Введение к работе
Актуальность проблемы. В настоящее время активно изучаются механизмы иммунной регуляции физиологических фуикний, в том числе сосудисто-тромбоцитарного гемостаза, свертывания крови и фибринолиза. Известно, что в организме существует единая интегральная клеточно-і-уморальная система защиты, включающая иммунитет, гемостаз и псспецифическую резистентность организма (Кузник Б.И.. Цыбиков И.Н., 1982 - 1996; Витковский Ю.А., 1997). Изменения в одной из функциональных единиц этой системы влекут за собой сдвиги в других.
Важными связующими звеньями между ними являются цитокины, выступающие, с одной стороны, в качестве физиологических модуляторов клеточно-опосредованных механизмов регуляции системы гемостаза в норме, а с другой - триггеров гиперкоагуляции при развитии патологических состояний (Кузник Б.И. и соавт., 1995 - !999; Витковский Ю.А. и соавт., 1995 - 1999; Colucci М, 1995; Seghatchian М., Samama М., 1996).
За последние годы накоплено достаточно много сведений об иммунных и гемостатических нарушениях при различных патологических состояниях. Обнаружено, что в процессе гемокоагуляции образуются аутоантитела к активированным факторам свертывания крови (Цыбиков Н.Н. и соавт., 1982 - 1996). Установлено, что в регуляции системы гемостаза принимают участие макрофаги, моноциты, лимфоциты, гранулоциты, фибробласты, эндотелиоциты и другие клетки (Малежик Л.П., 1985; Кузник Б.И. и соавт., 1989; Osteoid В., 1996; Pearson J.D., 1993; Semeraro N., Colucci M.. 1992). Многочисленными исследованиями показано, что при заболеваниях, сопровождающихся ДВС-синдромом. одновременно происходят сдвиги в иммунитете, в то.м числе и в продукции цитокинов (Белокриницкая Т.Е., 1995-1999; Витковский Ю.Л., 1995-1999; Кузник Б.И., 1995-1999; Esmon СТ., 1993; Muller-Berghaus G. et al., 1993; Seghatchian M.J., Samama M.M, 1996 - 1998). Более того, выявлено, что секреция медиаторов иммунного ответа зависит от исходного состояния крови (Витковский Ю.А., 1997). Особый интерес представляют провоспалительные цитокины, являющиеся ключевыми молекулами в инициации иммунных и гемостатических реакций при различных заболеваниях. Однако до сих пор окончательно не установлены биологические эффекты этих молекул в поддержании жидкого состояния крови в условиях гиперкоагуляции и торможения фибрннолиза. Решение этих вопросов позволит расширить наши сведения о патогенезе
геморрагических и тромооэмоолическнх осложнений, а также поможет разработать новью пути для диагностики, лечения и профилактики нарушений системы гемостаза.
Цель и задачи исследования. Основной целью наших исследований явилось изучение роли интерлсйкина-1 (IL-1) и IL-2 в регуляции системы гемостаза в норме и патологии.
В связи с этим решались следующие задачи:
-
Изучение влияния IL-1 и IL-2 на опосредованную лимфоцитами регуляцию сосудисто-тромбоцитарного гемостаза, свертывания крови и фибринолиза в опытах in vitro.
-
Исследование действия IL-la, IL-ip и IL-2 на продукцию прокоагулянтов, антикоагулянтов и фибринолитических агентов в гепаринизированной и фибринолизной крови, а также в фибриновом сгустке.
-
Изучение взаимосвязи между содержанием IL-la, IL-ip и состоянием системы гемостаза у больных с ожоговой болезнью.
Научная новизна. Установлено, что Ш-1вызываст опосредованное лимфоцитами торможение адгезии и агрегации тромбоцитов. Клетки крови после краткосрочного контакта с IL-1 продуцируют антикоагулянты РпС, os-МГ и ссрЛТ. Продолжительное воздействие IL-1 повышает выброс прокоагулянтов лимфоцитами, присутствие же кровяных пластинок или коллагена усиливают этот эффект. IL-la и IL-ip проявляют действие, свойственное полному IL-1, как при краткосрочном, так и длительном контакте с лимфоцитами. IL-1 способствует продукции ЛП лимфоцитами, а в присутствии кровяных пластинок, особенно на фоне коллагена, приводит к секреции ИАП. IL-2, независимо от времени воздействия, усиливает синтез и секрецию лимфоцитами прокоагулянтов.
