Введение к работе
Актуальность темы. Учение о регуляторных пептидах - междисциплинарная область знаний, охватывающая важные разделы биохимии, нормальной и патолопїческои физиологии, эндокринолопш, фармакологии и других медико-биологическігх дисциплин (И.П. Ашмарин, М.Ф. Обухова, 1986; Е.Д. Гольдберг, A.M. Дыгай, О.Ю. Захарова. 1990; О.А. Гомазков, 1996; Moore M.R., P.M. Black 1991; RE. Molina, N.N. Abumrad, 1994).
Обладая чрезвычайно высокой физиологической активностью, подчас на несколько порядков превышающей аналогичное действие непептидньгх :оединений, регуляторные пептиды могут в зависимости от места их высвобождения осуществлять передачу сигнала от одной клетки к другой, модулировать реактивность определенных групп нейронов, стимуліфовать или гормозить выброс гормонов, а также, попадая в кровоток выполнять функцию эффекторных физиологически активных агентов или модуляторов тка-кевого метаболизма (В.Г. Смапгн, В.А. Виноградов, С.А. Булгаков, 1983; ЯП. Ашмарин, М.А. Каменская, 1988; Е.О. Братан, 1991; Ю.Б. Лишманов, П.Н. Маслов, 1994; GA Olson, R.D. Olson, A.J. Kastin, 1994).
Изучение регуляторных пептидов позволяет расширить представления э способах управления физиологическими функциями. Многие из привычных классических представлений о нейрогуморальных факторах, участвующих в медиаторной или гормональной миссии подверглись пересмотру с таявлекием нового класса этих биологически активных веществ - более разнообразных по своей химической организации, лабильных в химической адмбинаторике, способных благодаря этим свойствам участвовать в органи-sairan целых регуляторно-функциональных сетей (И. П. Ашмарин, 1987).
Достижения в области молекулярной биологии и физиологии в последние годы во многом связаны с расшифровкой механизма действия регу-іяторньгх пептидов. Состояние современной пептидной химии открыло пер-шекпгвы создания на основе эндогенных веществ препаратов с заданными :войствами. Практическая сторона проблемы во многом ускорила всестороннее изучение свойств регуляторных пептидов. Семейство опиатов самое шогочисленное среди регуляторных пептидов. В настоящее время они и их дгятетические аналоги оценивают как потенциальные факторы коррекции эазличных патологических процессов. Синтетический аналог лей-інкефшшна - даларгин на сегодняшний день оценивается как один из наибо-іее эффективных противоязвенных препаратов (В.А. Виноградов, В.М. По-юнский, 1986). Наблюдается расширение показаній к его клишгческому применению (Ю.Б. Лишманов, Л.Н. Маслов, 1994; Н.Н. Михайлов, В.Д. Сле-іутлкин, 1995). Изучение аналогов, не обладающих сродством к опиатным «цепторам, проведено недостаточно. Один из представителей данной грунты веществ является неопиатный аналог лей-энкефалина (НАЛЭ).
В 1981 году семейство опиоидных пептидов пополнилось новым I сом - дерморфинами, обладающими высоким сродством к ц-рецептс Уникальная химическая структура (наличие правовращающей аминокі ты), высокая биологическая активность послужили толчком для созд ряда синтетических аналогов дерморфина, некоторые из которых испо; ются в нашей работе.
Цель п задачи исследования. Цель исследования состояла в вьи нии характера влияния синтетических аналогов дерморфина (А-10, седа и неоплатного аналога лей-энкефалина на процессы клеточного деления телиальных тканей белых крыс в хроническом зксперішентє при класс ском - внутрибрюшинном методе введения и, весьма перспективном, -траназальном способе введения. Для достюкения этой цели были сформ рованы следующие задачи:
-
Изучить характер влияния синтетического аналога дерморфина і являющегося суперселективньш агонистом ц-рецепторов, на проц пролиферации эпителиальных тканей белых крыс в хроническом зі рименте при внутрибрюппшном и интраназальном методах введеній
-
Изучить характер влияния синтетического аналога дерморфина се; на, являющегося смешанным агонистом ц- и 5-опиатных рецепторо процессы пролиферации эпителиальных тканей белых крыс в хрог ском эксперименте при внутрибрюшинном и интраназальном мет введения.
-
Изучить характер влияния неопиатного аналога лей-энкефалина на цессы пролиферации эпителиальных тканей белых крыс в хронича эксперименте при внутрибрюшинном и интраназальном методах ві ния.
-
Изучить некоторые биохимические и эндокринные механизмы вли исследуемых пептидов на процессы клеточного деления.
