Введение к работе
Актуальность исследования. Несмотря на значительные успехи в изучении развития репродуктивной системы, интерес исследователей к влиянию дисгормональных состояний материнского организма во время беременности на гистогенез репродуктивной системы плодов, остается традиционно высоким. Интерес к этой проблеме в значительной мере связан и с тем, что в последние годы зарегистрировано увеличение частоты патологических состояний репродуктивной системы потомства, вызванных изменениями гормонального статуса матери при беременности.
К числу важных практических задач биологии репродукции относится создание адекватных экспериментальных моделей эндокринопатий, наиболее часто встречающихся в клинической практике и нередко приводящих к возникновению патологии репродукции у потомства. Это необходимо как для выяснения механизмов врожденной патологии, так и для конкретизации информации о регуляции развития женской половой системы.
Известно, что андрогены, являясь предшественниками эстрогенов, играют важную роль в физиологии женской репродуктивной системы. Однако, их избыточная продукция в женском организме закономерно влечет за собой разной глубины нарушения морфофизиологии данной системы но, как правило, неблагоприятно влияет на течение беременности и последующее развитие репродуктивной системы потомства. В крайних проявлениях шперандрогения выступает как одна из причин женского бесплодия.
Необходимо отметить, что даже весьма умеренная степень гиперпродукции андрогенов в организме матери во время беременности может проявиться в нарушениях репродуктивной функции у потомства. Вместе с тем, разработка критериев риска получения потомства с патологией репродуктивной
-2 -сферы от матерей в повышенным эндогенным фоном андрогенов, представляет
большое практическое значение. Несмотря на высокий интерес к проблеме
влияния андрогенов на развитие плода и его репродуктивную сферу, отмечается
фрагментарность и противоречивость имеющейся по этому вопросу информации.
Малоизученным, однако важным с общетеоретических и практических позиций,
представляется вопрос о механизмах влияния внутриутробной
гиперандрогенизации на развитие репродуктивной системы у потомства. Высокие
статистические показатели дисфункциональных состояний половой системы у
девушек, рожденных от матерей с гиперандрогениеи, и статистика последующего
развития у них бесплодия делает настоятельным проведение биологических
экспериментов по изучению влияния внутриутробной гиперандрогенизации на
развитие женской репродуктивной системы.
Приведенные выше данные, а также , практически полное отсутствие сведений о постнатальном развитии женской репродуктивной системы при внутриутробной гиперандрогенизации, определили цель и задачи настоящего исследования.
Цель исследования.
Изучить влияние экспериментальной гиперандрогенизации на течение беременности, постнатальное развитие яичников, становление репродуктивной функции и фертильноспособность потомства.
Задачи исследования:
- изучить характер течения беременности (продолжительность и исход, состояние плодов) у экспериментальных животных , получавших с первого дня
гестации разные дозы андрогенов; оценить физиологические инстинкты самок в
послеродовом периоде;
- оценить общефизическое развитие животных первого поколения,
полученного от гиперандрогенизированных самок;
- изучить особенности морфологии яичников внутриутробно гиперандроге-
низированного разными дозами тестостерона пропионата потомства в кри
тические периоды развития гонад (14, 21 и 45 сутки постнатальной жизни);
проследить особенности становления фолликулогенеза и динамику полового цитирования внутриутробно гиперандрогенизированных животных;
оценить фертильноспособность внутриутробно гиперандрогенизированных самок крыс и зависимость ее изменений от степени андрогенизации.
Научная новизна:
- впервые прослежены и подробно описаны нарушения течения беременности в условиях гиперандрогенизации разных степеней, установлен дозозависимый характер этих нарушений; описаны изменения материнских инстинктов самок, получавших в период беременности андрогены;
- подтверждена значимость дисбаланса андрогенов в материнском
организме для общефизического развития потомства ;
- впервые получены данные об особенностях постнатального развития
яичников потомства в условиях экспериментальной внутриутробной гипер
андрогенизации разных степеней; выявлена зависимость между степенью
альтерации репродуктивной функции и уровнем внутриутробной
гиперандрогенизации;
- 4-- получены данные о последствиях внутриутробной гиперандрогенизации
на функцию репродуктивной системы в половозрелом возрасте; показано, что
изменения физиологии гонад, индуцированные данным воздействием с течением
времени не нивелируются и проявляются в ановуляторных циклах и бесплодии у
большинства животных.
