Введение к работе
АКТУАЛЬНОСТЬ ИССЛЕДОВАНИЯ. Изучение механизмов регуляции бо-лєЕой чувствительности (БЧ) по-прежкёму считается ОДНОЙ ИЗ BSS-нейших проблем медицины и биологии. Доказано, что торможение болевой импульсации в организме животных и человека происходит зз счет изменения активности многих нейрохимических систем, в особенности опиоидных. С помощью введения опиатных антагонистов (в основном, яалоксона), внутривенно или в структуры мозга, было показано включение опйоидннх систем в механизмы обезболивания, вызванного разнообразными воздействиями: электростимудяцией нервов и мозговых структур, акупунктурой, стрессом (Akil et al.,1979; Та-keshige et al.,1981; Mayer etal., 1977; Bodnaretal., 1976; Chesher et al.,1977 и др.) Также с помсщьп фармакологических методов было показано, что активация опиоидных систем при аналгеэи-рующих воздействиях, в том числе многократных, имеет динамический характер (Братин,1985; Pert,Walter,1976; Grau et al.., 1981; Pome-ranz,Warma,1988).
Благодаря применению биохимических методов исследования, в многочисленных исследованиях были обнаружены изменения содержания опиоидных пептидов в крови, спинномозговой жидкости и структурах ЦНС, участвующих в регуляции болевых ощущений, при различных воздействиях и состояниях, вызывающих изменение БЧ (Братин с со-авт.,1982; Madden,1977; Sjolung et al.,1977; Akil et al.,1986; Martignoni,1982;Lovacky et al.,1990; Nabeshima et al., 1992 и
ДР-)-
Среди множества дачных такого рода особый интерес представляют сравнительно немногочисленные данные о неоднозначных изменениях содержания опиоидов в структурах мозга при разнообразных по природе внешних воздействиях (многие виды стресса, акупунктура и т.д.), которые подтверждают гипотезу о специфичности, избирательности включения опиоидэргических антиноцицептивяых(АЩ) механизмов (Братин,1985; Kelly,1985; Watkins,Mayer,1986 и др.). Однако при этом сведений об изменении функционального состояния опиоидных рецепторов (ОР) в структурах мозга, которые позволили бы точнее оценить степень активности опиоидных систем, пока получено мало (Christie,1982; Kameyama et al.,1984; Nabeshima, 1985; See-(jer et al.,1984; Stuckey et al.,1989).
К сожалению, большая часть вышеперечисленных исследований была проведена о использованием только острых воздействий. Между тем, анализ о помощью биохимических методов динамики состояния опиоидных систем (ОС) в структурах мозга при многократных (хрони-
- г -
ческих) воздействиях мог бы способствовать объяснению феномена адаптации АНЦ механизмов к условиям окружающей среды (Bodnar,Sikorsky, 1983; Girardot.Holloway,1984) или лечебного эффекта акупунктуры, а также облегчил бы изучение (при использовании модели хронического болевого стресса) механизмов патологической боли (МШап.1986).
ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ. Цель работы - изучение в сравнительном аспекте динамики состояния болевой чувствительности и опиоидных систем некоторых, связанных с регуляцией боли, структур головного мозга у экспериментальных животных, подвергавшихся мно-гокрзтным ЕоэдейстЕиям стресса и акупунктуры. Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:
-
Выявить особенности изменений болевой чувствительности у экспериментальных животных при многократных воздействиях: а)стрессового характера (плавания в холодной воде и злектрокожно-го болевого раздражения) и б) акупунктуры.
-
Определить характер динамики уровня иммунореактивного р, -эндорфина в базальних ганглиях, гипоталамусе и среднем мозгу у экспериментальных животных при исследуемых воздействиях.
-
Оценить величины кинетических констант связыванияуи-анта-гониста ['НЗналоксона с опиоидными рецепторами в названных сірук-турах мозга при многократных стрессовых и акупунктурної* воздействиях.
1. Ежедневные воздействия в течение 15-ти дней плавания в холодной воде (ПХВ), эдектрокожного болевого раздражения (ЭКБР) и акупунктуры (АЛ) способствуют стабильному понижению болевой чувствительности (БЧ) в покое (т.е. вне непосредственного воздействия стресса и акупунктуры). Показателем понижения БЧ служит достоверное уведичекиие длительности латентных периодов (ЛП) поведенческих реакций на боль по сравнению с соответствующими исходными и контрольными значениями ЛП. Особенности динамики БЧ, зависящие от Еида и количества экспериментальных воздействий, а также.способа оценки БЧ, могут свидетельствовать о специфичности активации противоболевых механизмов.
