Введение к работе
Актуальность проблемы. Существует дзз типа гибели клеток апоптс: (часто называемой тасхе программируемой п-'.белыо) . и нгктез (насішьстаенигя гиоель) (Нозиков B.C., 1996). Апвптотячесхші тип гибели клеток обнаружен практически у всех многоклеточных организмов (Trurnp B.F., 197S; HoTvitz H.R., 1992; Boise L.H., 1995). Эта активный, генетически регулируемый процесс, участвующий з дифференикроаке, мор«5югскезс, г также а поддержании клеточного гомеостазз (Saunders R.A., 1966; Samaha H.S., 1995). Алоптоз играет огромную роль в реализации мехашяшз адахга-ции организма к воздействию высокой температуры (Teodorczyk-lnjeyan I.A., 1995) и ионизирующего облучения (Eastman А., 1992). Некоторые лекарственные препараты (ингибиторы пролиферация клеток) тагам действуют через индукцию апоптоза (Samaha H.S., 1995; Умгнсхяй СР., 1996). Кроме го-го, этот механизм пібели клеток имеет значение з развитей аутоиммунных (Ока М-., 1996), инфекционных (Handerson S. 1993; Clem R.J., 1994), кейроде-генеративиых заболеваний (Нас D.K., 1995; Нсзнкоз B.C., 1996). В работах некоторых авторов (Frankfurt O.S., 1994; Рауте СМ., 1995; Asachi М., IS35) высказывается пгпотеза о значении механизмоз гпоптезз a фориирсзаЕки генетического гомеостаза и оихогеиезе.
В кастоящее время приоритетным направлением в исследовании патогенеза онкологических заболеваний является изучешк взаимодействия процесса апоптоткчзской гибели с механизмами мутагенеза и канцерогенеза. Н> вестно. что хромосомная нестабильность ножет являться причиной возникновения как функциональных, так и патшорфологичесхих іарушсний на всех уровнях организации живых систем (Бочков Н.П., 1971; Heniich P., 19S2, Morris S.M., 1995). Одним из примеров реализации генетической нестабильности является иммерталнзацня клеток и развитие опухоли (Lotern J., 1991; RosselliF, l995;TamuraT., 1995).
Однако на сегодняшний день существует незначительное количество работ посвященных изучению места апоптотической пібели клеток в механизмах мутагенеза и канцерогенеза. Большинство зтнх работ выполнены з условиях in vitro с использованием различных клеточных линий (Saroaha H.S., 1995; Canrplejohn R.S., 1995; Schwartz J.L., 1995). Поэтому, до настоящего зремеки нет единого мнения о значении процесса апоптотической гибели з теопластяческой трансформации клеток.
Таким образом, едкой из актуальнейших задач з биологии я медицине твляется выявление аполтоз-ассоциированных патологий и устанозлеяпз рота апоптотической гиоели з инициации и прогрессировашщ опухолевых иро-хессоа у человека и животных. Решение этих задач пеззолит определить воїне подходы и направления в профилактике, диагностике- и лечении онкологических заболеваний.
Цель» иаэтвдшсгс Ессягдовшшй являлось изучение роли гпоптотнче сксй пібглк симфоолоз к вгйтрофшюв периферической кроеи в процесса нутагепгза к шщерсггеыеза у челозгга и эксперяментальньа згивотных. Дл ссугзссгелсаиа указанной цели были сформулированы следующие задачи:
-
(У&ить содержание генсток с цитогенетнчеенши нарушениями и актив кость Епоптотическон гибели лнмфашггоз я иейтрефнлов пернферг spc-зя у здоровых серонегатсвньгх и сгропозитизкых к ВЭБ доноров.
-
Изучть показатели апонтогаческой гибели лимфоцитов перифернчесш кровн у больных раком легкого в рекой молочной железы.
-
В ycaoaasx эксперимента исследовать уровень ЦЕтогекетическв изменен пых кпгтог: н шегпвность апептотаческой гибели лейкоцитов перяфернче сазй кревя гнзотных ера воздейстзип вашепругсщгй радиации, кшцеро гепа 12-0 тсрадеишоилфорбол-ІЗ-аагтагета и на фоне опуг-олсвего про сгесг, вызванного перевиваемой адспокарцяномой Зрлиха.
