Содержание к диссертации
Введение
1. Обзор литературы .13
1.1. Современные представления об эволюционно сформировавшихся паразитарных системах в био- и агроценозе .13
1.2. Ветеринарная составляющая национальных программ выращивания здорового птицепоголовья 15
1.3. Микрофлора кишечника цыплят и ее функции 19
1.3.1. Нормофлора цыплят и ее роль в обеспечении колонизационной резистентности организма .19
1.3.2. Аппликационные особенности микроорганизмов кишечника в субпопуляциях птиц 1.4. Многофакторное формирование дисбиотического состояния кишечника у молодых кур .27
1.5. Факторные бактериальные болезни кур в современном птицеводстве .29
1.6. Пробиотическая и пребиотическая профилактика и лечение птиц 34
1.7. Антибиотики фторхинолонового ряда, применяемые в птицеводстве 40
2. Собственные исследования .41
2.1. Методическое обоснование, планирование и организация эпизоотоло-гических экспериментов 41
2.2. Результаты исследований 49
2.2.1. Эпизоотологический мониторинг в условиях современного птицевод ства в конкретном субъекте Федерации 49
2.2.1.1. Наиболее значимые нозоформы инфекционной и инвазионной патологии птиц в условиях территориальной аппликации промышленного птицеводства .49
2.2.2. Региональные особенности формирования нозологического профиля заразной патологии птиц в условиях Нижегородской области .61
2.2.3. Испытание эффективности пробиотической композиции «Пробио С» для профилактики бактериальных болезней кур .72
2.2.4. Экспертная оценка эффективности применения композиции «Пробио-С» и препарата «Лактобифадол» в птицеводстве 80
2.2.5. Экспертная оценка фармакологических параметров, токсикологических, кумулятивных и эмбриотоксических свойств пребиотического препарата «Ветелакт» .90
2.2.6. Экспертная оценка эффективности пребиотической кормовой добавки «Ветелакт» на птицепоголовье по фону применения антибиотикотерапии .102
2.2.7. Экспертная оценка антбактериальной активности препарата «Ципро-вет 10%» 106
2.2.8. Экспрессивность влияния препаратов: 10% раствора ципрофлоксаци-на, пребиотической добавки «Ветелакт» и лекарственного средства «Ципровет 10%» на микрофлору кишечника цыплят (эксперимент in vitro, р0,01) 109
2.2.9. Экспертная оценка антибактериальной эффективности препарата «Ци-провет 10%» и 10% раствора ципрофлоксацина при экспериментальном сальмо-неллезе птиц (цыплят-бройлеров) 124
2.2.10. Экспертная оценка эффективности применения препаратов «Ципро вет 10%», «Энрофлон 10%» и «Энроксил» в промышленном птицеводстве...137
2.3. Определение экономической эффективности ветеринарных мероприятий 140
2.3.1. Определение экономической эффективности применения пробиотиче-ских препаратов «Пробио-С» и «Лактобифадол» на базе ОАО «Братцевское» Московской области 140
2.3.2 Определение экономической эффективности применения пребиотиче ской кормовой добавки «Ветелакт» после антибиотикотерапии 144
2.3.3. Определение экономической эффективности применения препарата «Ципровет 10%» (оральный раствор на базе ОАО «Птицефабрика Перм-ская» .146
2.3.4. Определение экономической эффективности орального применения препарата «Ципровет 10%» в условиях ОАО «Птицефабрика Михайлов-ская» 150
3. Обсуждение результатов исследований 156
Выводы 166
Практические предложения .168
Список сокращений 169
Список использованной литературы
- Ветеринарная составляющая национальных программ выращивания здорового птицепоголовья
- Эпизоотологический мониторинг в условиях современного птицевод ства в конкретном субъекте Федерации
- Региональные особенности формирования нозологического профиля заразной патологии птиц в условиях Нижегородской области
- Экспертная оценка антибактериальной эффективности препарата «Ци-провет 10%» и 10% раствора ципрофлоксацина при экспериментальном сальмо-неллезе птиц (цыплят-бройлеров)
Введение к работе
Актуальность темы. В настоящее время в России птицеводство интенсивно развивается. Формируются более совершенные технологии, внедряются признанные в мире кроссы птиц мясного и яичного направления. Все больше внедряются в технологии с напольным содержанием птицы. Все это обязывает уделять особое внимание поддержанию эпизоотического благополучия, совершенствованию ветеринарного обслуживания птицехозяйств с различными технологиями.
