гликозида снятые с добавлением растворов А1С1₃ HCI, указывает на наличие в его составе хелатной гидроксильно группы. Это согласуется с данным ПМР —спектра /5. 13,12 м.д./.

Величина КССВ дублетного сигнала аномерного протона /5.5, м.^ >1 = 6,0Гц/сведетельствует о р —гликозидной связи D —глюкозы агликоном. Таким образом это вещество имеет строение 7—0—р—D-глюкопиранозил— 1 —моногидрокси —3,8 —диметоксиксантона является новым природным соединением.

12. 1 — 0 — р — D — глюкопйранозил — 3,7,8 — триметоксиксантої
С₂₂Н₂₄О_и т.пл. —138—140 /из метанола/. Уф —спектры
диагностическими образцами показывают на отсутсвие свободны
гидроксильных групп во всех положениях молекулы этого веществ*
ПМР-спектр /AMCO-d/6: 6.76, 6.72 /оба д. по IH, J=2, Гц Н-2, Н-
4/, 7,21, 7,26, /оба д. по JH, j=8,5 Гц, Н-5, Н-6/, 3,80 /сЗН, ОСН

З/, 3,84 /с ЗН, ОСН₃, С-7/, 3,88 /с ЗН, ОСН₃ С-8/, 5,43 /д. Щ, і,5 Гц р—гликозидной связи, D —глюкозы/. ¹³С—ЯМР — спектр / 20 d₆/5: 174,55 /С-9/, 164, 19 /С-6/,159, 0 /С-8/, 157,67 /С-13, 28 /С-1/, 149,00 /С-2/, 147,5 /С-12/, 119.79/С-4/, 112,17 /С-107,4 /С-14/, 117,4 /С—11/, 102,98 /С-7/, 94,86 /С-5/, 100,43/ I^і, 74,54 /С-2¹/, 75,97 /С-ЗУ, 73,44 /C-4V, 69,90 /C-5V, 60,89 -6V, 60,80 /С-3, ОСН₃/, 55,90 /ОСН₃С-8/, 56,64 /ОСН₃, С-7/. [ кислотном гидролизе гликозида получены агликон состава С₁₆Н_|40₆, іл. —164—165, идентичный —3,7,8 —/ОСН₃/₃— ксантону и D — коза.

Это вещество идентифицировано, как 1—0 — р — D — глюкопиранозил 7,8—триметоксиксантон.

13. 1—0—р — D — глюкопираноз ил—7 — моногидрокси — 3,8—димето —
ксантон. C^HjjOjj, т.пл. — 144 —146 /из метанола/. ПМР —спектр /
CO-d/5: 7.28. 7,07 /оба. д. по IH, J = 9,0 Гц, Н-5, Н-6/, 6,80, 6,64
ад. по IH, J = 2,5 Гц, Н-2, Н-4 /, 3,87 /с. ЗН, ОСН₃, С-3/, 3,82
)Н, ОСН₃С-8/, 5,48 /cIH, J = 6,5 Гц, р - гликозидная связь /с. 9,24
[ ОН при С-7/.

^,3С- ЯМР -спектр /ДМСО-d/S: 174,90 /С-9/, 163, 96 /С-6/, , 18 /С-8/, 157, 55 /С-13/, 148, 53 /С-1/, 146, 53 /С-2/, 145, 05 -12/, 122,73 /С-4/, 117, 07 /С-11/, 112, 17 /С-3/, 107, 62 /С-, 104, 08 /С-7/, 95, 01 /С-5/, 60, 60 /ОСН₃, С-3/, 55,59 /ОСН₃, 8/, 101,10 /С-IV, 77,50 /C-2V, 75,67 /С-3¹/, 73,33 /С-4¹, 69,86 -5V, 60,91 /С —6V. При кислотном гидролизе этого вещества аружен агликон, идентичный веществу 10 и сахар — D — глюкоза. В спектре, снятом в присутствии А1С1₃ не наблюдается бато. сдвиг, зывающий на наличие хелатной гидроксильной группы в молекуле. » согласуется с данными ПМР и ¹³С—ЯМР —спектров. Таким образом, вещество охарактеризовано с 1—0 —р —D — ікопиранозил — 7 — моногидрокси — 3,8 — диметоксиксантон.

14. 3,7,8—триметокси—1(6 — 1) — примеверозилксантон. С₂₇Н₃₂0₁₅,
\.-150 -152. УФ-спектр /нм/: /МеОН/-242, 250, 306, 360.
ігностические реактивы не влияют на УФ —спектр молекулы, что
яется доказательством того,что оно не содержит свободные
роксильные группы в молекуле. При кислотном гидролизе получены
икон, идентичный веществу 1— моногидрокси —3,7,8—
;метоксиксантону и сахара — D —глюкоза и ксилоза.

При сравнении ПМР и ¹³С — ЯМР — спектров этого вещества, оно іяется биозидом вещесвта 1— моногидрокси —3,7,8 — [метоксиксантона. Следовательно, вещество идентифицировано как 8 —триметокси —1—/б¹ — Г/ —примеверозилксантон.

15. 3,8—диметокси — 7 — моногидрокси — 1 — 0 — р — D(6 — 1) — приме-верозилксантон^^НзоО^, т.пл.-160-162. ПМР-спектр /ДМСО-d/f 6,64, 6,94/оба д.по Н, J = 2,5 Гц Н-2, Н-4/, 7,12, 7,36// оба д. по IF J = 9,0 Гц, Н-5, Н-6/, 3,90/с 6Н, 2хОСН₃ С-3, G-8/, 10,05/ сі ОЬ С —7/, 5,12 и 5,32 /оба дЛ = 60 Гц, Р — конфигурации аномерны протонов биозидного остатка/. При кислотном гидролизе обнаружені агликон, идентичны веществу 1,7—дигидрокси —3,8—диметоксиксантої сахар: D —глюкоза и ксилоза. Следовательно, ег охарактеризовано с 3,8— диметокси — 7 — гидрокси— 1 — 0 —р —D — (6'-1") — примеверозилксантоном.

СТРУКТУРНЫЙ АНАЛИЗ ФЛАВОНОИДОВ Флавоноиды некоторых остролодочников

І. Робинии. Соединение состава С_мН₄₀О₁₉ с т.пл. 250 —251 С /и метанола/ и 195-197С /из воды/. ИК-спекр: А,_тах 1670 /СО/, 3500 ОН/, 1610, 500, 1460 / С = С —связи ароматического кольца/ і 1100 см ^_> /гликозидная связь/.

В ПМР —спектре вещества в области ароматических протоно имеются сигналы при 6,85 и 8,09 м.д.,дд- J = 8,3 Гц по 2Н Н —2^і б¹] З¹,57, 6,43 и 680 м.д.,дд- J = 2-l Гц по IH каждый Н-6 и Н-8/, чті подтверждает строение вещества 3,7 —замещенного флавоноида. Такжі наличие сигналаов трех аномерных протонов сахарной част] показывает, что это соединение является флавоноидным гликозидом Действительно, кислотный гидролиз этого вещества приводит 1 образованию агликона и углеводной части, состоящей из рамнозы ] галактозы /2:1/. Присутствие сигналов, характерных 6 ароматически! протонам, а также 4 ОН при 12,45, 10,73 10,67 и 9,35 м.д. в спектрі агликона указывает на идентичность его кемпферолу. Прі ацетилировании этого соединения уксусным ангидридом в пиридині получили переацетатное производное с т.пл. 150—155С. В ПМР спектрі которого выявлены сигналы протонов метильнои группы и дву: ароматических /2.41 и 2.0 м.д. по ЗН каждый, с /из девятз алифатических /2.16, 2.13, 2.12, 2.07, 2.03, 2.00, 1.90 м.д. по ЗН каждьп с и 1.96, м.д. 6Н с/ ацетоксильных групп.

Порядок присоединения к месту расположения этог< соединения установлено сравнительным изучением его спектрі ЯМР ¹³С снятого ДМСО d₆, с данными ЯМР¹³С спектров і кемпферол—7 — 0 — рамно пиранозил—3 — 0 — глюкопиранозил— /6 — 1/ -0 —L —рамнопиранозида и кверцетин —3 — 0 —галактопиранозид< /табл. 6/.

ОН О Ш^^Хі

иоон

Таблица №5.

