Введение к работе
АКТУАЛЬНОСТЬ ПРОБЛЕМ. В настоящее время одним из перспективных научных направлений являются исследования в области иммунологии. Большой интерес представляет поиск новых эффективных иммуномодулирующих средств - крайне необходимых медицинской практике для лечения инфекционных, аллергических, аутоиммунных и онкологических заболеваний, а также для трансплантации органов и тканей. Указанные патологии, широко распространенные как в нашей стране, так и за рубежом, в последние годы значительно осложняются наслоением вторичных иммунодефицитов, вызываемых самыми различными воздействиями - химическими, медикаментозными, последствиями Чернобыльской катастрофы и другими экологически неблагоприятными факторами. В этих условиях, существенно ослабляющих иммунную систему, а также в связи с надвигающейся угрозой эпидемии СІВДа проблема разработки новых иммуномодуляторов и валеологических (оздоровительных) средств приобретает особую актуальность.
В последнее время во всем мире значительно повысился интерес к лекарственным растениям. Наряду с синтетическими препаратами не менее важным источником безвредных субстанций, способных определенным образом оказывать влияние на систему иммунитета, являются некоторые растения.
В настоящее время крайне необходимы общедоступные средства, обладающие радиопротекторной активностью, не оказывающие токсического действия при длительном применении. Актуальность созда-шя валеологических средств, способных повысить устойчивость эрганизма к действию радиации, предотвратить развитие лучевой їолезни, предупредить возможные осложнения и т.д., в связи с экологической напряженностью в некоторых регионах СНГ, еще
4 более возрастает и является практически социальным заказом здравоохранения.
ШЬ И ЗАДАЧИ ИСаіЕДОВАНИЯ. Целью работы явилась разработка научно-методических основ создания и стандартизации фитоэкст ракционных препаратов иммуномодулирующего действия, на базе индивидуальной и многокомпонентной растительной композиции, а также фитовалеологических средств, обладодих радиопротекторной активностьс.
Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:
разработать научно-методические основы создания и стандартизации фитоэкстракционных препаратов иммуномодулирующего действия, на базе индивидуальной и многокомпонентной растительной композиции;
разработать теоретически и экспериментально обоснованные составы многокомпонентных растительных композиций для получения фитоэкстракционных препаратов иммуномодулирующего действия;
провести исследования по разработке состава и технологии таблеток с сухим экстрактом горечавки жёлтой - "Гентина" с желу' дочнорастворимым пленочным покрытием;
выявить закономерность экстрагирования действующих веществ из многокомпонентной растительной композиции; определить корреляцию размеров частиц составных компонентов сырья в многокомпонентной растительной композиции с использованием математических методов расчета;
разработать технологию получения препаратов иммуномодулирующего действия - гранул "Иммунофита" и "Тетраиммунофита";
разработать фитовалеологические средства, обладающие радиопротекторной активностью - "Ачара", "Кутаиси" и "Протектор";
- провести химическое исследование сырья и препаратов им-муномодулирующего действия, а также разработать нормативную документации на предлагаемые субстанции, лекарственные формы и некоторое растительное сырье.
Разработаны научно-методические основа создания и стандартизации иммуномодулирующих препаратов на базе индивидуальной и многокомпонентной растительной композиции, включающие скрининг на биологическую активность, изучение влияния технологических факторов, выделение и определение роли комплексов биологически активных веществ и индивидуальных соединений в иммуномодулиру-ющей активности, подбор составных компонентов многокомпонентной растительной композиции и определение их количественного соотношения. Исследован id вид растений, относящихся к 12 семействам, в том числе филогенетически родственные виды на примере растений рода горечавка. Іінявлено 6 видов растений, обладающих выраженным иммуномодулирующим действием. Наиболее перспективной оказалась горечавка желтая (корни и надземная часть).