Российские исследователи (Б.Ф. Бессарабов, 1993; И.А. Бакулов, 1995; В.П. Урбан, 1995; Э.Х. Даугалиева, 1996; Р.Н. Коровин, 1989; А.В. Аринкин, В.В. Сочнев, 1996, 1998) указывают, что противоэпизоотическое обеспечение современного птицеводства способствует его рентабельному ведению, а специальные ветеринарные мероприятия следует расценивать как технологические приемы современного птицеводства, как составляющую компоненту его промышленных технологий. Имеется ряд сообщений и официальных документов, подтверждающих, что особую опасность современному птицеводству продолжают создавать ньюкаслская болезнь, болезнь Марека, ИББ, ССЯ, ИЛТ, а за последнее время и высокопатогенный грипп птиц. И это несмотря на то, что указанные инфекции в своем большинстве считаются управляемыми, а для их профилактики разработаны и широко используются специфические средства борьбы. Существует мнение о том, что эффективность применения этих средств в ряде птицехозяйств с энзоотическим проявлением моно- и микстнематодозов значительно снижается. Ряд исследователей (Э.Х. Даугалиева, А.В. Аринкин, 1998) приводят данные о снижении иммунологической реактивности у птиц при спонтанном аскаридиозе и гетеракидозе. На фоне их проявления у птиц развиваются факторные болезни, когда условно патогенная микрофлора становится главным этиологическим фактором болезненного состояния сочленов популяции птиц.
Отдавая должное исследователям, изучающим заразную патологию птиц, следует отметить, что за последние годы накопились факты неадекватного формирования специфического иммунитета при вакцинации птиц против ньюкаслской болезни в хозяйствах, неблагополучных по нематодозам птиц. Нерешенными являются многие аспекты управления эпизоотическим процессом инфекционных и инвазионных паразитарных систем в условиях промышленного животноводства.
Все это подтверждает актуальность проблемы изучения эпизоотической составляющей биологической опасности, формирующейся в сырьевой зоне региональных продовольственных рынков Российской Федерации, побуждает современную ветеринарную науку осуществлять эпизоотологический и иммунологический мониторинг не только особо опасных, но и наиболее распространенных и экономически значимых болезней птиц, развиваю-
4 щихся на фоне дисбиозов их организма, разрабатывать методы прогнозирования эпизоотической ситуации, диагностические средства и терапевтические препараты нового поколения при инфекционных, инвазионных и незаразных болезнях сельскохозяйственных животных.
Цели и задачи исследований. В динамике и сравнительном аспекте изучить нозологический профиль заразной патологии птиц, роль и место конкретных инфекционных и инвазионных болезней в его формировании, территориальные, временные и популяционные границы эпизоотического проявления наиболее значимых инфекций и инвазий. Разработать и предложить принципиально новые комплексные подходы, средства и способы борьбы с бактериальными инфекциями птиц, минимизирующими отрицательное воздействие на нормоф-лору их организма.
Задачи исследований:
-
Провести эпизоотологический мониторинг современного промышленного птицеводства в условиях Нижегородской области.
-
Определить характер эпизоотического проявления доминантных нозоформ в популяциях птиц в регионе.
-
Изучить в сравнительном аспекте и динамике энтероценоз цыплят в условиях промышленного птицеводства, в сравнительном аспекте определить эффективность новых про-биотических и пребиотических средств в комплексе с антибактериальными препаратами.
Научная новизна. Получены новые научные данные о динамике формирования нозологического профиля инфекционной и инвазионной патологии птиц в условиях промышленного птицеводства в изучаемом регионе, о территориальной, временной и популяционной аппликации доминантных паразитарных систем, о факторах, снижающих динамику формирования нормоэнтероценоза птиц. Оптимизирована система нормализации нормоэнтероце-ноза цыплят с использованием антибактериального препарата «Ципровет 10%», пробиотиков «Пробио-С», «Лактобифадол» и пребиотика «Ветелакт». Изучена противоэпизоотическая эффективность мероприятий при бактериальных болезнях птиц в различных регионах европейской части РФ.
Теоретическая и практическая значимость работы. Результаты проведенных исследований явились основой оптимизации и нормализации энтероценоза кишечника цыплят на фоне бактериальных инфекций и применения антибактериальных препаратов, внедрение которых в условиях промышленного птицеводства подтвердило их эффективность и востребованность. Разработанные новые лекарственные средства, содержащие пребиотические и антибактериальные средства, позволяют значительно снизить отрицательное воздействие антибактериальных средств на нормоэнтероценоз птиц, улучшить сохранность птицемолодняка и увеличить прирост их живой массы.
Методология и методы исследований. В работе использован комплексный эпизоото-логический подход по В.П. Урбану, все направления эпизоотологической диагностики (семиотика, диагностическая техника и эпизоотологическое мышление), современной прогностики (фактографию, экспертные оценки и верификация), бактериологические, паразитоло-гические, вирусологические, клинико-эпизоотологические исследования, а также методы статистического контроля качества по Хитоси-Кумэ (1990) и Н.А. Плохинскому (1970).
Ретроспективную диагностику состояния популяционного здоровья птиц провели в соответствии с методическими указаниями по клинической и лабораторной диагностике болезней и ГОСТами по их применению. Эпизоотологический анализ и оценку его результатов провели на экосистемном уровне путем оперативного и ретроспективного анализа, эпизоото-логического мониторинга и пунктирного скрининга птиц и среды их обитания. Выявление причинно-следственных механизмов эпизоотического проявления конкретных заболеваний птиц проводили путем многофакторного анализа в условиях изучаемых субъектов Федерации.