IL-1 способствует выбросу прокоагулянтов, антикоагулянтов и фибринолитических агентов из клеток крови в гепаринизированной и
ф"срн;!Одпзпоп icpcDH, а также цтирпіїоьилї h^Cinc. t> гепаринизированпой крови IL-1 стимулирует продукцию клетками антикоагулянтов - РпС. а:-МГ и агАТ, а также образование ИЛП; в фибринолизной крови угнетает продукцию РпС, сь-МГ, а і-AT и ингибирует фибринолиз; в сгустке крови - тормозит синтез РпС, а2-МГ и агАТ и стимулирует фибринолиз. В сгустке IL-ip способствует выходу АП, a IL-2 - ИАІІ. В фибринолизной крови обе фракции IL-1 (а и (3) усиливают продукцию ПАП.
При заболеваниях, сопровождающихся внутрисосудистым
свертыванием крови на фоне иммунодефицнтов, наблюдается усиление продукции IL-la и IL-ip. Наличие внутрисосудистого свертывания крови при ожоговой болезни сопровождается пропорциональным увеличением содержания IL-la и IL-ip. У больных с ожоговой болезнью в суточной культуре гепаринизированпой крови повышается, а в кровяном сгустке и фибринолизной крови снижается продукция IL-ip.
Практическая ценность работы. Полученные нами данные
свидетельствуют о способности IL-la, IL-ip и LL-2 изменять ход
гемостатических реакций в норме и патологии. В связи с этим результаты
исследований могут быть полезными для расширения сведений о
патогенезе заболеваний, сопровождающихся нарушениями гемостаза и
иммуногенеза, и с учетом сказанного позволяют более корректно
подходить к лечению больных. Повышение концентрации
провосиалительных IL-la и IL-ip при заболеваниях является дополнительным критерием в диагностике различных изменений в системе гемостаза, в том числе и развития ДВС-синдрома.
Внедрение в практику. Материалы диссертационной работы внедрены в учебный процесс кафедр нормальной и патологической физиологии ряда вузов страны. Автором разработаны, модифицированы и
внедрены в научные исследования теоретических и клинических кафедр Читинской медицинской академии лабораторные тесты для экспериментальных и клинических целей.
Апробация диссертации. Материалы исследований доложены на заседаниях Читинского отделения общества физиологов и патофизиологов в 1996, 1997,1998 и 1999 г.г.
Объем и структура работы. Диссертация изложена на 132 страницах машинописного текста, иллюстрирована 15 таблицами и К) рисунками. Работа состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и мстодои исследования, 2 глав собственных исследований, обсуждения полученных данных, выводов, практических рекомендаций и списка литера'іурьі, включающего 112 отечественных и 165 зарубежных источников.
Положения, выносимые на защиту.
-
IL-la и IL-1 Р, воздействуя на лимфоциты, оказывают влияние на состояние сосудисто-тромбоцитарного гемостаза, свертывания крови и фнбринолиза. Эти эффекты определяются микроокружением клеток и исходными показателями системы гемостаза. IL-1 вызывает торможение адгезии и агрегации тромбоцитов, модулирует выброс прокоагулянтов, антикоагулянтов и фибринолитичсских агентов из лимфоцитов и других клеток в гепаринизнрованпой и фибринолизной крови, а также в сгустке. 1L-1 и отдельные его фракции (а и Р). способны индуцировать продукцию клетками крови прокоагулянтов и ашикоагулянтов (РпС, а:-МГ, a,-AT), активаторов и ингибиторов плазминогена. 1L-2 усиливает выделение клетками прокоагулянтов и ИАП.
-
При патологических состояниях, сопровождающихся увеличением продукции IL-la и IL-lp. развивается внутрисосуднстос свертывание крови.