Научно-практическая значимость работы.
Из данных настоящего эксперимента следует заключение о важной роли андрогенов в развитии и становлении функции женской репродуктивной системы Полученные данные дополняют теоретическую базу для разработок этиопатогенеза отдельных гинекологических и эндокринных заболеваний пубертатного и репродуктивного возраста, приводящих к бесплодию.
Результаты фрагмента исследования , посвященные течению беременности и послеродового периода у гиперандрогенизированных самок, в комплексе с имеющейся литературой по этому вопросу создают теоретические предпосылки для разработки критериев клинических прогнозов вынашивания беременности женщинами с повышенным фоном андрогенов. Результаты указывают на целесообразность организации диспансерного наблюдения за девочками , рожденными от матерей, имеющих повышенный фон андрогенов. Апробация диссертационного материала состоялась: на IV Балтийской конференции LASA, Таллин, 1994 г., на II Российском национальном конгрессе " Человек и лекарство", Москва, 1995 г., заседании кафедры гистологии и эмбриологии педиатрического факультета РГМУ, Москва, 1996 год. Объем и структура диссертации. Диссертация состоит из введения и 4 глав: обзор литературы , материал и методы исследования, собственные данные, обсуждение полученных результатов; выводов и списка литературы, который
синхронизируются первые РГ-ЛГ-пики. 40 - 45 сутки жизни - это время
наступления первой овуляции.
После наступления периода половозрелости (начиная с 45 суток) у животных производилось ежедневное исследование вагинальных мазков для анализа характера полового цитирования . Определялась продолжительность астральных циклов, длительность и чередование отдельных фаз. Часть самок первого поколения с наступлением половозрелости подсаживалась к самцам для получения потомства. У тех самок, у которых удалось получить беременность, изучалось состояние помета, его общая численность и особенности постнатального развития.
Для общегистологического анализа яичники фиксировали в жидкости Буэна, обезвоживали в батарее спиртов восходящей концентрации, заливали в парафин. Серийные срезы толщиной 5 микрон окрашивали гематоксилином-эозином. Морфологическая оценка гонад производилась с помощью морфо-метрии, включавшей дифференцированный подсчет овариальных фолликулов разных пулов согласно классификации Lintern Moore, 1967 г. Подсчет проводили по методике Pedersen a Peters, 1973 г. Во избежание ошибок и повторов при подсчете учитывались овариальные фолликулы на максимальных сечениях ооцитов, маркерами которых служили ядрышки. Для оценки активности атрети-ческого процесса, подсчитывали общее количество атретических фолликулов на каждом пятом срезе серии согласно критериям Byskov A.G.,1979 г. Фолликулы учитывались как атретические при наличии хотя бы одного из следующих признаков:
изменение формы овоцита;
эксцентричное расположение ядра овоцита;
вакуолизация ядра овоцита;
разобщение межклеточных связей в фолликулярном эпителии (для фолликулов предполостных стадий);
пикноз ядер фолликулоцитов;
разобщенность овоцитарно - соматических контактов.
Для характеристики становления и развития фолликуло-стромальных отношений был использован подсчет относительных площадей овариальных фолликулов и стромы по методу С.Б.Стефанова(1974г.)
Для изучения ультраструктурных особенностей гонад материал фиксировали в 2,5% растворе глютарового альдегида с дофиксацией в 1% растворе четырехокиси осмия. После обезвоживания яичники заливали в смесь эпона с аралдитом. На полутонких срезах определялась топография конкретных внутриовариальных структур и производилась прицельная заточка пирамид. Ультратонкие срезы овариальной ткани получали с помощью ультратома "LKB-III", контрастировали уранилацетатом и цитратом свинца по методу Reynolds (1963 г.), просматривали и фотографировали в электронном микроскопе "Jem-ЮОС".
Во всех группах проводилось исследование соматометрических параметров животных (масса тела, абсолютная и относительная масса яичников). Статистическую обработку полученных данных проводили с помощью общепринятых методов биологической статистики ( Гублер Е.В., 1978 г.)
-5-включает наименований, из них отечественных и иностранных. Объем
диссертации страниц машинописного текста. Иллюстративный материал
представлен 11 таблицами , 2 графиками и рисунками.