Основные положения, выносимые на защиту:
– в условиях Нижегородской области сформировались и функционируют инфекционные и инвазионные паразитарные системы, в 24,4% случаев в их функционирование вовлечены в качестве соактантов птицы;
– при бактериальных инфекциях птиц и на фоне применения им антибактериальных средств существенно изменяется нормоэнтероценоз как по набору, так и по количественному соотношению микроорганизмов, в их организме развивается дисбактериоз;
– применение пробиотических и пребиотических средств «Пробио-С», «Лактобифа-дола» и кормовой добавки «Ветелакт» способствует восстановлению нормоэнтероценоза в организме цыплят и снимает отрицательный эффект от применения антибактериальных (антибиотических) средств;
– применение лекарственного средства «Ципровет 10%» при экспериментальном сальмонеллезе цыплят обеспечивает противоэпизоотический эффект, а применение пробио-тической кормовой добавки «Ветелакт» в промышленном птицеводстве эффективно и востребовано.
Личный вклад соискателя. Автором лично определена степень изученности проблемы в отечественной и зарубежной специальной литературе, зареферирована 221 научная статья, из них 63 – иностранных авторов. Лично планировала, организовывала и проводила эпизо-отологические эксперименты в лабораторных и производственных условиях, обобщала и интерпретировала их результаты, лично участвовала в проведении экспертных оценок результатов скрининговых и мониторинговых исследований при изучении границ эпизоотического
6 проявления паразитарных систем в популяции птиц, характера эпизоотического процесса доминантных бактериальных инфекций среди молодняка птицы в условиях промышленного птицеводства.
Лично проводила комиссионные испытания, адаптацию и авторский надзор за внедрением в производство новых антибактериальных, пробиотических и пребиотических средств, готовила научные статьи и выступала с докладами на научных форумах.
Пути реализации. Результаты исследований автора могут быть использованы при совершенствовании научно обоснованной системы профилактики дисбактериозов птиц в других регионах РФ, в учебно-педагогическом процессе при подготовке специалистов ветеринарной и зооинженерной профессий.
Апробация результатов исследований. Тема, направления, методические подходы исследований и их результаты доложены, обсуждены и одобрены на заседаниях Ученых советов ветеринарных факультетов ФГБОУ ВО «Саратовский ГАУ, им. Вавилова», ФГБОУ ВО Нижегородская ГСХА (2015), на заседаниях издательских советов журналов «Ветеринария» (2011), «Птица и птицепродуктиы» (2015), на международных научно-практических форумах: «Профилактика, диагностика, лечение инфекционных болезней, общих для человека и животных» (Ульяновск, 2006), «Инновационный путь развития АПК – магистральное направление научных исследований для сельского хозяйства» (Персиановка, 2007), международных форумах по птицеводству (Сочи, 2010; Москва, 2010), III Международном конгрессе ветеринарных фармакологов и токсикологов (Санкт-Петербург, 2014), «Биотехнология: реальность и перспектива» (2014), на заседаниях профессорско-преподавательского состава кафедры «Микробиология, биотехнология и химия» ФГБОУ ВО «Саратовского ГАУ им. Н.И. Вавилова» (Саратов, 2004; 2014), кафедр «Эпизоотология, парзитология и ветеринарно-санитарная экспертиза», «Микробиология, вирусология, биотехнология» ФГБОУ ВО Нижегородская ГСХА (2015).
Достоверность результатов исследований. Результаты исследований получены на сертифицированном оборудовании, на большом экспериментальном и производственном материале, подвергнуты статистической обработке и верификации, приоритет результатов исследований защищен патентом РФ на изобретение, зарегистрированным в Госреестре РФ.
Внедрение результатов исследований. Результаты исследований под авторским надзором с положительным эффектом внедрены в ветучреждениях и птицеводческих хозяйствах Саратовской, Московской, Ростовской областей и Пермского края. Материалы исследований вошли в нормативно-техническую документацию на изготовление, контроль качества и применение нового комплексного антибактериального препарата «Ципровет 10%» и пребиоти-ческой кормовой добавки «Ветелакт», утвержденных к применению в РФ в установленном
7 порядке (регистрационные номера на «Ципровет 10%» № 77/32-22-4.0-4430, № ПВР-2-4,0/02561 от 08.07.2010; СТО на кормовую добавку «Ветелакт», НД: 76069684-0150-2013 от 07.11.2013 г., 77/32-2-27.13-5873 № ПВР-2-2.13/02959 от 07.11.2013 г.).
Результаты исследований представлены в заключительном отчете ФГБОУ ВО Нижегородская ГСХА о НИР, зарегистрированном в ЦИТИС РФ (№ 0220 1359169, 4130523152229), опубликованы в 16 научных статьях и методических рекомендациях, из них 4 – в изданиях, рекомендованных ВАК Минобрнауки РФ для публикации материалов докторских и кандидатских диссертаций, и одном патенте.
Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 198 стр. компьютерного текста, включает введение, обзор использованной литературы, собственные исследования и обсуждение их результатов, иллюстрирована 51 таблицами и 24 рисунками. Список использованной литературы включает 221 источник, из них 63 – иностранных авторов.
