Содержание к диссертации
Введение
ГЛАВА 1. Ареал и общая биологическая характеристика рода origanum ь. (обзор литературы) 11
1.1. Систематика и распространение представителей рода Origanum... 11
1.2. Морфологические и анатомические особенности представителей рода Origanum 14
1.3. Использование душицы в хозяйственной деятельности человека ... 20
1.4. Изменчивость массовой доли и компонентного состава эфирного масла представителей рода Origanum 29
1.5. Современные направления изучения душицы 33
ГЛАВА 2. Объекты, методика и природные условия места проведения исследований 36
2.1. Объекты исследований 36
2.2. Методика исследований 38
2.3. Почвенно-климатическая характеристика места исследований 45
ГЛАВА 3. Морфологические и биологические особенности коллекционных образцов о. vulgare в условиях предгорного Крыма 56
3.1. Морфологические особенности побега 57
3.2. Морфологические особенности генеративных органов 66
3.3. Особенности окраски растений 80
3.4. Характеристика железистого аппарата О. vulgare 88
3.5. Фенология растений коллекционных образцов душицы обыкновенной 95
3.6. Болезни и вредители О. vulgare в Предгорной зоне Крыма 103
ГЛАВА 4. Параметры продуктивности коллекционных образцово. vulgare 109
4.1. Исследование накопления эфирного масла в растениях О. vulgare... 109
4.1.1. Динамика накопления эфирного масла в различные фазы развития растений 109
4.1.2. Изучение массовой доли эфирного масла O.vulgare в фазу массового цветения 112
4.1.3. Локализация эфирного масла в органах растений 115
4.1.4. Компонентный состав эфирного масла О. vulgare 118
4.2. Сырьевая продуктивность 120
4.3.Сбор эфирного масла с единицы площади 124
ГЛАВА 5. Исследование способов размножения образцово. vulgare 128
5.1. Семенное размножение 128
5.1.1. Всхожесть семян 129
5.1.2. Расщепление признаков в семенном потомстве 131
5.2. Вегетативное размножение душицы 133
5.2.1. Получение посадочного материала 134
5.2.2. Приживаемость и продуктивность растений О. vulgare в зависимости от способа получения посадочного материала 138
Глава 6. Массовая доля и компонентный состав эфирного масла крымских дикорастущих щнопопуляций О. VULGARE 144
ГЛАВА 7. Изучение новых гибридных форм о. vulgare 150
7.1. Морфологические особенности и хозяйственно-ценные признаки гибридов 152
7.2. Характеристика перспективных гибридных форм 164
Заключение 167
Практические рекомендации 169
Список условных обозначений 170
Список использованной литературы 171
- Использование душицы в хозяйственной деятельности человека
- Почвенно-климатическая характеристика места исследований
- Особенности окраски растений
- Локализация эфирного масла в органах растений
Использование душицы в хозяйственной деятельности человека
Душица обыкновенная {О. vulgare) (2n = 30, 32 [190]) - является полиморфным видом [99, 197] и представляет собой многолетнее травянистое поликарпическое растение, подземная часть которого представлена ветвистым шнуровидным косым ползучим корневищем с длинными тонкими придаточными корнями, расположенным в поверхностном слое почвы [106, ПО, 172]. Растение шершаво опушенное или почти голое; прямостоячие стебли монокарпического моноциклического безрозеткового длиннокорневищного акронекрозного травянистого типа [14], 20-60 (90) см высотой, четырёхгранные, часто при основании разветвленные, иногда пурпурно окрашенные и мягкоопушенные [119, 155,236].
Расположение листьев на главном стебле супротивное. Листья черешковые. Длина черешка в средней части побега составляет примерно 0,4 см, в нижней -достигает 1 см [16]. Листья яйцевидные, продолговатые или продолговато-яйцевидные, острые или тупые, 1-5 см длиной, 1-3 см шириной, мелкозубчатые, с расставленными зубчиками или цельнокрайние, сверху зелёные или тёмно-зелёные, снизу светло- или серовато-зеленые, со скудными железками, преимущественно с нижней стороны, сверху почти без железок [40,90,110,130].
Прицветники длиннее чашечки, яйцевидно-эллиптические или продолговатые, острые, обычно темнопурпурные, как и чашечка, и многие верхние листья, реже зеленые [24,44,91].