Данные спектров ЯМР ¹³С /ДМСО-(і_в/

2. Ликвиритигенин. Игольчатые желтые кристаллы, С_]5Н₁₂0₄, т.пл. -203 — 204 По физико-химическим свойствами, результатої* химического исследования и данным УФ, ИК, 'Н — ПМР —спектров, этс вещество идентифицировано как 2,3 —дигидро —7,4'—дигидроксифлавої или ликвиритигенин.

3. Рутин. Зеленовато — желтые кристаллы, состава С_иН_мО_|в М⁺610 с т.пл. 192 —193С /из этанола/. Для идентификации был снят ЯМР¹³С-спектр в ДМСО —d₆. Спектр ЯМР —^|3С соединения изучали н< оснвании анализа сигналов, полученных в условиях полной и неполно! развязки от протонов, а также путем сопоставления их с химическимі сдвигами углеродных атомов кверцетин — 3 —глюкопиранозида і кверцетин — 3 — 0 — З'-ОМе — рутинозида. Совпадение значенні химсдвигов агликоновой части сравниваемых соединений указывает н< идентичность этого вещества рутину.

Действительно, кислотный гидролиз его приводит к получении агликона и углеводной части, состоящей из D —глюкозы и L—рамнозы Таким образом, сопоставление физико-химических характеристик і отсутствие депрессии в т.пл. смешанной пробы с подлинным образцої. позволили идентифицировать это соединение рутином.

4. Пратол представляет светло —зеленый порошок, хороші раствормый в спирте. Имеет элементный состав С₁₆Н₁₂0₄, т.пл. 272-274. Структура данного вещества установлена УФ, ИК, 'Н —ПМ] спектральными показателями. На основании спектральных данных і по сравнению со стандартным образцом, это веществі идентифицировано как 7 — моногидрокси — 4' — монометокси — флавої или пратол.

5. 7,4'""ДИГидроксифлавон представляет желтые порошки растворимый в спирте, имеет элементный состав С,₅Н₁₀О₄ т.пл. 319-321. На основе Уф, ПМР, ¹³С — ЯМР — спектральных данных оні идентифицировано, как 7,4'—дигидроксифлавон, также подтвердило ш сравнению со стандартным образцом и химическим расщепление! этого вещества. Кроме того, что в остролодочниках шишковидном і пушисто — пузырчатом содержатся кверцетин и кемпферол, химически» исследования этих флавоноидов дано в разделе флавоноиды астрагалов

Флавоноиды некоторых горечавковых

6. 5.7.3'-тригидрокси-4'-метоксифлавон. С_]6Н₁₂0₆т.л. —252 —254
метанол/ ¹³С- ЯМР -спектр /ДМСО-d/5:181,69 /С-4/, 164.22/С-7.

163,61/С-2/, 161,51 /C-9/, 157.38/C-5/, 151,28/C-4V, 146,88/C-', 123,12/C-lV, 118.72/C-6V, 113,04/ C-2V, U2,32/C-5'/, 103,82/ -10/, 103,58/С-З/, 98,92/С-б/, 93.95/C-8/, 55,85/OCH₃, C-4¹/. На нове УФ —, ПМР —, ¹³С — ЯМР — спектральных данных оно идентифи — ровано, как 5, 7, З¹— тригидрокси —4¹ —метоксифлавон.

7. 6—C-P-D—глюкопиранозил-б^.ЗМ'—тетрагидроксифлавон. ₂Н₂₂О_п, т.ил. — 239 — 242, по физико-химическим свойствам, зультатам химического исследования и данным УФ, ИК, ПМР — ектров по сравнению со стандартным образцом вещество ентифицировано как изоориентин или 6 —С—P-D —глюкопиранозил— ^г,3',4' —тетрагидроксифлавон.

8. в-С-Р-О-глюкопиранозил-бД.З'^'-тетрагидроксифлавон. jH^Oj,, т.пл. — 256 —258. Это вещество охарактеризовано на основе ізико —химических исследований и УФ, ИК, 'Н, ¹³С —ЯМР ектральных данных как ориентин или 8 — С-p-D — глюкопиранозил— ', З'^¹ —тетрагидроксифлавон.

9. 7-0-Р-В-глюкопиранозил-5,3¹,4'-тригидроксифлавои. ,H₂₀O_n, т.пл.— 262 —264. По физико-химическим данным это щество оказалось 0 —гликозидом флавоноидов. На снове УФ, ИК, \ЛР, ¹³С—ЯМР спектральных данных оно идентифицировано, как 7 — p-D — глюкпиранозил—5,3\А¹—тригидроксифлавон или цинарозид.

10. б^ЗЧ^-тетрагидроксифлавон. С₁₅Н_]0О₆ т.пл. — 330 — 332С. Е> —, ПМР — , ¹³С— ЯМР —спектральные данные позволяют его ентифицировать как 5,7,ЗМ¹ — тетрагидроксифлавон.

Флавоноиды астрагалов.

Нами получено в общей сложности 23 флавоноидных веществ из грагалов монгольского, сходного, перепончатого и даурского. На новании проведенных исследований 14 из них отнесено к агликонам, -к моногликозидам и 4 —к биозидам флавоноидных гликозидов.

Химическое изучение этих флавоноидов нами проведены в 1970 — х>дах и поэтому мы считали целесообразным изложить данные о том, э как мы / Д.Дунгэрдорж и В.В.Петренко/ доказали химическую руктуру изученных флавоноидов, выделенных из астрагалов, оизрастающих и широко распространенных во флоре Монголии.

Изучение агликонов полученных из астрагалов:/флавоноид 11/ ерцетин из астрагалов монгольского, сходного, перепончатого и урского, /флавоноид 12/изорамнетин из астрагалов монгольского, одного и даурского, /флавоноид 13/ кемпферол из астрагалов репончатого и даурского, / флавоноид 14/ рамноцитрин из грагалов монгольского, сходного и перепончатого, /флавоноид 15/

апигенин из астрагала даурского и /флавоноид 16/ куматакенин и астрагала перепончатого.

Изучаемые агликоны дают положительную цианидовую реакцик которая характеризует их флавоноидную природу, а перехо оранжево — краснго окрашивания в слой октанола свидетельствует принадлежности исследуемых соединений к агликонам.

Темно —зеленое окрашивание с хлоридом окисного железа желтое с раствором циркония хлорокиси, исчезающее под влияние раствора лимонной кислоты, показывают коплексообразующуі оксигруппу в 5 положении апигенина и куматакенина. Сохранени желтого окрашивания после добавления раствора лимонной кислот] указывает на наличие оксигруппы в 5 и 3 положениях всех остальны веществ.

Раствор кверцетине в отличие от других восстанавливаю аммиачный раствор серебра нитрата, вероятно, за счет о-диоксигруппировки, которая обнаруживается также по образованш осадка с ацетатом свинца.

Хроматографическое поведение апигенина и куматакенин позволяет предположить отсутствие оксигруппы в 3 положении или ж замещение водорода в этой оксигруппе.

В ИК—спектрах максимиумы полос поглощения при 3500 — 3200 с ~¹ /ОН —группы/, при 1650—1670 см~'/С=0 у —пирона/, при 1520 см VCH — ароматических циклов/ при 840 см^-1/, пара —замещение бензольном кольце/. В изорамнетине, рамноцитрине и куматакенин отмечен максимум полосы при частоте 2945 см ^-1₍ что указывает н наличие метоксильной группы.

Помимо качественных реакций на отдельные оксигруппь положение фенольных гидроксилов обнаруживали по данным УФ-спектроскопии, применяя ионизирующие и комплексообразующи диагностирующие реагенты /таблица 7/. В УФ — спектрах исследуюмы соединений соотношение интенсивностей I и II полос поглощени является характерным для флавоноидов.

5 —оксигруппу в апигенине и куматакенине обнаруживали п батохромному эффекту на 45 — 48 нм в результате реакции комплексо -образования с раствором цирконила хлорокси, который исчезает пр добавлении раствора лимонной кислоты. Эта же группа проявляете также и по батохромному сдвигу длинноволновой полосы на 33 — 42 н; под влиянием хлористого алюминия в присутветви хлористоводородной кислоты.