Ветеринарная составляющая национальных программ выращивания здорового птицепоголовья
Нозоформы инфекционной и инвазионной патологии людей и животных, и в частности птиц, при которых разработаны эффективные средства и способы борьбы (диагностика, уничтожение возбудителя в биотической и абиотической среде, применение средств специфической диагностики и профилактики), считаются управляемыми [47, 57, 65, 83, 101, 105, 106, 113].
В большинстве стран мира с развитым промышленным птицеводством разработаны, апробированы и реализуются национальные научно обоснованные системы выращивания здорового птицепоголовья с обязательным участием ветеринарной составляющей этой системы [113, 139, 140].
Многие исследователи, изучающие проблему здоровья сельскохозяйственных животных, считают, что основу профилактики потенциальных инфекционных и инвазионных болезней птиц должны составлять технологические приемы сохранения их здоровья, и в частности, путем четкого обеспечения эпизоотического благополучия территорий размещения птицеводческих хозяйств с интенсивным промышленным производством [16, 31, 44].
Во всех странах мира в той или иной мере действуют общие с национальным (региональным) оттенком системы охраны хозяйств от заноса возбудителей инфекций и инвазий путем внедрения жесткого ветеринарно-санитарного режима работы этих хозяйств, исключающих их комплектование случайным поголовьем или репродуктивным материалом.
Известно, что четко регламентируемый режим работы птицеводческих хозяйств на промышленной основе предусматривает строгую изоляцию их промышленной и хозяйственных зон, раздельное («бесконтактное») функционирование блоков, бригад, а также цехов различных технологических этапов. Системы охраны здоровья птиц предполагают мелкогрупповое (клеточное) содержание, соблюдение заданного режима воздухообмена в помещениях с обязательным воз-духозабором в санитарно-благополучной зоне, автоматизированное управление параметрами микроклимата, технологическими процессами раздачи кормов, во-допоения, сбора продукции и удаления навоза.
Существует единое мнение о том, что четко отработанные технологии разведения птиц становятся невыполнимыми без соблюдения общих ветеринарно-санитарных режимов и мер, высокой ветеринарно-санитарной дисциплины, определяющей технологические регламенты, без высокого уровня квалификации работающих и сознательного выполнения регламентов эксплуатации промышленного птицеводческого объекта и хозяйствующего подразделения. Решение этих задач позволяет создавать основу (фундамент) эпизоотического благополучия птицеводства и выращивания здоровых высокопродуктивных стад животных.
Отдавая должное технологическим и общим ветеринарным мерам и приемам сохранения здоровья птиц и обеспечению эпизоотического благополучия в промышленном птицеводстве, многие исследователи считают [124, 189], что без проведения специальных профилактических и противоэпизоотических мероприятий в современных условиях эффективное ведение птицеводства практически невозможно [136, 164, 205, 207, 215].
С этой целью во многих странах разработаны национальные программы по поддержанию иммунного статуса животных путем регламентированного, четко сбалансированного кормления; специфической профилактике массовых, контагиозных болезней. В России, как и в других странах, разработаны технологические карты специальных ветеринарных мероприятий с учетом степени риска отдельных регионально приуроченных инфекционных и инвазионных болезней птиц. Во многих странах разработаны специальные программы по профилактике эймериозов птиц. Имеется научная информация по разработке и внедрению специальных мероприятий для профилактики смешанных (ассоциативных) болезней птиц, поддерживания нормоэнтероценоза в их организме [185, 186, 187, 198, 205]. Особый интерес представляет система мер по предупреждению микстинвазий и микстинфекций, а также факторных болезней среди птиц во всех категорийях хозяйств независимо от форм собственности [8, 30, 49, 57, 62, 90, 158].
В РФ национальная программа по оздоровлению птицеводства от инфекционных и инвазионных болезней, и особенно от смешанных их форм, базируется на постоянном эпизоотологическом надзоре и контроле. С этой целью в стране наряду с отделами по болезням птиц при областных ветеринарных лабораториях организованы специализированные межобластные ветеринарные лаборатории по их болезням.
Определена четкая система эпизоотологического мониторинга и популяци-онного скрининга за эпизоотическим проявлением наиболее распространенных болезней птиц [87, 112, 115, 141, 144].
В системе производственной ветеринарной службы на крупных птицефабриках организованы технологические и ветеринарные лаборатории, функционирует служба иммунитета в птицеводстве [96, 151]. В стране создан и успешно функционирует Всероссийский Научно-исследовательский ветеринарный институт птицеводства.
Эпизоотологический контроль в птицеводстве базируется на четком информативном обеспечении состояния иммунного статуса у птицепоголовья как основного показателя гомеостаза, на изменениях эпизоотической ситуации в хозяйстве, районе, субъекте Федерации и в целом в России по болезням птиц [57, 168, 173, 198, 217]. В последние годы проводится периодическая корректировка про-тивоэпизоотической системы в птицеводстве адекватно изменению эпизоотической ситуации и проявлению системы риска как отдельных болезней, так и всей инфекционной и инвазионной патологии птиц [67, 92, 211].