Чашечка колокольчиковидная, около 3 мм длины, с 13 жилками и пятью почти одинаковыми треугольно-ланцетными зубцами, в 2 - 2,5 раза короче трубки, голая или с редкими волосками, с волосистым кольцом в зеве, почти равным зубцам, зелёного или пурпурного цвета [8, 87,135,172,270].
Цветки мелкие, многочисленные на коротких цветоножках в пазухах прицветников, собраны в округлые, продолговатые, продолговато-овальные или продолговато-ланцетные колоски, удлиняющиеся при плодах, образующие на концах ветвей раскидистые многоцветковые щитковидно-метельчатые соцветия до 10 см шириной и до 15 см длиной [82, 113, 119, 136]. Венчик окрашен в пурпуровый, светло-пурпуровый или лилово-розовый, иногда белый цвет, с выдающейся из чашечки трубкой [106, 172, 176, 270]. Тычинок четыре, у обоеполых цветков они фертильные (пыльцевые зёрна округлые или эллиптической формы, трёхклеточные, состоящие из «сифоногенной» (вегетативной) клетки и двух спермиев) [109]. Плод образован четырьмя сухими, округлыми или яйцевидными, голыми, коричневыми или коричнево-чёрными орешками, зрелые от 0,5 до 1 мм длиной, тупо трехгранные [104, 146, 176]. Масса 1000 семян по данным различных источников варьирует в пределах 0,05-0,20 г [32,45,157].
Из литературных источников известно, что душица обыкновенная имеет типичное для яснотковых анатомическое строение, однако подробное описание анатомического строения органов душицы обыкновенной в доступной нам литературе было встречено только в Государственной фармакопее СССР и ГОСТе на «Траву душицы» (описание строения эпидермиса листа), а также в работах А. Г. Анисимовой, Е. И. Демьяновой, изучавших анатомическое строение листа, стебля, венчика и чашечки растений душицы обыкновенной, произрастающих в естественных популяциях Пермского края, и Э. Г. Бирюлёвой, В. М. Усеиновой, исследовавших анатомическое строение листа и стебля душиц, вводимых в культуру в Предгорной зоне Крыма, а также в работе Т. И. Орёл, В. Д. Работягова, Л. А. Хлыпенко, изучавших морфо-анатомические характеристики растений Origanum, плотность размещения эфиромасличных желёзок на нижней поверхности листовой пластинки, их диаметр [6, 17, 36, 40, 137]. Исходя из этих данных строение вегетативных и генеративных органов у О. vulgare характеризуется следующими особенностями.
Стебель имеет типичное для всех видов Lamiaceae строение. На поперечном сечении он четырёхгранный, а при продвижении к основанию становится более или менее округлым [6]. Эпидерма стебля имеет типичное строение и состоит из одинаковых клеток с простыми одноклеточными и многоклеточными железистыми трихомами. Редко встречаются желёзки. На поперечном срезе стебля чётко выделяется первичная кора, проводящие ткани и сердцевина. Первичная кора состоит из хлоренхимы и уголковой колленхимы, хорошо развитой в области рёбер [17]. В рёбрах стебля находятся открытые коллатеральные проводящие пучки. В нижней части стебля ксилема в проводящих пучках сильно разрастается, при этом пучковое строение постепенно переходит в непучковое [6]. Эндодерма представлена крахмалоносным влагалищем. Сердцевина имеет выраженную перимедулярную зону [17]. В строении стебля обоеполые и женские особи практически не различаются за исключением несколько большей толщины флоэмы у женских особей и ксилемы у обоеполых особей [6].
Лист типичный дорзовентральный. На верхней эпидерме есть кутикула. Палисада представлена двумя слоями цилиндрических клеток, рыхлая ткань состоит из клеток разной формы, между которыми хорошо развиты межклетники. Главная жилка представляет собой закрытый коллатеральный пучок, который сверху и снизу армирован мощной уголковой колленхимой [17].