2. Стабильное и достоверное уменьшение БЧ в покое, наблюдавшееся в большей степени при многократном акупунктурном воздействии (АВ) и в меньшей - при ЭКБР, позволяет предположить, что
исследуемы? воздействия сопровождаются повышением тонуса антино-цицепгивных систем.
-
При увеличении количества воздействий ЭКБР и АП происходит адаптация ангиноцицептизкых сксгем к этим воэдаиствиям, которая проявляется в виде уменьшения аналгетичэской реагаг. и у экспериментальных животных в ответ на каждое новое воздействие по сравнению о таковой после первого воздействия. При ПХВ феномен адаптации отмечен не был.
-
Динамика содерлания ^-эндорфина (р-Щ) и состояния опизт-ных репторов (ОР) в структурах головного мозга, свяс-шных с регуляцией БЧ, у экспериментальных животных имеет специфический характер, который зависит от вида и количества внешних воздействий. Однако многократные стрессовые воздействия, по сравнению с АП, вызывают более стабильные изменения содержания й-Щ во всех исследуемых структурах.
-
При исследуемых воздействиях, в большей степени при ЭКБР, а в меньшей -при АП, наблюдается сопряженность изменений содержания /3-ЭД и параметров, характеризующих функциональное состояние
jt-OP. Этот факт свидетельствует о возможности взаимного влияния /3-ЭД и состояния рецепторов.
6. При всех исследуемых воздействиях в отдельные сроки можно
отметить соответствия в изменениях фоновой БЧ и активности А-эн-
дорфияовых систем структур мозга, что указывает на возможность
участияр-эндорфиновых систем исследуемых структур в избиратель
ной активации противоболевых механизмов.
В настоящей работе впервые проведена сравнительная оценка динамики БЧ в покое у экспериментальных животных при многократных аналгезирующих воздействиях разной природы (неболевой и болевой стресо, АП), которая позволила выявить повышение тонуса противоболевых систем при всех исследуемых моделях, а также избирательность активации этих систем для каждого воздействия. Впервые продемонстрирована специфичность динамических профилей содержания иммунореактивногор-ЭД в некоторых структурах головного мозга крыс, зависящая как от типа структуры, так и вида воздействия. Выявлены общие тенденции в динамике^-ЭД, характерные для стресса и АП. С помощь» радиорецепторного анализа впервые установлено, что величины констант связывания меченногоь-антагониста налоксона
синаятосомкыми мембранами мозговых клеток зависят от типа структуры мозга, вида и количества внешних воздействий. Впервые проведено сопоставление экспериментальных данных по динамикеyS-ЭД и динамике констант связывания меченого налоксона, полученных в совершенно одинаковых экспериментальных условиях. Такое сопоставление позволило установить наличие специфических взаимосвязей ме*ду уровнемуВ-ЭД и функциональным состоя к лем .«-рецепторов, ЗЗЕИ0Я1ЯИХ от вида и количества воздействий, а также типа структуры мозга. Обнаруженная специфичность изменений активностиуЗ-эндорфиноаых систем исследуемых структур мозга, обусловленная природой и количеством аналгезирущих воздействий, дала основание судить об участии этих систем в избирательной активации противоболевых механизмов.
НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ.
Проведенные исследования позволили расширить представления о роли ОС отдельных образований мозга в процессах обезболивания. Полученные данные об изменении активности^-эндорфинзвых систем в структурах мозга свидетельствуют о том, что активность опиоидных систем ЦНС резко изменяется в ответ на внешние воздействия и является важной составной частью нейрохимических механизмов, обеспечивающих адекватную окружающим условиям реакцию организма. Благодаря проведенным нами исследованиям показано, что активацияй-эн-дорфиновых систем АНЦ в структурах мозга при различных воздействиях реализуется отдичавідимися друг от друга механизмами.. Это дает основание для дальнейших теоретических разработок строго дифференцированного подхода к лечению нарушений в системах регуляции БЧ.
АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ. Материалы диссертации представлены и обсуждены на международных научных конференциях (Дели, 1989; Токио, 1990), ежегодной научной конференции ВНЦ медицинской реабилитации и физической терапии (Москва, 1991 год) и расширенном заседании лаборатории биохимии НИЛ традиционных методов лечения (Москва, 1993 год).
ПУБЛИКАЦИИ. Материалы диссертации отражены в 6 печатных работах.
СТРУКТУРА И ОБЪЕМ ДИССЕРТАЦИИ. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, изложения результатов исследования (3 главы), обсуждения ре-