Ряд исследователей считают, что, несмотря на созданную в РФ стройную систему (программу) профилактики инфекционных и инвазионных болезней птиц, многие вопросы этой системы до сих пор требуют совершенствования или периодического обновления. Вопросы премедикации, специфической профилактики смешанных болезней птиц, изучение характера проявления микстинвазий в промышленном птицеводстве требуют дополнительного изучения, необходим постоянный эпизоотологический мониторинг и надзор за состоянием птицепоголо-вья, состоянием их иммунного статуса и путей его коррекции [4, 5, 6, 8, 37, 88, 91].
На основании анализа литературных данных следует заключить, что за последние годы накоплен определенный ответ и изысканы новые пути иммунологической коррекции организма птиц при возникающих иммунодепрессиях на фоне гельминтозов и проводимых дегельминтизаций [116, 125].
Разработан ряд способов и методических подходов воздействия на отдельные компоненты иммунокомпетентной системы организма птиц [66].
Отдавая должное исследователям, внесшим достойный вклад в изучение инфектологии и иммунологии при инвазионных и инфекционных болезнях птиц, следует отметить, что многие вопросы этой проблемы до настоящего времени изучены недостаточно, а отдельные аспекты и выявленные феномены необъяснимы. В этом плане наша работа будет направлена на углубление этой области знаний, на экспериментальное подтверждение и объяснение закономерностей формирования иммунного статуса у птицепоголовья, на профилактику сохранения нормоэнтероценоза в их организме.
Эпизоотологический мониторинг в условиях современного птицевод ства в конкретном субъекте Федерации
Для идентификации основных видов бактерий кишечного содержимого применяли масс-спектральный анализ в режиме MALDIOF на масс-спектрометре Bruker с использованием автоматической программы Bruker Taxonomy.
Для изучения влияния на микробиоту кишечника препараты «Ципровет 10%» и ципрофлоксацин 10% применяли в дозе 0,5 мл на литр воды. Дача воды с препаратами осуществлялась круглосуточно, вволю, в течение 3 дней. Добавку «Ветелакт» выпаивали цыплятам в виде 1% водного раствора в течение 3 дней из расчета 0,1 мл добавки на 1 кг массы тела. Цыплята контрольной группы получали только воду. На четвертый день после начала эксперимента провели убой 50% цыплят в подопытных и контрольной группах, оставшихся цыплят подопытных и контрольной групп убили через 9 дней. Для микробиологического исследования брали 1 г кишечного содержимого цыплят. Во всех группах было исследовано дважды по 10 цыплят.
Результаты исследований подвергли вариационной статистике. Эпизоотологический эксперимент с целью определения антибактериальной эффективности лекарственного средства «Ципровет 10%» и 10% раствора ци-профлоксацина при экспериментальной сальмонеллезной инфекции провели на суточных цыплятах-бройлерах, поступивших из ООО «Птицефабрика НовоПетровская» Московской области, которых разделили на четыре группы по 10 цыплят – две контрольные и две подопытные и разместили в клетках с индивидуальными поилками и вытяжной системой вентиляции. Для кормления использовали комбикорм «Старт», проверенный на отсутствие антибиотиков. Для питья использовали отстоянную водопроводную воду.
Для заражения опытных и контрольных бройлеров использовали полученный из музея ФГУН ГНЦ ПМБ штамм Salmonella enteritidis Rif 92, устойчивый к рифампицину (МПК 200 мкг/мл), вирулентный для белых мышей (LD50=500 КОЕ) и способный колонизировать кишечник, печень и селезенку цыплят-бройлеров в любом возрасте, проверенный на устойчивость, к ципрофлоксацину. Заражение девятисуточных цыплят проводили интрагастрально, культуру в дозе 0,5 мл суспензии (108 мк) вводили птице с помощью зонда с оливой, суспензию штамма предварительно готовили, используя для этого стандарт мутности. Окончательную концентрацию живых клеток (КОЕ), вводимых птице, определяли путем высева взвеси сальмонелл на плотные среды с последующим подсчетом выросших колоний штамма Sallmonella enteritidis Rif 92.
Контроль заражения цыплят осуществляли путем клинического наблюдения и «прямого» высева методом «мазков-отпечатков» органов убитого цыпленка (легкое, сердце, печень, селезенка) на агар Эндо с рифампицином («Питательные среды», Оболенск). Для обнаружения сальмонелл в содержимом кишечника проводили титрование с шагом 10 (до 10-6) с последующим высевом по 0,1 мл суспензии с каждого разведения на агар Эндо с рифампицином. Для выделения сальмонелл, помимо «прямого» посева исследуемого материала на указанные питательные среды, использовали предварительное обогащение образцов на неселективной и селективной средах.
Для определения колиформенных бактерий использовали агар Эндо и питательный агар («Питательные среды», Оболенск). Для определения концентрации проводили титрование содержимого толстого кишечника (по вышеописанной схеме).
Для определения концентрации группы молочнокислых бактерий использовали MRS-агар и MRS-бульон (Himedia, Индия) по той же схеме.
Для идентификации основных видов бактерий использовали масс-спектральный анализ в режиме MALDIOF на масс-спектрометре Bruker с использованием автоматической программы Bruker Taxonomy.