Батохромний сдвиг максимума 1 полосы в керцетине изорамнетине, рамноцитрине и кемпфероле на 90 нм под воздействие: цирконила хлорокиси и на 40 — 60 нм при добавлении цирконил

эрокиси и лимонной кислоты указывает на оксигруппу в 3 и 5 уожениях.

7 —оксигруппа обнаруживалась в кверцетине, изорамнетине, ігенине и кемпфероле по батохромному сдвигу максимума 1 полосы

15 — 40 нм под ионизирующим влияниям натрия ацетата. Оксигруппа I^і —положении обнаруживалась во всех исследуемых веществах по гохромному сдвигу на 33 — 60 нм под влиянием натрия этилата. В эрцетине выявлена 3',4' —диоксигруппировка по сдвигу шноволновой полосы на 18 нм под влиянием борной кислоты и грия ацетата. Это же подтверждается и результатами ясутствии хлористоводородной кислоты. Известно, что алюминия эрид с флавонами и флвонолами, содержащими гидроксильные тїпьі в 3 и 5 — положениях, образует устойчивый комплекс в кислой эде и малостойкой — с веществами, содержащими о — жсигруппировку.

Следовательно в кверцетине имеются оксигруппы в 3,5,7,3',4' — южениях.рамноцитрине —3,5,4' — положениях.изорамнетине —3,5,7,4' положениях,апигенине —5,7,4' —положениях и в куматакенине —5,4" положениях.

Учитывая данные ИК —спектров изорамнетина, рамноцитрина и натакенина нами было проведено дезметилирование указанных цеств иодистоводородной кислотой в среде жидкого фенола и гусного ангидрида. При исследовании продуктов дезметилирования УФ —области с применением диагностирующих реагентов было гановлено наличие дополнительных оксигрупп в положении 3' зрамнетин, в положении 7 рамноцитрин, в положении 3,7 апигенин.

Положение свободных оксигрупп подтвердили также получением и щелочном расщеплении фенола,идентифицированного с ороглицином, что свидетельствует о флороглюциновой структуре іьца А,и фенолкарбоновых кислот: п—оксибензойной /рамноцитрин, чпферол.апигенин, куматакенин/, протокатеховой /кверцетин/, шлиновой /изорамнетин/,характеризующих строение кольца «В».

Таким образом, в результате проведенного исследования изученных цеств охарактеризованы как 3,5,7,3',4' — пентагидроксифлавон / ;рцетин/ 3,5,7,4' — тетрагидрокси —3' —метоксифлавон /изорамнетин/ 5,4'— тригидрокси —7 —метоксифлавон /рамноцитрин/, 3,5,7,4' — грагидроксифлавон /кемпферол/, 5,7,4' — тригидроксифлавон / ігенин/, 5,4'—дигидрокси —3,7 —диметоксифлавон / куматакенин/.

Смешанные пробы полученных ацетильных и метильных оизводных с достоверными образцами не давали депрессии чпературы плавления.а количество найденных ацетильных и гильных групп соответствовало количеству гидроксильных групп.

Xmax

S О

?. max

,+натрия вцвтат

!

і».

3 s

»

о>

.этилат натрия

ш tt

i\

>.max

S>.

Xnux

4>.

Изучение монозидов из астрагалов: /флавоноид 17/ — 3 —р —D — юкопиранозид изорамнетина из астрагалов монгольского, сходного, ірепончатого и даурского,/флавоноид 18/ —3 —Р~L— арабопиранозид імноцитрина из астрагала сходного и /флавоноид 19/ —3 —р —D — лактопиранозид изорамнетина из астрагала монгольского.

Эти вещества дают положительную цианидиновую реакцию по >ианту ,а факт не перехода красно —оранжевого пигмента в слой ;танола позволяет отнести их к гликозидам.что находит утверждению также в реакции восстановления жидкости Фелинга ісле предварительного гидролиза. На основании положительных явственных реакции соотношения агликона к углеводному мпоненту исследуемые вещества отнесены к моногликозидам.

Со спиртовым раствором хлорного железа изучаемые гликозиды разуюут темно — зеленое окрашивание, отрицателтьная реакция с 2% ітанольньїм раствором циркония хлорокси и лимонной кислоты наруживает свободную оксигруппу в 5 положении. Исследуемые щества не восстанавливают аммиачного раствора серебра нитрата, о указывает на отсуствие о — диоксигруппы в В —кольце.

При хроматографировании на бумаге с достоверными образцами икозидов в различных системах растворителей, полное совпадение раски пятен до и после проявления а также значения Rf, наблюдалось вещств выделенных из астрагалов монгольского и даурского с орамнетин — 3 — Р — D — глкжопиранозидом.

Спектральные исследования монозидов в УФ —области /таблица — с применением комплексообразующих и ионизирующих реактивов казали свооодные оксируппы в 5, 7, 4'— положениях вещества грагала мон — гольского, сходного и даурского и в 5, 4" — положениях щества астрагала сходного. Место присоединения сахарных мпонентов к агликонам устанавливали цирконий лимонокислотной обой и УФ — спектроскопией. Малый батохромный сдвиг в спектрах дкозидов по сравнению с агликонами при добавлении цирконила орокиси и отсутсвие сдвига с лимонной кислотой свидельствует о м, что сахара находятся в 3 положении.

Все анализируемые вещества подвергаются ферментативному аролизу ферментным препаратам гриба Aspergillus orysae.

В результате проведенного кислотного и ферментативного аролиза получены продукты, которые выделены препаративно и на нове физико-химических свойств и хроматографического сравнения изестными образцами идентифицированы как D —глюкоза и орамнетин, D —галактоза и изорамнетин, и L —арабиноза и мноцитрин. Изменение окраски пятен изучаемых моногликозидов на оматограммах в УФ —свете до и после гидролиза, а также

Спектральная характеристика изучаемых монозидов астрагалов.

Таблица 8

2*10 ⁵ молярный раствор вещества в эталоне

Изучаемые соединения

Ы S5

Флавоноид 17 Фпавоноид'18 Флавоноид 19

носительная легкость отщепления углеводных компонентов при слотном гидролизе дают основание считать местонахождение Сахаров 3 —положении. Гидролиз ферментом гриба Aspergillus orysae дает нование предполагать наличие Р — гликозидной связи в изучаемых эдинениях.

Исследования в ИК — области методом дифференциального анализа казали полосы характерные для карбонила у —пиронового кольца / 60 — см^-1/, сопряженных двойных связей /1595, 1578 см^-1/, нольных гидроксилов /3300, 3340, 3270 см^-1/. Наличие полосы О см^-1 является определяющим фактором 0— конфигурации акозиднои связи в пиранозидах. Полосы при 1052, 1074 и Э8 см^-1 указывает, что углеводный компонент в исследуемых їкозидах находится в пиранозной форме.

Итак, на основании химического и спектрального исследования цества из астрагалов сходного, монгольского и даурского можно арактеризовать как 3 — р — D — глюкопиранозид, рамноцитрин 3 — Р — -арабопиранозид, это вещество выделено впервые и названо опингозидом, изорамнетин 3—р —D —галактопиранозид.

Изучение биозидов, полученных из астрагалов: /флавоноид 20/
-0 — Р — D — глюкопиранозил /6—1/ — 0 — р — D — рамнопиранозид
эрцетина, /флавоноид 21/ — 3 — 0 — р —D — глюкопиранозил—/6 — 1/
) —Р~L—рамнопиранозид изорамнетина из астрагала ехидного, /
авоноид 22/ 3 —0 —р —D —галактопиранозил —/6—1/ —0 —р —D —
мнопиранозид кверцетина и /флавоноид 23/

0 — р — D — галактопиранозил — /2—1/ — 0 — р — L — арабопиранозид чпферола из астрагала даурского.

Полученные соединения — желтые мелкокристаллические рошки, хорошо растворимые в 70% этаноле, метанола, практически растворимые в эфире, хлороформе, бензоле, петролейном эфире ют положительные качественные реакции на флавоноиды. авоноиды 20 и 22 окисляются на холоду аммиачным раствором зебра нитрата.