В процессе создания препаратов широкого спектра специфического и неспецифического действия разработан научно-методический подход конструирования фитокомпозиции, заключающийся во включении в состав не более 3-6 видов растительного сырья. При этом выявлен синергизм биологической активности составляющих компонентов. При включении в препаріт 7 и более источников сырья наблюдается подавление биологической активности, сіто связано с трудностью подбора оптимальной дозы, способной индуцировать специфическую иммунсмодулирующую активность у каждого компонента ї'репартга. На основании разработанного подхода созданы 4-х и t'-ги компонентные растительные композиции (КРК), биологическая
активность которых в 2 - 1,5 раза (соответственно) превосходит суммарную активность составных компонентов 4-х и 6-ти КРК.
В процессе экстрагирования биологически активных веществ из многокомпонентной растительной композиции выявлены основные закономерности совместного экстрагирования сырья различного ана мо морфологического строения. Они заключаются в определении природы экстрагента - на основании химических и фармакологических исследований получаемых извлечений, а также методом ыатемг тических расчетов в установлении соотношения между размерами частиц сырья в 4-х и б-ти КРК, что обеспечивает одновременності извлечения составных компонентов при их экстрагировании.
Методами хромагоспекгрофотометрии, ВЬЖХ, атомно-абсорбцж» ной спектроскопии, а также с использованием аминокислотного аш лизагора определено содержание основных р-пиРоновых соединена микроэлементный и аминокислотный состав в исходном сырье, в су( станциях и готовых лекарственных формах. При этом установлено, что исследуемые объекты содержат v-пироновые соединения (рутиі мангиферин), микроэлементы (Ьп, Fe , Дп , Си ) и аминокислот! (фенилаланин, валин, лейцин и др.), положительно влияющие на иимуную систему организма.
На основании данных фотохимических, технологических и меді ко-биологических исследований подобраны составные компоненты и определено их количественное соотношение в многокомпонентных растительных композициях ("Ачара", "Протектор" и "Кутаиси"),' обеспечивающее их высокую радиопротекторную активность.
С учетом физико-химических свойств свежего растительного сырья разработаны технологические приемы переработки листьев алоэ древовидного, заключающиеся в ступенчатом воздействии экстрагента с различной полярностью, что обеспечивает наиболее
7 полное извлечение биологически активных веществ, обладающих защитным действием при лучевом поражении.
Приоритет исследований подтвержден 7 авторскими свидетельствами на изобретения.
ФАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ РАБОТЫ. На основании проведенных исследований х разработаны и внедрены:
параметры стандартизации лекарственного растительного сырья: травы горечавки желтой, травы клевера лугового и корнеплодов красной свеклы (ВФС № 30/94, 23/94, «19/94, утверждены МЗ республики Грузия. Справка№2ЮЗ/263 от 20.03.94 г.);
состав и технология таблеток "Гентина" с желудочнораство-римым пленочным покрытием и параметры контроля его качества (йС № 32/94 и опытно-промышленный регламент (ОЛР), утверждены МЗ республики Грузия. Справка * 20-03/260 от 16.03.94 г.);
состав и технология таблеток "Гентина" с желудочнорастворимым пленочным покрытием (Авторское свидетельство I367I96, разрешены к медицинскому применению решением Фармакологического комитета іЛЗ республики Грузия. Справка № 20-03/261 от .);
технологические параметры производства таблеток "Гентина" с желудочнорастворимым пленочным покрытием (OOP на производство таблеток "Гентина" апробирована на ПО Трузбиофармпрепараты" и принята для промышленного осзоения, акт апробации от 17.03.94г.);
технология сухих экстрактов (субстанций) из 6-ти и 4-х компонентных растительных композиций, а также параметры контроля
*' Іедико-биодогические исследования проведены на базе медико-генетического научного центра А.>1Н Рй, института иммунологии Министерство здравоохранения и медицинской промышленности Рр и института биологии Бурятского филиала Сибирского отделения АН Pi.