Для лечения цыплят при экспериментальном сальмонеллезе в первой подопытной группе использовали 10% раствор ципрофлоксацина в концентрации 1 мл/л воды, во второй подопытной группе – раствор препарата «Ципровет 10%» в концентрации 1 мл/л воды. Дача воды с препаратом осуществлялась круглосуточ 49 но, вволю, в течение 5 дней. Цыплята контрольной группы получали вволю отстоянную водопроводную воду.
Критериями оценки эффективности лечения служили: снижение клинического проявления сальмонеллеза, гибели инфицированных цыплят, колонизация их кишечника сальмонеллами, выделение сальмонелл из внутренних органов, влияние антибиотика и лекарственного препарата «Ципровет 10%» на микробио-ту кишечника (содержание условно-патогенной колифлоры и молочнокислых бактерий).
Производственный эпизоотологический эксперимент по сравнительному испытанию эффективности препаратов «Ципровет 10%», «Энрофлон 10%» и «Энроксил» под авторским надзором проводили в условиях ОАО «Птицефабрика Пермская» на 88817 цыплятах-бройлерах кросса Росс-308 и ОАО «Птицефабрика Михайловская» на 65900 цыплятах по разработанной и согласованной с хозяйствующими подразделениями и региональными органами ветеринарной службы схеме.
Результаты исследований 2.2.1. Эпизоотологический мониторинг в условиях современного птицеводства в конкретном субъекте Федерации 2.2.1.1. Наиболее значимые нозоформы инфекционной и инвазионной патологии птиц в условиях территориальной аппликации промышленного птицеводства
Эффективность отрасли птицеводства в регионе во многом зависит от эпизоотического состояния птицеводческих хозяйств, вот почему постоянный эпизо-отологический мониторинг за формированием и динамикой функционирования нозологического профиля инфекционных и инвазионных болезней птиц в конкретных птицехозяйствах конкретных субъектов Федерации и в целом в стране является необходимым, научно обоснованным приемом управления эпизоотической обстановкой и эпизоотологическими параметрами популяции птиц в регионе и неотъемлемой технологической компонентой выращивания птицепоголовья и организации производства высококачественной и безопасной продукции птицеводства.
С целью повышения объективности показателей эпизоотологического мониторинга предварительно адаптировали для условий птицеводческих хозяйств Нижегородской области разработанную в свое время схему-модель контроля за эпизоотической ситуацией в молочном животноводстве, свиноводстве и овцеводстве (В.В. Сочнев, 1989). Модернизированную схему-модель использовали как методическую основу организации и осуществления эпизоотологического мониторинга в птицеводстве на постоянной основе (рис. 2.1). Подтвердили, что эпизоотическую ситуацию в конкретных птицеводческих хозяйствах следует оценивать на основе совокупности инфекционных и инвазионных болезней птиц, зарегистрированных здесь как на момент исследования, так и за обозримый период времени (на определенную – заданную глубину ретроспекции).
Установили, что экспертную оценку эпизоотической обстановки в птицеводстве следует проводить по двум основным направлениям: изучение нозологического профиля заразной патологии по пространственно-территориальным, временным и популяционным алгоритмам, а также углубленным анализом особенностей характера эпизоотического проявления наиболее значимых в регионе конкретных нозоформ.
Используя методические приемы ретроспективного эпизоотологического анализа, на первом этапе устанавливали «удельный вес» и место каждой нозо-формы в суммарной заболеваемости популяции птиц инфекционными и инвазионными болезнями, разрабатывали и осуществляли пространственную аппликацию эпизоотической обстановки на конкретную дату на топографической эпизоотической карте, а при объективной потребности осуществляли корректировку противоэпизоотической системы с учетом установленной степени эпизоотического и эпидемического риска.
Региональные особенности формирования нозологического профиля заразной патологии птиц в условиях Нижегородской области
В ходе эпизоотологического эксперимента рассмотрели воздействие изучаемых препаратов на бифидо- и лактобактерии, локализующиеся в кишечнике цыплят, с использованием научно-обоснованных методических подходов (раздел 2.1 диссертации).
От клинически здоровых цыплят подопытной и контрольной групп с диагностической целью провели отбор специментов для микробиологических исследований и определения качественного и количественного состава микроорганизмов, населяющих кишечник птиц.
Результаты микробиологических исследований различных отделов кишечника 5-дневных цыплят представлены в табл. 2.31.
Установили, что средние показатели общей обсемененности кишечника цыплят составили 5108116±24040 КОЕ/г. Из них в слепых отростках установлено 49390505±24300 КОЕ/г, в тонком кишечнике – 3417800±17100 КОЕ/г и в толстом – 6967500±27400 КОЕ/г. Подтвердили, что наименее заселенным микрофлорой оказался тонкий отдел кишечника. Максимальное значение общей микробной об-семененности установили в толстом отделе кишечника. В этом же отделе кишечника максимальной оказалась и концентрация молочнокислых бактерий. В эксперименте использовали титры разведений специментов от 10-3 до 10-5.