Одномерной и двумерной хроматографией на бумаге в различных стемах растворителей доказана индивидуальность выделенных адинений. На хроматограммах в фильтрованном УФ —свете [козиды обнаруживаются в виде темно — коричневых пятен, окраска горых становится желтой при действии циркония хлорокиси. При следующей обработке влажных хроматограмм парами аммиака авоноиды 20 и 22 обнаруживаются по оранжевой, флавоноид 21 —

желто —оранжевой, флавоноид 22— по желто— зеленой уоресценции пятен. Значение Rf, в различных системах

Таблиц» N9

Поло-лосы погло-игскпи

творителей характеризуют изучаемые вещества как биозиды или ликозиды. При спектральном исследовании в УФ —области /таблица установлены свободные группы в 5, 7, 4' —положения /флавоноиды и 23/, 5, 7, 3', 4' —положениях /флавоноиды 20 и 22/. Батохромное щение максимума 1 полосы под влиянием циркония хлорокиси на -54 нм, которое устранялось при добавлений избытка раствора гонной кислоты, свидетельствуют о наличии углеводного заместителя 2 — 3, что подтверждается также устойчивостью изученных козидов к щелочному гидролизу. Для идентификации составных іпонентов выделенных веществ был проведен кислотный пенчатый гидролиз 0,05% раствором хлористоводородной кислоты в і этаноле. При этом агликоны в виде следов появляются уже на 3 іуте. Одновременно образуются новые вещества, которые занимали хроматограммах промежуточное положение к концу первого часа ілюдалось значительное количество этих продуктов. Данные пенчатого гидролиза вызвали у нас предположение, что образующие *ества являются моногликозидами, для идентификации которых мы делили их препаративно хроматографией на бумаге. Спектральные исследования в УФ — области свидетельствуют о козидировании анализируемых веществ по С —3. При шатографическом исследовании в присутствии достоверных іазцов установлена тождественность промежуточных флавоноидов 20, 22, и 23 соответственно изорамнетин — 3 —13 — D — экопиранозиду, кверцетин — 3 — J3 — D — глюкопиранозиду, рцетин —3 —13 —D —галактопиранозиду и кемпферол — 3—|} —D — актопиранозиду.

Для определения строения биозного заместителя в исследуемых >зидах подвергали их также ферментативному расщеплению с реоспецифическим ферментным препаратом рамнодиастазы, *епляющим биозы с /1—6/ порядком связи между остатками моноз. эматографией на бумаге установлено, что флавоноиды 21, 20 и 22 щепляются до биозы и агликонов. Агликоны на основании физико — іических свойств, спектральных и хроматических исследований растеризованы как изорамнетин /флавоноид 21/, кемпферол / шоноид 23/ и кверцетин /флавоноид 18 и 16/. На основании іического изучения сахарный компонент гликозидов /флавоноид 22 О/ идентифицировали с D —глюкозой и L—рамнозой, флавоноида 22 ілактозой и L—рамнозой, гликозида флавоноида 23 с D —галактозой L —арабинозой. Порядок связи Сахаров в биозе установили [слительной деструкцией ароматической части гликозида перекисью ррода с последующим аминолизом. Окраска биоз на хроматограммах :ле проявления их специфическими хромогенными реактивами ;азывает, что монозы в биозидах 21, 20 и 22 —связаны друг с другом

в порядке 1 — 6, в биозиде 23 можно предположить— в порядке 1—2.

Исследование биозидов методами дифференциального спектрального исследования в ИК—области показало, что оба сахара имеют пиранозную форму и Р — конфигурацию гликозидной связи между сахарами с агликонами исследуемых биозидов, которая подтверждается также расщеплением изучаемых гликозидов ферментными препаратом Aspergillus orysae и эмульсином.

Таким образом, исследуемые биозиды охарактеризованы как изорамнетин —3 —0— p — D — глюкопиранозил —/6 — 1/ —0 —р —L — рамнопиранозид /флавоноид 21/, кверцетин —3 — 0—p — D — глюкопиранозил—/6—1/-0 —p — L—рамнопиранозид /флавоноид 20/, кверцетин —3 — 0 — р — D — галактопиранозил — /6— 1/ — 0 — р —L — рамнопранозид /флаваноид 22/, кемпферол —3 — 0—p — D — галактопиранозил —/2 —1/ —0 —р —L—арабопиранозид /флавоноид 23/

24. Изокверцитрин — желтое кристаллическое вещество с т.пл 218 — 221, удельные вращения —63,5. УФ —спектры 355, 268, 358 нм, с ацетатом натрия 372 нм, с цирконилом хоридом 418 нм, с метилатом натрия 392 нм.

По физико-химическим свойством, данным УФ — , ПМР—спектре а также непосредственным сравнением с подлинным образцом этс вещество идентифицировано с изокверцитрином или кверцетин — 3 — 0—b — D — глюкопиранозид.

1. Гентопикрозид является масляной жидкостью состава С₎₆Н₂₀О₉ т. пл. -122-124. УФ-спектр /нм/6/ МеОН/-246 пл., 256 пл., 270 ИК-спектр /см-'/: 3533,3460, 3267, 1712, 1677, 1612, 931, 772 пики характерные для монотерпеноидных гликозидов.¹³С—ЯМР — спектр / d₂0/5: 98,5 /1/, 150,4 /3/, 104,4/4/, 125,2/5/, 117,8 /6/, 71,2 /7/, 133.Ї /8/, 45,4 /9/, 119,5 /10/, 167,5 /СО/, 99,6/17, 73,3 /27, 76,5 /37, 70,^ /47, 77,1 /57, 61,6 /67,. Иа основании спектральных данных пс сравнению со стандартным образцом, вещество идентифицировано как гентиопикрозид.

2. Свертиамарин представляет светло —зеленый порошок, хороше растворимый в спирте. Имеет элементный состав С₁₆Н_иО_и, т.пл. 113 — 115С. Структура данного вещества установлена ниже указанным* спектральными показателями.'Н —ПМР спектр /200МГц, ДМСО—Д₂0/

.60 м.д./д.ІН, J=1.4r₄,7.5 м.д./1К,Н~6в/, 4.60 м.д. /д.д.д. 1НД²⁼10.8Гц, Гц, Н-7а, 4,29 м.д./д.д.д. 1И,1Н,5 = 10,8Гц 9,9Гц, 3.2Гц, Н-7в/, 5,35 ^. /1Н,Н-8/, 535 м.д. /1Н, Н-Юа/ 5,25 м.д. /1Н,Н-10в/, 4,48 м.д./ 1Н,1=7.6Гц, H-1V, 3.00 м.д./д.д. 1H,J = 8,9 Гц, 7.6Гц, И-2/, 3. 10 »,. /1Н.Н-37, 3.10 м.д. /1И.Н-4'/, 3.55 м.д. /д.д. 1П,У= 11,9Гц, 1,5Гц, -6'а/, 3.45 м.д. /д.д. 1Н,1 = 11,9Гц, 6.3Гц, Н-6'в/ /Рис.6/

Рис. 6. 'Н —ПМР спетр свертиамарина.

¹³С -спектр /60МГц, ДМСО-Д 0, м.д. /: 96,48 /С-1/, 151,83 /С-108,6 /С-4/, 62,53 /С-5/, 32,04 /С-6/, 64,04 /С-7/, 132,79 / -8/, 49,87 /С-9/, 120,28 /С-10/, 164,33 /CO/, 98,24 /С-17, 72,87 -27, 76,10 /С-37, 69,99 /С-47, 77,37 /С-57, 60,92 /С-67. На іовании исследований вещество охарактеризовано с секоиридоидом :вертиамарин/, количество которого достигает до 2%.

1. Умбеллиферон. УФ —этого фенольного соединения с ксимумами при 229 пер., 294, 318 нм (lge 4,19, 4,34, 4,45) /характерен і производных кумарина. В ПК —спектре присутствуют полосы фоксильных групп /3280 — 3540 см"¹, С = 0 а —пирона /1706 см ~Ч ! = 0 а,Р — ненасыщенного сложного эфира /1693 см "7, — С —С — ізей ароматической системы /1608, 1590 см ~^л/ и простых С — 0 гзей / 1030-1112 см -Ч. По данным УФ-, ИК-, ПМР-спектров и эматографическим сравнением с подлинным образцом это вещество энтифицировано с умбеллифероном или 7 — моногидроксикумарином.