Научная новизна работы. Впервые установлено в хроническом перименте, что синтетический аналог дерморфина - А-10, являющийо перселективным агонистом ц-рецепторов, вызывает угнетение проли4 тивных процессов в эктодермальном эпителии роговицы и языка б; крыс. В эпителии фундального отдела желудка, имеющего энтодермал происхождение как агонисты ц-рецепторов, так и смешанные ц.- 6-агон: вызывают стимуляцию пролиферативных процессов. На основании ее венных данных и сведений литературы показана высокая эффективн ишраназального способа введения исследуемых аналогов дерморфин процессы клеточной пролиферации, сравнимая с внутрибрюпшнным * дом введения. Данные проведенных исследований свидетельствуют о q
гвовании сложных взаимосвязей между- сродством опиатных пептидов к ц-ли 8-рецепторам и характером реакции процессов клеточного деления. Эти :обенности должны учитываться не только в теоретическом аспекте, но и ри исследованиях направленных на клиническое применение этих соедине-ий в качестве лекарственных препаратов.
Теоретическая и практическая значимость работы. Аналоги, соз-ишые в лаборатории синтеза пептидов Кардиологического научного центра АМН, проходят в настоящее время стадию доклинического исследования, читывая активную вовлеченность опиатов в регуляцию процессов клеточ-эго деления, изучение характера влияния аналогов дерморфина и лей-дагфалина на процессы пролиферации имеет существенное теоретическое, ІК и прикладное значение. Дифференцированный характер реакции процесів пролиферации на лиганды различных субпопуляций опиатных рецепто-)в, изучение реакции процессов клеточного деления на исследуемые веще-ва существенно расширит наши представления о регуляции клеточного іления.
Особенностью настоящей работы является то обстоятельство, что леющиеся в литературе сведения о характере влияния нейропептидов на эоцессы клеточного деления ограничиваются оценкой однократного или шторного (5 кратного) введения. Между7 тем в клинических условиях при-;няется курсовой метод введения (21 и более дней). В литературе имеются едения, что к целому ряду эффектов опиатов наблюдается толерантность і.Г. Смагин, В. А. Виноградов, С.А. Булгаков, 1983), поэтому априорно ре-[ггь вопрос о характере влияния исследуемых нами пептидов на процессы :сточной пролиферации при хроническом воздействии не представляется зможным.
Интраназальная система доставки лекарственных препаратов приоб-тает в последнее время все большую популярность, особенно для опреде-нного класса фармакологических соединений. Речь идет, прежде всего, о птидах, среди которых можно выделить большое количество веществ, [ЄЮГДИХ важное значение для лечения целого ряда сложных заболеваний, ногие из зтігх соединений проходят стадшо доклинических испытаний, и лученные данные позволят уточнить спектр изучаемых аналогов дермор-іка и НАЛЭ, их побочные эффекты, показания и противопоказания.
Учитывая все выше изложенное, данное исследование, существенно уширяет границы наппгх представлений о регуляции клеточного деления и иадывает возможность модулирования пролиферации в тканях при раз-чных методах введения лигандов опиатных рецепторов.
Основные положення диссертации, выносимые на защиту
-
Синтетігческий аналог дерморфина, являющийся суперселективн агонистом д-опиатных рецепторов вызывает при хроническом в дении угнетение пролифератшшых процессов в эпителии роговиці языка белых крыс.
-
Синтетический аналог, имеющий сродство как к д.- так и 5-опи ным рецепторам вызывает при хроническом введении стимуляц процессов клеточного деления в эпителии роговицы и языка бел крыс.
-
В эпителии слизистой оболочки желудка оба исследуемых анат вызывали увеличение пролиферативного пула клеток.
-
Хроническое интраназалъное введение синтетических аналогов д морфина показало высокую эффективность доставки в организм д ной группы регуляторных пептидов, сравнимую с их внутрибг. шинным методом введения при действии на пролиферативные п цессы.
Апробация работы. Основные материалы диссертации были до жены и обсуждены на объединенном заседании ЦНИИ, кафедр гистолог патологической физиологии Дальневосточного государственного мелит ского университета и лаборатории морфологии ИОМиД СО РАМН, док давались на II и III съезде физиологов Сибири и Дальнего Востока.
Публикации. По теме диссертации опубликовано 8 печатных раЁ из них 1 в центральной печати.
Объем работы. Диссертация состоит из введения, пяти глав (обзі литературы, описания материала и методов исследования и трех глав, пр ставляющих результаты собственных исследований), обсуждение, вывод пракпгческих рекомендаций и списка литературы. Работа изложена на : листах машинописного текста и содержит 29 таблиц, 7 рисунков. Указаті литературы включает 170 работ отечественных авторов и 162 зарубежных