На основании полученных результатов исследований разработали линейно-графическую схему-модель микробной обсемененности различных отделов пищеварительной трубки 5-дневных цыплят (рис. 2.14) и подтвердили, что микробная обсемененность различных отделов кишечника цыплят неравнозначна, в слепых отростках превалируют энтеробактерии над молочнокислыми (1,5:1), в тонком отделе кишечника эта закономерность увеличивается (4,7:1), в толстом
Экспертная оценка динамики микробной обсемененности отделов кишечной трубки цыплят (экспериментальные данные, р0,01) отделе кишечника эта закономерность изменена в противоположенном направлении (1:6,5). Однако общая обсемененность кишечника цыплят не отражает установленную тенденцию дифференциации микробного представительства в организме цыплят (1:1,28).
С целью визуализации полученных результатов изучения микробного обсеменения кишечника цыплят разработали линейно-радианную схему-модель количественного соотношения микроорганизмов различных видов в конкретных отделах кишечной трубки (рис. 2.15).
По результатам этих исследований для дальнейшего выполнения экспериментов мы решили использовать только участки толстого отдела кишечника.
При исследовании качественного состава микробиоты толстого отдела кишечника у 12-дневных цыплят-бройлеров мы использовали масс-спектральный анализ на масс-спектрометре Bruker в режиме MALDIOF с использованием автоматической программы Bruker Taxonomy (табл. 2.32).
Линейно-радианная схема-модель микробного обсеменения различных отделов кишечника пятидневных цыплят в условиях промышленного птицеводства. (экспериментальные данные, р0,01).
Экспертная оценка состава микробиоты толстого отдела кишечника у 12- дневных цыплят-бройлеров (экспериментальные данные, iр0,01) Облигатные анаэробы Факультативные анаэробы Грам-положительные Грам-отрицательные Грам-положительные Грам-отрицательные Анаэробные кокки, из них преобладают Ruminococcus spp. Bacteroides spp., вт.ч.:B. clostridiiformisB. hypermegasB. fragilis Enterococcus spp., вт.ч.: E. faecalisE. cecorumE. faeciumE. hirae Enterobacteria
Данные, полученные в ходе этого иследования, показывают, что выявленный нами видовой состав микрофлоры кишечника соответствует таковому составу толстого отдела кишечника здорового цыпленка.
Эксперимент, позволивший сравнить воздействие на нормофлору кишечника здоровых цыплят раствора антибиотика (10% раствор ципрофлоксацина), пре-биотика (кормовая добавка «Ветелакт») и лекарственного средства «Ципровет 10%», включающего в своем составе ципрофлоксацин и лактулозу, провели совместно со специалистами ФБУН ГНЦ ПМБ (Федеральное бюджетное учрежде 114 ние науки «Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии»).
Экспертная оценка антибактериальной эффективности препарата «Ци-провет 10%» и 10% раствора ципрофлоксацина при экспериментальном сальмо-неллезе птиц (цыплят-бройлеров)
Птицеводство на современном этапе является наиболее динамично развивающейся отраслью сельского хозяйства в России. От успешного его развития в немалой степени зависит выполнение программы по импортозамещению, задекларированной правительством страны. Перед ветеринарными врачами, работающими в этой отрасли, стоит чрезвычайно важная задача увеличения сохранности поголовья и повышения продуктивности птицы, и в первую очередь за счет снижения её заболеваемости. Известно, что бактериальные болезни птиц играют основную роль в заболеваемости кур. По нашим данным, в условиях конкретного субъекта Федерации на долю бактериальных болезней птиц в промышленном птицеводстве (эшерихиоз, сальмонеллез и другие. болезни) приходится 46,2% их суммарной заразной патологии. Такая тенденция и в других субъектах Федерации, и в целом по стране.
Из выявляемых неблагополучных пунктов по бактериальным болезням среди птиц, безусловно, лидируют колибактериоз – 32,6% и сальмонеллез – 13,6%. По нашим данным, удельный вес бактериальных инфекций в гибели птицы от заразных болезней в РФ составляет 63%. Именно поэтому значительные ресурсы ветеринарной службы в птицеводстве сосредоточены на борьбе с бактериальными болезнями. Именно в этом направлении также работают и большинство компаний, разрабатывающих и производящих лекарственные средства для птиц.
Современные лекарственные средства должны обладать не только высокой эффективностью против возбудителей болезни, но и быть технологичными в применении, вызывая минимальный стресс у птиц во время ветеринарной обработки, способствовать максимально быстрому восстановлению здоровья и продуктивности птиц после переболевания. Большую роль в профилактике бактериальных заболеваний, кроме вакцин, играют не только антибактериальные препараты, но и пробиотические, пребиотические препараты и кормовые добавки. Действие этих препаратов и кормовых добавок направлено на формирование и поддержание в функциональном состоянии нормальной микрофлоры желудочно-кишечного тракта птиц. Одной из важнейших функций нормальной микрофлоры кишечника птицы является обеспечение колонизационной резистентности, которая предотвращает заселение организма птиц патогенными и условно-патогенными микроорганизмами [1, 39, 126]. Нормальная микрофлора кишечника принимает самое активное участие в обеспечении высокого уровня естественной резистентности макроорганизма [147]. В процессе становления иммунной системы у цыплят нормальная микрофлора принимает активное участие в реакциях, направленных на повышение бактерицидной и лизоцимной активности сыворотки крови [159]. То есть роль полезной микрофлоры кишечника птиц в борьбе организма с чужеродным бактериальным агентом чрезвычайно велика.