2. Скополетин — вещество, хорошо растворимое в метаноле пиридине и растворах щелочей. УФ —спектр с максимумами при 241 251, 296 пер., 321 нм (Іде 3,65, 3,53, 3,94, 4,08) указывает ні принадлежность вещества 7 — 0 — замещенным кумаринам. В ИК-спектре этого вещества имеются полосы поглощения, характерные длз гидроксильных групп /3300 — 3350 см^-1/, сложноэфирного карбонила , 1723 см"¹/, карбонила а —пирона /1710 см ~¹/ и простых С —0 связеі /1100, 1046—1105 см^-1/. Данные УФ — , ИК —спектров позволяю' отнести это исследование к производным кумарина. ПМР— спектрі данного вещества обнаружены сигналы протонов, обусловленньи наличием в молекуле — СН₃ группы и гидроксильных групп. Также, п< хроматографическим сравнением со стандартным веществом данної соединение охарактеризовано как б —монометокси —7-моногидроксикумарин или скополетин.

3. Эскулетнн. В ИК —спектре полоса при 3300 см ^-1 обусловлен колебаниями ОН групп, при 1666 см^-1 С = 0, а —пирона, при 1600 ] 1560 см^-1 — С = С— связами ароматической системы. Согласно данньп УФ—спектра с максимумами при 223 пер., 253 пер., 261, 334 нм (lg 4,15, 3,86, 3,91, 4,19) это вещество относится к 6,7— диоксикумаринаїу

Данные ПМР —спектра полностью согласуются со сделанным заключениями: дублеты при 6,02 и 8,09 м.д., J =10 Гц, обусловлен! протонами Н₃ и Н₄ уширенный двухпротонный синглет при 6,46 м.д. -протонами Н₅ и Н₈.

Масс —спектр содержит следующие пики ионов: m/z 178 /М⁺, 100! / 150/ М-СО.70/, 121/89, 111/7/, 94/10/, 81/8/, 74/8/, 69/23/ 65/13/, 65/9/.

Изложенные выше данные ПМР — , масс— и УФ —спектро показывают, что это вещество по —видимому, являете диоксикумарином. Значение химедвига Н₄ и Н₅ указывает на то, чт одна из гидроксильных групп занимает положение С₆ мета-расположение гидроксильных групп исключается на основани отсутствия батохромного сдвига в УФ —спектре при добавлени спиртового раствора ALCL₃. Следовательно это соединение должно бьп 6,7—диоксикумарин.

Мы исследовали эфирные масла в двух видах володушки Bupleu-rum Scorzonerifolium Willd и B.Sibiricum E.

Эфирные масла из изучаемых видов володушки мы получил

одом перегонки в аппарате типа Клевенжера.

Идентификация выделенных компонентов проводилась путем внения физико-химических констат и методом хромато — масс — ктрометрии и газожидкостной хроматографии.

Качественное и количественное определения состава эфирных ел сделано совместно с профессором Роберт Д.Адамса в Центре технологии и растений Вауларского Университета, Штата Техаса, [А.

В эфирном масле володушки козлецелистном содержатся 53 іества в общем количестве 5,6%, а из них 41 идентифицированы с естными, например: лимонен (15.21%), В — цимен (11.54%), (Е) —В — мен (10.502%) мирцен (8.09%) сабинен (6.56%), а-пинен (6.33%), макрен Д (4.08%), 8 —пинен (3.13%), спатуленол (2.73%), кариофилен ид (2.53%), кариофиллен—(Е)— (2.04%), метилсалицилат (1.76%), еканал (1.44о), у—терпинен (1.34%), у — муролен (1.35%), (Z) — В — імен (1.00%), тетрадеканал (1.00%), гумулененоксид (0.91%), камфен 4%), а —терпинен (0.367о), линалол (0.20%), а—камфоленал (0.40%), пин-4 —ol (0.48%), В-цимен —8 —ol (0.34%), борнеол ацетат (0.36%), туйен (0.69%), туйе-2.4 (10), диен (0.13%), периллен (0.50%), транс бенол (0.24%), транскарвеол (0.21%), кумин — альдегид (0.24%), карвон 9%), (цист) — карвилацетат (0.47%), а—копаен (0.50%), В —элемен 7%), гумулен (0.77%), тетрадеканал (1%) + нефиллен (0.57%).

В володушке сибирской установлено, что в ней содержатся 58 ірномасляничньїх компонентов 1.8%. Нам удалось установить [ическую структуру у 49 терпеноидов, именно: кариофиллен оксид 97%), спаталенол (7.25%), пентадекан (3.33%), гумуленосид (4.83%), пинен (4.20%), гентанол (3.18%), лимонен (3.30%), мирцен (3.1%), д зэргийн хэмжээтэй агуулагдаж байгаа нь b —цимен (1.68%), (Е) — оцимен (1.1%), линалол (1.63%). а —камфоленал (1.91%), не —пионкарвел (1.02%), транс вербенол (1.16%), и а —кубебен 6%), карвилацетат (1.69%), а-копаен (1.21%), Ь-кубебен (1.48%), кубебол (1.29%), Ь —кадинен (1.92%), (Е) — неролидол (1.179о), кубебол %) бага зэрэг хэмжээтэй байгаа нь Ь —пинен (0.64%), октанол (0.37%), -Ь —оцимен (0.27%), периллен (0.13%), транспинокамфон (0.36%), -терпинеол (0.33%), миртенол (0.3%), транскарвеол (0.66%), карвон 5%), борнилацетат (0.58%), тридекан (0.57%), (EL) — 2,4—декадиенал, цимен-8-ol (0.39%), (Е) кариофиллен (0.43%), Ь-(Е) ионен (0.32%), кадинен (1.92%), 1—эпикадинол (0.64%), герейкасан (0.56%).

(NICOTIANA TABACUM)

Флавоноиды обладают широкими спектрами биологическог действия в зависимости от их структурных особенностей. Однако, и метаболические пути превращения в живых клетках и механизм] действия еще не достаточно ясны. А также взаимосвязь межд структурами и биологической активностью флавоноидов и и метаболитов представляет большой интерес в науке. В связи с этил мы представляем здесь результаты метаболического превращени флавоноидов в культурах клеточной суспензии Nicotiana Tabacum н примере кверцетина и данные корреляции: структура — биологическа активность флавоноидов и их метаболитов.

Для исследования эффектов флавоноидов на рост и дыхани клеточных культур N.Tabacum нами использованы суспензи N.Tabacum, WB1—О, выращенные в питательных средах (V4) (Ми-rashige. T.Skoog.F., 1962), как стационарная культура, в течение 4 днеї Клеточно — суспензионные культуры N.Tabacum 3-х дневного возраст инкубированы с флавоноидами с концентрацией (Ю^-8—Ю^-4 м) течение 4 часов.

Эффекты флавоноидов исследованы путем измерения поглощение кислорода культурой ТаЬаса, используя полярографию — LP6 с кислородным электродом типа Кларка. Все измерения проведені в 0.1 М фосфатном буфере, рН —6.5 при температуре 27С. Результат: измерения иллюстрированы в табл. 10, 11 где показаны большо эффект на рост культуры N.Tabacum для кверцетина, рутина и и метаболических продуктов —димеров. При сравнении различны флавоноидов видно, что гидроксильные группы при положениях С — с С —4, С—7 также возможно и положении С—3 имеют большо значение в регуляции дыхательнного процесса клеточной культури Помимо этого гидроксильные группы этих положений могут служит активными центрами метаболического превращения флавоноидов клеточных культурах и в присутствии ферментных систем.

Для исследования флавоноидных метаболитов на пример кверцетина использованы клеточно —суспензионные культурі N.Tabacum 14 дневного возраста, которые инкубированы с 10" М кверцетином в течение 10 дней, жидкостная среда содержаща окислителные метаболиты кверцетина фракционирована и очищена помощью гель — фильтрации на сополимере (G — 5) (рис. №7) и их УФ -спектры показаны на рис. №8.

Таблица № 10.

Эффекты флавоиоидов на дыхание клеточно-суспензионной культуры N.Tabacum

Зшестятсл

Кос-

цент-р»чм (М)

(02X1 г) 60'

Сред,

ЭЧЭСРК

(X)

Таблица № 11

Эффекты метаболитов кверцетина на дыхание клеточно — суспензионной культуры.

ДО ЗО Зо ТО 90 YtO 1*5 Ї50 ЇТО \90

Рис. 7. Разделение метаболитов жидкостной среды с помощью колоночной хромотографии UVM — 4

Рис. 8. УФ —спектр выделенных кверцетин метаболитов.

