Введение к работе
АКТУАЛЬНОСТЬ ИССЛЕДОВАНИЯ. Лечение поднослойких К02НЫХ дефектов, вызванных различными воздействиями внесшей среды, одна из крупнейших проблем современной кедицккы. Прн nopaso-нии достаточно больпого участка когного покрова человека !?оз-никает вопрос о необходимости применения того или иного спо-соСа коїной пластики. В условиях нересенносги проблемы икму-нологической совместимости алло- и ксеногешшх трансплантатов, лишь колкий покров самого больного кохет бить источником пластического материала для закрытия рвкн. Поэтону в процессе лечения очень ваяно обеспэчить минимально^ ;па5яировонкв донорского участка.
В настоящее время из варнантоз свободнее когной шгестк::и наиболее широко применяется трансплантация рче^гпяэнкого ксп-ного лоскута, полученного с помощью рзезн^нмх деркатсмов. поскольку данный метод является одшя{ нз кз.чбогео простих и да-дпщих. Однако при его использовании донореккй участок поероз-дается все se достаточно сильно. Процесс взятия тргкепдгчтагв нуждается в обезболивании. Полное заяизгониз донорского участка наступает через 2*-4 недели, оставляя s яоелодугпем гепу гипер- или депигментации (Зодтся Я., 1S34). Перочмогекикэ пэ-достатки дерматокноЯ коїкой пластики оставеггит по—яреенвку актуальной проблему унеимїек:'.:: -отезекк здоднатнзацпя дояорс-кого участка при получении яоплих траксплаптггез.
Для экспериментальной ^еркатолег.чн такав кузка прсстшэ методы получениз различных трзкеплантатоа, включая пкето гпя-дермальные. В настоящее время дяа stkx цїлєЯ ркрожо ксяогьсу-ется механическое отделения зг.идорнттеа от гермі псеяэ гекз.тэ-ния лоскута коаи в культуральнуд ерму. седэрпацуи раэяячикэ протсолитичеекко Оорменты йлп этксеягпзкяигвтрвяцотат CSitrao Y. et al., 18Q3; Bakor К. 9. et al., 1S03; XonSlay J. at El., 1891). Однако с пскояьп этеЯ процедури крзЬ:з трудно огсгсять эпидермис у покрытия перстья SIOOTHUX. Ирокэ того, иоовозьзу для получения эпидермаяьного пласта таг.нл яугсл zv-rzv.o предварительно ерэзвть когкиЗ лоскут, денний матая кэ hoz
использован в клинике.
Весьма перспективным методом получения кохкых трансплантатов является Быравнвание их in vitro. После его первого применения в лечении огогов кояи человека в начале 80-х годов (O'Connor N. Е- et al., 1S81), данный метод интенсивно совер-иесТЕуется в настоящее время, основное его преимущество связано с возможностью получения из относительно небольшого би-оптата трансплантата такого размера, который способен закрыть всю поверхность тела обокхенного человека (Pittelkow М. Е. ct ні., 1986; Kuioagai И. et .1., 19Є6; Corny H., 1987). Однако прздлогенный ьзтод очень трудоемок, требует наличия специального оборудования и подготовленного персонала. Значительным недостатком является бсльиой промежуток времени, проходяний с момента пеятие биоптата до трансплантации. Все .это существенно ограничивает возкоанссти широкого распространения упомянутого метода (Туманов В. П. и др. 1986, 1989).
Б связи с этим, по-прегнеиу сохраняет актуальность проблема разработки новых, минимально травматичных методов получения ко2ных трансплантатов и изучения кх свойств. Уменьшению остроты данной проблемы мохет способствовать использование отрицательного давления для получения когиых трансплантатов. Первые сообщения о возможности образования пузырей на nose здорового человеке под воздействием неполного вакуума появились в 60-х годах (Slosey S. сі. al., 19Б1; Kiistala V. et ai., 1964), первые работы, в которых бы использовались их крызк в качестве трансплантата - значительно псзеє (Falabel-lc R., 1971, 1984; Koga 1!., 1S3S). Однако с морфологической точки зрении такие трансплантаты не изучались. Остается много не выясненного тагсге е вопросе о морфо-функционадьном состояния вакуумно отделенного эпидермиса, оставленного в различных условиях на донорском участке.
Б связи со веек, указанким выие, возникла необходимость на основа предварительно разработанных методик вакуумной отслойки и трансплантации эпидермиса чєловзка и крыс изучить изменения его морфо-функциснального состояния в различных условиях после данных процедур. Последнее имеет существенное значение для экспериментальной и-клинической практики.
ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ: оценить морфо-функциональиоо состояние эпидермиса после вакуумное отслойки и воэмогнссть использования его в качестве трансплантата.
В соответстзии с целью были поставщик сяедужїия задачи:
-
Изучить динамику изменения структура компоненто:; кояяо-за-куумних пузырей крыс.
-
Охарактеризовать процесса, происходящие в отслоенной эпидермисе крыс, помеченном после вакуумной отслойки на прегнее место.