-
Сцепить дшзмкзу понзэтеяз "УО-сенсибшшзашш мембран лкзоссм ней трофплоз" у человека а зксЕерыиезтсяьиых гшвотпых, имеющих шокую] :цдгссуіо сгпшность овдтотгчеггззн гибели лимфоцитов пернферкческоі крова.
Наузэга вгагагед. В результате проведенного комплексного нсследо Z3E82 с исполъзеваазем современных методов впервые установлено, чи больные с оглиюгачеегтш ззболсвшгаяш! гагеят отклонения от нормаль еж значений позаззтелж еловтотечєсхон гибели лимфоцитов перифернче сага Брови. Выявлено, что доннаеяная шрятотичеекгя активность лкмфоци тез взбаводггтса преимущественно у лнц заболевших раком в молодой бої роте. Позгзаво, *їто іфв высоком уровне персЕстенцнв вируса Эшптейна Бгрра в орпшкш; человека, апоптотнчесаи активность лимфоцитов перяфе ряческой крова сзнзггется.
Впгргыг получена значеная границ иараабельности для показателе апоптотическон гкбеди лимфоцитов периферической кровн мышей и человека. Изучеак параметры популяцаонвого распределения особей с отклоиенн ем от нормальных значений по показателю адаатотнческрй гибели лнмфоцн
TOE.
Разработал и применен метод фув^цнонзльнон оценки лабилькоета мембран лезоооа. Применение этого метода позволяло установить относительную незгкнеамость процессов мембранной деструкции и ДНК' фрзгкентгцин при апоптстичгской гибели лейкоцитоз периферической крова.
В результата проведенного Есследозашія в рзботе получены коаые знання ф>тідаментгяьпого характера о'значении аполтотаческой" гибели лейкоцитоз периферической кровн в возникновении онкологических заболеааюй г в формировании генетического гомеостаза организма человека и животных.
Практическая знк-. 'ложностью раннего выявления н прогнозяроважм j-щзитня опухймсых пг -:-дессоз. Прсдло5ХїїПіьій и впервые иснользоаашыЯ а работе метод oi:o;-jnt />,;-эилытостн мембран лнзссом может иметь зайшое аналитическое з^?-?^;:,;.: цін изучения риска возникновения онкологических згболе*щиий. Разработа--шй метол может быть рекомендован для 'шлигаедуалышй опелкхі ш'оптст:*-гсекой активности клеток периферической крозн, ю^ наиболее бкегеый ! жономнчный способ по сравнению с существующими.
Полученные результаты позволят усовершенствовать метода! раяиаки-інной биодознметрии и дополнить крэтерил ouetuai риска здоросью лиц рг-іотаюших с радиоактивными источниками и химическими мутагенами.
Осиозмыг полдагезигз, аыкоекмые на ззщгггу.
-
У человека и экспериментальных животных яри ешзкой акпншесп? апоптегпгческой гибели лейхошггзз периферическсЯ крова наблюдается высокое содержание клеток с шггогепетическшш кзрушегашія.
-
При высоком татре ашител к галоидному аггпи'ечу гаруса Эп-штейна-Бзрр у здоровых доноров наблюдается сшягеийе актагносг.г лоп.-готической гибели лейкоцитоз периферической крови и узе%чгні?« ,с;::р-жакия лимфоцитов с щггогенетнчесгаеги нзруц/еняязін.
-
Высокая активность апоггготичесхоа гтдкян лейкоцитов п^рифср-і-теской крозн у мышей сопровождается увеличением числа ицдуцвроганнш )пухолей кожи и торможением роста перезиваемоК аецхгтпей адзнекгрии-юмы Эрлнха.
Апробгцшз работы. Основные положения работы доложены и обсуж-:ны на Ш Мелсдукародяой радиологической конференции «Судьба отрабо-вшего ядерного топлива: проблемы и реальность» (Красноярск, 1996); II '.ждународной научно-практической конференции «Безопасность жизнедег-льности в Сибири и на Крайнем Севере (Тюмень, V997); Юбилейной конвенции - Медико-биологические аспекты нейро-гумеральиой регуляции омск, 1997); 7th International conference «Radiation safety and social-ecological DblemsofKazakstan», (Karaganda, 1998).
Публикации. По теме диссертации опубликозаяо 9 печатных работ.
Объем и структура работы Диссертация изложена на 130 страницах н л-оит из введения, 4 глав, выводов, списка литературы. Работа иллхзстрп-зана 20 рисунками и 21 таблицей. Библиографический указатель включает ? источникоз, из них 23 отечественных и 91 иностранный.