Примечание:

Стандарт кверцетина.

о —о —

х—х —

Из УФ— спектров видно, что метаболит (II) имеет полимерный актер, метаболит (Ш) имеет максимумы поглощения при 350 нм и аболит (IY) при 292 и 330 нм, соответственно.

Вещество (I) имеет белковую природу, которая обнаружена в трольном испытании. Структура метаболита (III) кверцетина іновлена на основе его масс — спектральной фрагментации, как азана на рис. № 9.

с_мН_юо₆

m/z.(2f4)

^С15^НЮ7

mJ2.Aioz)

\ * ОН Г~ L_K

с₇н₄о₃

m/r- (136)

c₇H,p_s

m/z-(l3B)

m/z-(152) m/z-(iSOj

Рис. 9. Масс —спектр на фрагментации метаболита (III).

Основные метаболиты, образующиеся в клеточно — суспензионной .туре N.Tabacum являются фенокси —радикалом, ортохинонов, эром и полимером, о которых допольнительно подтверждают іьіе дифференциально — импульсивной полярографии. Согласно і данным кверцетин метаболизируется следующим образом:

1. Кверцетин— ОН—> кверцетин —0 +ne + nH

2. 2 кверцетин — 0 > димер <^— 0

3. Димер^—-0 > димер +0₂

4. Димер^— 0 + димер -^-— 0

^0 ^4) /п > полимер.

Основываясь на результатах исследований метаболизма зоноидов в клеточных культурах табака, мы считаем, что:

Іроцесс дегидрации флавоноидов в культуре клеточных суспензий N.Tabacum происходит с образованием фенокси —радикалов, ортохинонов, димеров и полимеров. Образующиеся промежуточные метаболиты флавоноидов оказывают более сильные эффекты на рост и дыхание клеточной культуры N.Tabacum по сравнению с исходными веществами.

Тути дегидрации флавоноидов в присутсвии ферментных систем сильно зависят от количества гидроксильных групп и двойных связей и их расположений. В этом смысле гидроксильные группы при положениях С —3, С —7, С —4', С —3' и двойная связь между С —2, С —3 флавоноидов являются чрезвычайно важными факторами для их метаболических процессов.

Га основании исследования метаболизма и биологического действия флавоноидов предполагаем, что биологическое действие флавоноидов ксантонов обуславливается образующимся в ходе их дегидратации промежуточными метаболитами в форме радикалов и хинонов. Эти интермедиаты взаимодействуют с теми ферментными системами, участвующими в данном биологическом цикле и тем самым проявляют свою биологическую активность.

На основании результатов химического и фармакологическої исследований 12 видов изучаемых растений, разработана технологи получения 6 новых медицинских препаратов и соответствующе нормативно — техническая документация на лекарственнное сырье предложенные препараты.

5. Настойка — Биофлавон пропингозид.

6. Сухой экстракт остролодочника шишковидного

7. Таблетки Генцихол

8. Таблетки Галехол

9. Таблетки Силодин

10. Гранулы Гепахол

1. Настойка-Биофлавон пропингозид.

На основе данных химического исследования некоторых виде астрагала нами получены препараты, содержащие суммы флавоноидо

Сумма флавоноидов астрагала сходного является составной часть препарата, условно названного нами Биофлавон пропингозид, которы является настойкой надземной части данного растительного сырья.

Получение Биофлавон пропингозида осуществляете экстрагированием растительного сырья 70% этиловым спиртої используя метод перколяции.

Биофлавон пропингозид представляет собой жидкость темно-коричневого цвета с приятным ароматным запахом и горьковаты вкусом.

Для контроля качества предложенного препарата разработаг методика количественного спектрометрического определения сумм флавоноидов на основе измерения максимума поглощения агликона продукта гидролиза гликозидов.

Содержание суммы флавоноидов в этом препарате должно бы^г 7.45±0.16%.

Препарат прошел клиническое испытание (Постановлені фармакологического комитета МЗ МНР N3 от 17 февраля 1974 г.) внедрен в медицинскую практику в качестве гипотензивного успокаивающего средства (Приказ Министра здравоохранения Mr N158 от 22 мая 1976 г.).

2. Сухой экстракт остролодочника шишковидного

Химические исследования травы остролодочника шишковидного зали, что в нем содержатся из биологически активных веществ н и кверцетин в общем количестве 5.42±0.66% Это обстоятельство побудило нас получить сухой экстракт из травы олодочника шишковидного и изучить его фармакологический ект.

Іухой экстракт из травы остролодочника шишковидного получали :ледующей методике: высушенное сырье очищали от примесей, ільчали на траворезке и просеивали через сито с размером рстий 3 мм. Просеянное сырье в реакторе с паровой рубашкой вали горячей дистиллированной водой и настаивали в течение 2 в при температуре 60С и атмосферном давлении. Затем теплую ую вытяжку фильтровали через бязь и отжимали на винтовом се. Шрот вторично заливали горячей дистиллированной водой и аивали в вышеуказанных условиях еще 2 часа. После этого лровали через бязь. Водные извлечения объединяли и отстаивали чение 24 часов в прохладном месте, верхний слой сливали, а ний слой фильтровали через нутч — фильтр Полученное водное ечение выпаривали на вакуум—испарителе при температуре 70 — . Сухой остаток измельчали и просеивали через сито №6. ученный сухой экстракт стандартизовали и фасовали в ветствующую тару.

Технологическая схема производства сухого экстракта из олодочника шишковидного представлена на рис. 10. Пухой экстракт из травы остролодочника шишковидного уставляет собой порошок темно —коричневого цвета, легко ворим в горячей воде, мало растворим в спирте. Фармакологическими исследованиями, проведенными в раториях Всесоюзного Центра гипербарической оксигенации и 5>ры фармакологии МГМУ установлено, что сухой экстракт юлодочника шишковидного обладает структурными юксидантными, капилляроукрепляющими и противовоспа — льными свойствами.

Таким образом, в результате химического, фармакологического и ологического исследований нами получен новый источник для ізводства рутина и рутинсодержащих препаратов., на основании разработана и утверждена необходимая НТД на сухой экстракт сударственныи стандарт на новый вид лекарственного сырья іава остролодочника шишковидного (УСТ —3304 —91).

І Т.п.1.1. Очистка сырья 1 .п. 1.1 Измельчание

f.n. 1.3. Просеивание

Т.п. 1.4. Взвешивание

Т.п.1. Подготовка
сырья

Т.п. 2.1 .Подготовка реактора

Т.п. 2.2. Приготовление дистиллированной горячей аоды

Т.п. 2. Мацерация

Т.п.З. Смешивание

перколята NN1.2.

| Т.п. 4.1. Отстаивание

1 Т.п. 4.2. Фильтрация

Т.п.4. Отстаивание и фильтрация

I Т.п. S.I. Сгущение

| Т.п. 5.2. Сушка

Т.п.5. Сгущеюю и сушка

Т.п.7. Просеивание

Т.п. 9.3. Оформление

Рис. Ю.Технологическая схема производства сухого экстракта и травы остролодочника шишковидного.

3. Генцихол- таблетки из сухого экстракта горечавки бородатой.

"оречавка бородатая широко известна в флоре Монголии и іеняется в традиционной медицине при различных заболеваниях ни, и входит в состав многих лекарственных прописей, но ее яакологическая активность мало изучена.

На основании проведенного химического исследования нами аботана технология получения суммы биологически активных їств из травы горечавки бородатой в виде сухого экстракта. Получение сухого экстракта сводилось к 3-х кратной дробной грации 80% —м этанолом воздушно —сухого сырья (надземная ь). Полученные настойки объединяли и сгущали на вакуумном ірителе. К упаренной вытяжке добавляли (соотношение 1:1) чую дистиллированную воду, отстаивали в течение 4-х часов и ляли фильтрацией выпавший осадок. Очищенную водно — ітовую вытяжку выпаривали на вакуумном испарителе до сухого гка, который измельчали и просеивали через сито №6. Сухой ракт стандартизовали и фасовали в соответствующую- тару. Полученный нами экстракт горечавки бородатой был использован получения таблеток Генцихол методом прямого прессования. В стве вспомогательных веществ использовали крахмал, стеарат ция и тальк в необходимых количествах.