В современных условиях ведения интенсивного промышленного птицеводства у птиц часто встречаются качественные и количественные изменения нормальной микрофлоры кишечника. Она меняется в зависимости от возраста птицы, заболеваний, антибактериальных обработок, стрессов и т.п. Для корректировки и восстановления нормофлоры кишечника птиц часто применяют пробиотические препараты. Наиболее распространенные пробиотики («Лактобифадол») задают птице вместе с кормом, что, на наш взгляд, нетехнологично. Поэтому ведётся разработка пробиотических препаратов, которые можно было бы выпаивать курам с водой. В частности, лабораторией кафедры микробиологии, биотехнологии и химии ФГБОУ ВПО «СГАУ имени Н.И. Вавилова» была разработана пробиотиче-ская композиция («Пробио-С»), содержащая лактобациллы, энтерококки и бифи-добактерии, предназначенная для выпойки птицам. Мы сначала проверили целесообразность и эффективность применения этой композиции цыплятам после ан-тибиотикотерапии препаратом «Колмик». В группах, получавших «Пробио-С», сохранность птицы была выше на 0,55 и 1,01%, чем в контрольных группах. Цыплята в подопытных группах быстрее набирали живую массу, среднесуточный прирост живой массы цыплят в подопытных группах был выше на 0,9 и 0,4 г. К концу эксперимента живая масса подопытных цыплят была на 1,24 % выше, чем контрольных.
Полученные нами данные свидетельствуют, что пробиотическая композиция («Пробио-С») является эффективным и перспективным пробиотическим препаратом и ее применение после антибиотикотерапии вполне оправданно. Сравнивая полученную для испытания композицию с зарегистрированным пробиотиком «Лактобифадол», мы также получили обнадеживающие результаты. Цыплята, получавшие «Пробио-С», быстрее набирали вес, чем цыплята из контрольной группы, в последний день опыта их средний вес превышал на 28 г вес цыплят из контрольной группы. Однако цыплята, получавшие «Лактобифадол», росли на протяжении всего эксперимента более интенсивно, чем цыплята, получавшие «Про-био-С», и к концу эксперимента их средний вес был на 34 г выше, чем у цыплят, получавших «Пробио-С». Сохранность цыплят в подопытных группах также была выше, чем в контрольной группе. В группе, получавшей «Пробио-С», за период опыта пало цыплят на 192 головы меньше, чем в группе, получавшей «Лактоби-фадол», соответственно процент сохранности в этой группе зафиксирован на 0,2% выше. В подопытных группах процент выбраковки был ниже, чем в контрольной. Сравнив показатели по двум подопытным группам, мы обнаружили, что процент выбраковки птицы в группе, получавшей «Пробио-С» был на 0,3% выше, чем во второй группе.
Мы изучили также и причину падежа цыплят в подопытных и контрольной группах. Нам удалось установить, что птицы, получавшие «Пробио-С» и «Лакто-бифадол», имели не только большую сохранность, но и меньший процент падежа от желудочно-кишечных болезней. В подопытных группах он составил 25,2% и 22,4%, тогда как в контрольной группе был зафиксирован на уровне 37%. По этому показателю Лактобифадол также показал лучший результат.
Так как у нас в эксперименте находились птицы яичного направления, нам удалось изучить еще целый ряд параметров, характеризующих влияние изучаемых пробиотиков на организм и продуктивность птиц. Птицы, получавши «Про-био-С» и «Лактобифадол», развивались более равномерно и достигли своего физиологического развития раньше, чем птица в контрольной группе. В группе, получавшей «Пробио-С», первое яйцо было получено на 4 дня, а в группе, получавшей «Лактобифадол» на 3 дня раньше, чем в контрольной группе. Показатель 5% яйценоскости в день в первой подопытной группе был достигнут на 124-й день, а во второй – на 129-й день, тогда как куры в контрольной группе вышли на этот показатель только на 134-й день. По этому показателю «Пробио-С» оказался эффективнее «Лактобифадола». При переводе молодняка птицы в группу куры, в возрасте 154 дня, яйценоскость в первой подопытной группе составила 83,3%, а во второй – 83,9%, тогда как в контрольной группе этот показатель был зафиксирован на уровне 63,6%, что оказалось даже ниже показателей, рекомендованных по данному кроссу. Ежедневный учет яйценоскости в подопытной и контрольной группе продемонстрировал, что в подопытных группах продуктивность была выше рекомендованных показателей по кроссу, тогда как в контрольной группе она была на нижней рекомендованной по кроссу границе. В первой подопытной группе продуктивность была на 1,5 %, а во второй («Лактобифадол») на 1,9% выше, чем в контрольной группе.