-
Изучить изменение морфо-функционального состояния вакуун-ноотдеяэнного эпидермиса человека в состава крыз ксано-ааку-умных пузырей.
-
Охарактеризовать развитие закууїіноотсяоанного зпидерні'.са крыс, аутотрансплангироеанного непосредственно поело отслойки на поверхность подкохной клетчатка.
-
Охарактеризовать особенности разелгля- -пидэрииса-.че.возоха посла хсенотрансплантацкя^на поверхность гголнослойного kosho-го дефекта.
НАУЧНАЯ НОВИЗНА. Впервые современными количественными методами изучено изменения основних структурних компонеятоз когно-вакуумных пузырей крыс. Показано, что скорость гибели эпидермиса в составе крыта пузырей зависит от лейкоцитарного состава пузырной жидкости,
В эксперименте на животных продемонстрирована особенности развития вакуумноотслоенного эпидерииса на поверхности ин-тактной дермы с сохраненной базальноЯ мембраной и на поверхности клетчатки. Показано, что отслоенный эпидермис, размеченный на поверхности дерни, быстро приобретает черты интакт-ного эпидермиса, тогда кая на клетчатке, поверхностныо слои которой перестраиваются в грануляционную ткань, длитольнсе время остается в состояния гиперплазии.
Впервые изучено изменение мэрфз-функдионазьного состояния вакуунноотдэленного эпидермиса человека о состава крыл кояно-вакуумных пузырей. Показано, что после отсяойкд и сопутствовавшей этому частичной травматизацки, регенерация эпи-
' . - 4 -
деркиса в состава крыш образовавшихся пузырей и развитие признаков дифферевцировки осуиествлнется без пролиферации.
Дана исрфо-Функционаяьная гаракторксткка ранних стадий развития эпидермотранспдантата человека, получанного в результате вакуумной отслойки.
3 результата проведанного исследования расширены представления о клеточных основах реакций эпидермиса в ответ на травмирующие влияния и различные условия развития.
На примере крыс показано, что судьба вакуумноотслоекного эпидермиса зависит от того, в каких, условиях он окажется в последующая: в отслоенной зпидзрмисэ, равноценном на своем пргзнеи мзете, практически есе кератнпоциты сохраняют кизне-способность к быстро признв&этея; в эпидермисе, перенесенном на поверхность стерильной клетчатка, некоторая часть из них погибает, больЕаа so часть развивается, а сам зпидермотранс-пдантат длительное греыя остается в состоянии, гиперплазии; в зпядеряиса, оставленной в приподкптси состоянии, кератиноцл-та -базального слол погибаат в течение 1-2 суток. Это яодтвер-гдаэт господствующее в настоянеє время представление о том, что в целом структурная реакция эпидермиса опредедяотса основой, на которой происходит его развитее.
Кератикоцита эпкдерииса человека, оказавзшеь в состава крызш пузир::, рагеиери.руат, перестраиваются и дифференцируются, но не делятся. Лиаь через 3 суток некоторая часть клеток Начинает погибать, остальные к на этот срок сохраняют гтризна-. кп хизнаспссобностн. Это подтеерздазг представление о структурно-функциональной разнородности каратнноцктов в пределах росткового сдоя зпкдармлса человека.
Похазакн черты сходства и различия в развитии вакуумно-отслосгиюго ц трансплантированного эпидермиса человека и крыс. Лерзка из кит связана с началом пролафератигныг процессов после размещения эпидермиса на поверхности рецептивного .гола, вторые - с различной интенсивностью процессов пролиферации и разной скоростьо развития деструктивных процоссов в
- 5 -составе крыш кохно-вакуумных пузырей.
Полученные данные показывают, что предварительно разработанные модели отслойки и трансплантации эпидермиса у экспериментальных хивотных позволяют проводить широкие исследования по изучению его хорфо-функционаяьных свойств.
Экспериментально подтверхдена возмохность использования вакуумноотслоенкого эпидермиса человека в качестве полноценное кохного трансплантата.
АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ. Иатериаяы диссертация долозены и об-сухдены на:
-Гродненских областных конференциях молодых ученых к специалистов, Гродно, 1930, 1891, 1093г.
-2-м съезде анатомов, гистологов и гмбрноясгов Беларуси, Минск, 1991г.
-Гродненском областном обществе анатомов, гистологов я эмбриологов, Гродно, 1993г.
Работа была рассмотрена и обсуядена в научно-исследовательском институте морфология человека РАИН.
По теме диссертации опубликоваяо-в работ. Инееез автере-жое свидетельево на изобретение.
СТРУКТУРА "Я ОБъЕМ РАБОТЫ. Диссертация состоят нэ ввеле-кяз, обзора литературы, описания материала и методов, кзяохе-ния результатов исследований, их обсуждения, вуводоэ п списка литературы. Материал излохен на 110 страницах кавтгописпого текста. Работа содерхит 22 таблицы, иллюстрирована 4 графиками, 49 электронно-микроскопическими и евгтооптичесхимя микрофотографиями. Список цитированной литература вялвчает 231 наименований, из них 199 иностранных авторов.
- Є -