Фармакологическое исследование таблеток Генцихола проведено в гитуте Улан-Удэ, под руководством профессора С.М.Николаева, гические испытания успешно прошли в Экпериментальном Центре гкционных болезней при Министерстве Здоровья Монголии. Как показали фармакологические и клинические испытания, іарат Генцихол обладает выраженным желчегонным, тозащитным, противовоспалительным и мембраностабили — тощим действием.

На предложенные таблетки Генцихол разработана и утверждена >ходимая нормативно —техническая документация. Технология пцена Патентом Монголии и препарат разрешен к применению сазом Министра здоровья Монголии в 1994 г.

4. Галехол-таблетки из густого экстракта ломатогониума колесовидного.

Густой экстракт ломатогониума колесовидного содержит сумму іогически активных веществ (3 ксантона: 1 — моногидрокси — 3,7,8 — летоксиксантон; 1 — моногидрокси — 3,5,6 — триметоксиксантон;

Т.п. 1.2.Измельчаяне

Т.п.2. Перколяция

Т.п.З. Отстаивание и

Т.п.4.2. Промывание горячей * дистиллированной водой

T.R.6. Стандартизация

Рис. 11. Технологическая схема получения густого экстракта ломатогониума колесовидного.

дигидрокси —3,5—диметоксиксантон; 3 флавоноида: 6 —С —JJ —
люкопиранозил — 5,7,3',4' — тетрагидроксифлавон; 8 —С — р* —
'люкопиранозил — 5,7,3',4' — тетрагидроксифлавон; 7 — О —

і — глкжопиранозил—5,3',4' — тригидроксифлавон; 1 иридоид — тиамарин).

!\ля получения сухого экстракта из травы ломатогониума совидного измельченное до размера 1 — 8 мм. воздушно — сухое ительное сырье перколировали 70 спиртом (соотношение 1:10). ученное извлечение отстаивали при 8С в течение суток и .тровали через марлю для отделения от балластных веществ, затем іривали на вакуумном испарителе и к остатку добавляли горячую иллированную воду. Полученный осадок отделяли фильтрованием з марлю, очищенное водное извлечение выпаривали на вакуумном рителе до 1/3 от взятого растительного сырья. 3 полученном густом экстракте определяли влажность и сумму аоноидов и ксантонов. После стандартизации экстракт >асовывали в соответствующую тару.

Технологический процесс получения густого экстракта ітогониума колесовидного представлен на рис. 11. Густой экстракт был использован для получения таблеток Галехол, істав которых в качестве вспомогательных веществ включены: :оза, крахмал, стеарат кальция и тальк. Таблетки получали методом юго прессования. Технология таблеток Галехол защищена Патентом голии.

5. Таблетки Силодин.

Эсновываясь на результатах химико —фармакологических едований горечавки острой, ломатогониума колесовидного, данных ,,иционной медицины и некоторых исследователей нами іаботаньї состав и технология комбинированного препарата, іанного Силодин, обладающего желчегонным действием и шающим функцию печени.

В состав таблеток Силодин кроме густого экстракта ломатогониума совидного и сухого экстракта горечавки острой входят суммы [фенольных соединений, выделенные из семян силибума марианума калоидов из хиазоспермума прямого.

Состав таблеток Силодин.
Сухой экстракт горечавки острой 0.125 г.

Густой экстракт ломатогониума колесовидного 0.125 г.
Препарат силибума марианума 0.015 г.

Сумма алкалоидов из хиазоспермума прямого 0.020 г.
Крахмал 0.023 г.

Магния стеарат 0.003 г.

Гальк 0.009 г.

Препараты и экстракты.

Крахмал и другие вспомогательные вещества.

[Т.п.1,1. Измельчение ІТ.п.1.2. Просеивание |Т.п.1.3. Взвешивание

Г.п.1. Подготовка ингредиентов

Т.п.2.1. Подготовка 4-х лопастного сместителя

Г.п.2. Смешивание в сместнтеле

Т.п.2.2. Смешивание

Т.п.3.1. Приготовление
магния стерата

Т.п.3.2. Приготовление талька

Г.п.З. Опудривание

Т.п.4.1. Настройка таблеточной машины

Т.п.4.2. Прессование

Г.п.4. Таблетнрование

Т.п.4.3. Контроль

_-Е

JT.n.S.l. Бракераж таблеток |-ІТ.П.5.2. Подгоовка стеклотары f~

Т.п.5.3. Фасовка

п.5. Фасовка, упаковка и маркировка

Т.п.5.4. Маркировка

Рис. 12. Технологическая схема производства таблеток Силодин

Технология получения сухого экстракта травы горечавки острой логична экстракту горечавки бородатой. Получение густого ракта ломатогониума колесовидного описана ранее. Препарат силибума марианума, содержащий сумму полифенольных инений, получешгую из семян этого растения, и сумму алкалоидов їоспермума прямого, которые производятся в Монголии, зльзовали в качестве действующих веществ дяя получения минированного действия предлагаемого препарата. Технологическая схема производства таблеток Силодин ^ставлена на рис. 12.

В процессе производства все действующие вещества и крахмал ;льчали, просеивали и смешивали, затем опудривали необходимым [чеством магния стеарата и талька. Таблетировали методом прямого ховання.

Таблетки Силодин стандартизовали по содержанию у—пиронов лрометрическим методом после их выделения и очистки методом »ночной хроматграфии.

Содержание у—пиронов в одной таблетке должно быть в пределах 3-0.048 г.

Фармакологическими и клиническими исследованиями установлено, таблетки Силодин обладают антиоксидантным, браноукрепляющим, ярко выраженным желчегонным и тозащитным действием.

Технология защищена Патентом Монголии N4203, 1994 г. На вышеперечисленные препараты разработана и утверждена вся Зходиая нормативно — техническая документация (Стандарт на готовление надземной части горечавки острой—УСТ 4157 — 93, ды Силибума марианума —УСТ 4160 — 93, препарат горечавки эдатой — ТНЭМЯ 50 — 94, Технологический регламент получения іарата из некоторых видов горечавки (ЭМЯ — ны сайдын тушаал, [ оны А/11 тоотын 3 —р заалт), метод получения суммы флавоноидов 1-х видов горечавки (ЭМЯ —ны сайдын тушаал, 1994 оны А/11 \ын 2 — р заалт).

6. Гранулы Гепахол.

На основе проведенных химических, технологических и макологических исследований нами разработан препарат "Гепахол", їржащий сумму полифенольных соединений и эфирные масла эчавки острой, ломатогониума колесовидного и володушки і.ецелистной. Гепахол представляет собой гранулы буро—желтого

Сухой экстракт горечавки острой

устой экстракт ломатогониума колесовидного

устой экстракт володушки козлсиелистной

fr.n. 1.1-3. Взвешкваиие

Z3—

ft.n. 1.4. Подготовка сместитсля \-

Т.п. 1. Подготовка экстрактов и смешивание

Г.п. 1.5. Смешивание

Г.п.2.1. Подготовка молочного сахара

'.п.2. Смешивание

Т.п.2.2. Смешивание

Т.п.З. Грануляция

Т.п.4. Сушка

_r 1

ІТ.П.8. Сушка

Т.п. 11. Фасовка н маркировка

Рис. 13. Технологический процесс получения гранул Гепахол.

а, горьковатого вкуса со своеобразным запахом, размер гранул 2.5мм., хорошо растворим в воде.

Состав гранул Гепахол (на 100 г.)

Сухой экстракт горечавки острой 17.6

Густой экстракт ломатогониума колесовидного 4.80
Густой экстракт володушки 11.4

Молочный сахар 66.2

Технология получения сухого экстракта горечавки острой и густого ракта ломатогониума колесовидного описана выше. Густой экстракт равы володушки козлецелистной получали по следующей методке: твующие вещества из растительного сырья экстрагировали 70 олом методом перколяции. Полученные настойки выпаривали на гумном испарителе и к остатку добавляли горячую иллированную воду. Осадок отделяли фильтрованием через марлю, [ценное водное извлечение выпаривали на вакуумном испарителе /3 от взятого растительного сырья.

Полученный густой экстракт стандартизовали и фасовали в ветствующую тару.

Технологический процесс получения гранул Гепахол представлен ис. 13.