8 их качества (Авторское свидетельство I57I825, I59I224, 1474929. ВФС * 19/94, 22/94 и ОПР утверздены МЗ республики Грузия. Справка № 20-03/263 от 20.03.94 г.);
технологические параметры производства субстанций из 6-ти и 4-х компонентных растительных композиций, а такие параметры контроля их качества (ВФС Р 19/94, 22/94 и ОПР на субстанции апробированы на ПО "Грузбнофарыпрепараты" и принята для промышленного освоения, акт апробации от 01.03.94 г.);
состав и технология гранул "Имцунофйта" и "Тетраиммуно-фита", а также парамэгры контроля их качества (В&С ІЇ 27/94, 28/94 и QflP утверздены МЗ республики Грузия* Справка & 20-03/260 от 18.03.94 г.);
состав и технология гранул "Имцунофйта" и "Тетраиммуно-фита" (Авторское свидетельство 1797694, разрешены к клиническому изучения регенкек Фармакологического комитета МЗ республики Грузия. Справка » 20-03/262 от 20.03.94 г.);
технологические параметры производства гранул "Йммуно-фига" и "Тетраиммунофига" (0ІІР на производство гранул "Иммуно-фита" и "Тетраиммунофита" апробированы на ПО Трузбиофармпрепа-раты" и принята для промышленного освоения, акт апробации от 17.03.94 г.);
состав и технология валеологических средств- "Ачара", "Іфтаиси" и "Протектор", а также параметры их контроля (ТУ 03-010-92, 03-008-92, 03-009-92 и ГИ на "Ачара", "фтаиси" и "Протектор" утверждены МЗ республики Грузия. Справка № 20-03/260 от 18.03.94 г.);
состав и технология валеологических средств - "Ачара", "Кутаиси'" и "Протектор" (разрешены к медицинскому применению решением Фармакологического комитета МЗ республики Грузия.
Справка I? научно-методические основы создания и стандартизации фиго-экстракционных препаратов имцуномодулирующего действия на базе индивидуальной и многокомпонентной растительной композиции; результаты химического исследования исходного сырья, субстанции и готовых лекарственных форм; состав и технология получения таблеток Тентина" с сухим экстрактом горечавки пелтой с келудочнорастворишм пленочным покрытием; результаты теоретических и экспериментальных исследований по обоснования составов шогокошонентных композиций и способов получения субстанции и готовых лекарственных форм, обладающих иммуномодулирующей активностью; результаты исследований по разработке технологии получения фиговалеологических средств, обладающих радиопротекторной активностью. АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ. Основные положения диссертационной работы доложены и обсуядены на республиканских научных конференциях (Каунас,- 1965; Улан-Уде, 1987; Бакуриани, 1988; Киев, 1988; Ба-куриаки, 1990; Улан-Уде, 1991; Харьков, 1991; Киев, 1992)< на У съезде фармацевтов России (Ярославль, 1987), на її съезде фармацевтов СССР (Казань, 1986). ПУБЛИКАЦИИ. Основное содержание работы отражено в 7 авторских свидетельствах, I брошюре, 31 статьях и тезисах докладов. СВЯЗЬ ЗАДАЧ ИСОВДОВАНИЯ С ПРСБИЕШОД ШАНОМ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИХ НАУК. Тема исследований связана с планом комплексной программы ликвидации последствий аварии на Чернобыльской АХ. Диссертационная работа выполнена в соответствии с основным 10 направлением межведомственного ручного Совета по фармации № 47 АМН.РЬ и планом научно-исследовательской работы Тбилисского государственного медицинского университета (№ государственной регистрации 01890055832). ОБЪЕМ И СТРУКТУРА ДИССЕРТАЦИОННОЙ РАБОТЫ. Диссертация изложена на 302 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, 5 глав экспериментальной части, общих выводов, библиографии и приложения. Работа иллюстрирована 71 таблицами и 23 -рисунками. Библиографический указатель включает 371 источников литературы,' из них 290 на русском и 81 на других иностранных языках.