3 четырехлопастном смесителе тщательно смешивали до получения )родной массы рассчитанные количества сухого экстракта чавки острой и густых экстрактов ломатогониума колесовидного и душки козлецелистной. К этой смеси частями добавляли молочный р и перемешивали до получения влажной пластической массы, не .ипающей к пальцам, которую затем пропускали через гранулятор аметром отверстий 2 мм. Гранулы сушили на листе пергаментной іги в сушильном шкафу при температуре не выше 33С до точной влажности 5%. Высушенные гранулы дополнительно >льчали и увлажняли 95% спиртом, тщательно перемешивали, .авливали через металлическое сито диаметром отверстий 2 мм., м сушили при комнатной температуре. Высушенные гранулы еивали и проводили количественное определение на содержание шого масла и полифенольных соединений. Сумму полифенольных ^инений определяли методом фотоэлектроколометрии с льзованием калибровочного графика рутина. Содержание суммы фенольных соединений в гранулах "Гепахол" должно быть 8.2±2%.

Эфирные масла в препарате определяли газожидкостной [атографией, их содержание должно быть 1.85±0.23%.

Гранулы фасовали по 50 г. в стеклянные флаконы или в мешочки

из пергаментной бумаги по 1 г. Для производства предложенных граи разработана и утверждена нормативно — техническая документаці Технология защищена Патентом Монголии.

Результаты клинических и фармакологических исследован гранул "Гепахол" показали, что они по сравнению с таблетка "Генцихол" обладают более выраженным желчегонным гепатозащитным, антиоксидантным и капилляроукрепляющ действием. Приказом Министра здоровья Монголии №65 от 16 ию 1994 года гранулы "Гепахол" разрешены к медицинскому применен] и промышленному выпуску.

ВЫВОДЫ

1. Впервые в Монголии организованы фитохимико — фа{
макологические исследования 12 видов наиболее распространненн
растений /3 вида Oxytropis и Gentiana, 4 вида Astragalus, 2 вида Вх
pleurum/, широко применяемых в народной медицине при лечен
различных заболеваний печени.

В результате химических и физико-химических исследован изучаемых растений выделено и идентифицировано 71 природа соединение, 6 из которых оказались новыми.

На оснований спектральных данных /УФ — , ИК—, масс — , 'Н ¹³С —ЯМР — спектров/ и химических превращений установле строение всех выделенных веществ. При этом 4 из новых веще отнесены к алкалоидам, одно — к ксантонам и одно — к флавоноид

2. Разработана схема выделения алкалоидов и флавоноидов
надземных частей трех видов остролодочника. Впервые выявлено, '
растения рода Oxytropis содержат алкалоид, производи
фенилэтиламина, имеюший в своем составе пиридиновый остаток.

Из трех видов остролодочника выделено 12 индивидуальн соединений, в том числе 4 алкалоида и 8 флавоноидов.

Из надземной части остролодочника пушисто — пузырчат< выделен природный новый ациклический алкалоид, относящийся фенилэтиламинам. Установлено его строение как N — бензоил—'. фенилэтиламин. Также выделены и идентифицированы извести алкалоид мурикатинин и флавоноидные соединения—ликвиритиген 7,4' —дигидроксифлавон и пратол. Причем, все три флавоно) выделены из представителей растения рода остролодочник впервы

На основании химических превращений и изучения спектраль* данных доказано строение двух алкалоидов, производи фенилэтиламина — (+) — N — бензоил — 2 — фенил — оксиэтилами

ленных из надземной части остролодочника мягкоигольчатого. лоид ( —)—N —никотиноил—2 —фенил—2—оксиэтиламин является ым представителем производных фенилэтиламина, содержащим в составе пиридиновый остаток. Другой алкалоид оказался новым гческим антиподом — ( + ) — N — бензоил —2 —фенил —2 — ізтиламином. Также из данного растения выделены и тифицированы кемпферол и его дигликозид робинии, выделены, идентифицированы также рутин и кверцетин из емной части остролодочника шишковидного, являющегося одним сточников получения ценного препарата — рутина. $. Экспериментально установлены товароведческие показатели ства травы остролодочника шишковидного, на основания которых аботан и утвержден государственный стандарт на новый вид .я —«Трава остролодочника шишковидного» (УСТ — 3304 — 91), также аботан регламент технологического процесса получения сухого ракта из него.

I. Из надземной части горечавки бородатой выделены и тифицированы 7 ксантонов, 2 флавоноида и 2 иридоида. Из них юногидрокси- 3,8 — диметокси — 7 — 0 — |i— D — глюко — нозилксантон является новым ксантоном. Флавоноид: диосметин и ^оиды: гентопикрозид и свертиамарин выделены из горечавки датой впервые.

і. На основании химико — фармакологических и технологических іедований разработана технология по созданию нового [цинского препарата таблетки «Генцихол», который обладает ярко іженньїм желчегонным, гепатозащитным, противовоспалительным твием. Он превосходит по желчегонной активности в 3 раза хол и в 1—3 раза LIV—52, силибинин, силибор, холензим, холосос рые используются в медицинской практике.

}. Из надземной части горечавки острой впервые выделены [тоны: беллидифолин, десметилбеллидифолин, коримбиозин, 'иферин; флавоноиды: лютеолин, цинарозид, гомоориентин; ^оид: гентопикрозид.

F. Из надземной части Ломатогониума колесовидного впервые лены и идентифицированы ксантоны: 1 — моногидрокси — 3,7,8 — «етоксиксантон, 1,8 — дигидрокси — 3,5 — диметоксиксантон; юноиды: лютеолин, цинарозид, ориентин, изоориентин и иридоид: тиамарин.

3. В результате химико — фармакологического исследования 2-х в горечавковых получен новый медицинский препарат таблетки л.один», который обладает желчегонным и гепатозащитным

действием.

9. При помощи адсорбционной хроматографии на полиамидн
сорбенте из изученных 4-х видов астрагалов выделено
флавоноидных соединения, которые в результате физико — химическ
исследований идентифицированы с кверцетином /выделленные
астрагалов сходного, монгольского, даурского, перепончатог
изорамнетином; рамноцитрином; апигенином; кемпфероле
куматакенином; 3 — О — Р — D — глюкопиранозидом изорамнетина; 3 —(
Р~ D — глюкопиранозил— (6 — 1) — 0~р — L — рамнопиранозид
изорамнетина; 3 — 0 — р —D — глюкопиранозил— (6 — 1) — р — I
рамнопиранозидом кверцетина; 3 — 0 — р — L— арабопиранозид
рамноцитрине, глюкозид выделен нами впервые и назв
пропингозидом, 3 —0~Р~D —глактопиранозидом изорамнетина; 3 —(
p — D —галактопиранозил — (6—1) — 0 — р —L —рамнопиранозид
кверцетина, 3 — 0 — р — D — галактопиранозил — (2 — 1)—0 — р — I
арабопиранозидом кемпферола. Полученные соединения
монгольских видов астрагала выделены впервые.

10. Разработана методика выделения очищенной сумі
флавоноидов, содержащихся в надземной части астрагалов сходной:
монгольского.

Препарат, в состав которого входит сумма флавоноидов астрап сходного, названный нами «Биофлавон пропингозид» успешно проп клинические испытания и разрешен Министерством здравоохранен МНР к выпуску в качестве гипотензивного и успокаивающего среде Препарат из астрагала монгольского, по предварительным данні вызывает значительное снижения артериального давления продолжительностью более 60 минут.

11. В результате изучения 2 видов Володушки получено и иде* тифицировано 2 флавоноида, 3 кумарина и 90 терпеноидов.

12. На основе всесторонних исследований разработана и внедре в медицинскую практику технология получения нового препар; гранулы «Гепахол», полученный из двух видов горечавки и володуш козлецелистной.

Гепахол является эффективным желчегонным, гепатозащитнь антиоксидантним и капилляроукрепляющим средствами.

" 13. На предложенные препараты — настойка "Биофлав пропингозид", таблетки "Силодин", "Генцихол", "Галехол", грану "Гепахол" и сухой экстракт из травы остролодочника шишковидне разработана и утверждена нормативно — техническая документац: Препараты разрешены к медицинскому применению и промышленно выпуску. Технология получения их защищена Патентами Монголи]