Листья у душицы обыкновенной амфистоматические, т. е. устьица располагаются на верхней и нижней эпидерме. Клетки верхнего эпидермиса со слабо извилистыми стенками. Количество устьиц небольшое (15-20 штук/мм ). У функционально женских растений листья более опушённые, количество простых трихомов, железистых волосков и эфиромасличных желёзок почти в 2 раза больше на единицу поверхности, чем у обоеполых форм. С нижней стороны листа клетки эпидермиса извилисты в очертании и крупнее у обоеполых особей. Количество устьиц здесь значительно выше, чем на верхней эпидерме, причём у женских форм оно больше, чем у обоеполых. Устьица диацитного типа, окружённые, как правило, двумя (редко тремя-четырьмя) эпидермальными клетками, расположенными перпендикулярно к устьичной щели. Волоски двух типов: простые и головчатые. Простые волоски крупные, грубобородавчатые, 1-5 клеточные. Железистые волоски на одноклеточной ножке с овальной одноклеточной головкой, располагаются в основном на жилках. Эфиромасличные желёзки на одноклеточной ножке с 8-клеточными головками, располагаются на листовой пластинке между жилками; в месте прикрепления желёзки клетки эпидермиса нередко образуют розетку. Количество волосков и желёзок на единицу площади нижней эпидермы листа одинаковое у обеих половых форм [6, 17,36,40].
Почвенно-климатическая характеристика места исследований
Анализ доминирующих компонентов эфирных масел исследуемых образцов проводили методом газо-жидкостной хроматографии [112] на хроматографе ЛХМ 80М с пламенно-ионизационным детектором с использованием набивных колонок из нержавеющей стали длиной 3 м, диаметром 3 мм, в режиме программирования температуры от 70 С до 170 С со скоростью 4 в минуту. Температура испарителя 200 С, температура ПИД - 220 С. Неподвижная жидкостная фаза Carbowax 20М, нанесенная в количестве 5 % на инертный носитель Chromaton N-AW-DMCS (0,12-0,16 мм). Газ-носитель - азот (ОСЧ), объем пробы 0,1 мкл. Время анализа - 40 мин. Идентификацию основных компонентов осуществляли путем внесения в анализируемый образец чистых веществ (метчиков) - коммерческих препаратов фирмы «Fluka» (Швейцария) и расчета времени удерживания.
С целью более подробной идентификации компонентов наиболее ценных эфирных масел хроматографический анализ этих масел также выполняли в Национальном институте вина и виноградарства НААН Украины "Магарач" на газо-жидкостном хроматографе Agilent Technology 6890N с масс-спектрометрическим детектором 5973N. Условия анализа: хроматографическая колонка кварцевая капиллярная DB-35MS вн. диам. 0,25 мм и длиной 25 метров; температура испарителя - 220 С; газ-носитель - гелий; скорость газа-носителя 1,2 мл/мин; ввод пробы делением потока 1/50; температура термостата программируется от 50 С до 220 С со скоростью 4 /мин; температура детектора испарителя 250 С. Компоненты эфирных масел идентифицированы по результатам сопоставления полученных масс-спектров химических веществ, входящих в исследуемые образцы, с данными библиотеки масс-спектров Wiley 2007 и NIST05 (общее количество спектров 500000).
Статистическая обработка данных была проведена с использованием стандартного пакета документов программы Microsoft Office Excel 2003. Количественные данные, полученные в ходе исследований, были обработаны с использованием общепринятых методов математической статистики [60, 102, 141]. Для всех количественных показателей вычисляли среднее арифметическое и его ошибку. Для всех образцов по большинству изучаемых количественных признаков просчитан относительный показатель изменчивости - коэффициент вариации (Су). При этом изменчивость считалась незначительной, если коэффициент вариации не превышал 10 %, средней при коэффициенте вариации 10 20 %, значительной при коэффициенте вариации более 20 %.
Достоверность разницы средних показателей устанавливали с помощью критерия Стьюдента (порог вероятности р=0,95 (Р 0,05)) [141].
Метод корреляционного анализа использовали для изучения взаимозависимости формирования морфологических признаков, окраски растений душицы, а также плотности железистых структур и массовой доли эфирного масла [88, 217]. Параметрический коэффициент корреляции Пирсона просчитывали для оценки степени сопряженности между парами варьирующих признаков, таких как окраска венчика, листа, стебля и прицветников, а также плотность железистых структур на единицу площади и массовая доля эфирного масла. Следует указать, что коэффициенты корреляции согласно общепринятой методике нами были сгруппированы следующим образом: 1) со значением от 0,31 до 0,50 - группа коэффициентов корреляции, обозначающих умеренную степень тесноты связи между признаками; 2) от 0,51 до 0,70 - группа коэффициентов корреляции средней степени тесноты связи между признаками; 3) от 0,71 до 1,00 -группа коэффициентов корреляции, обозначающих высокую степень тесноты связи между признаками.
Условия окружающей среды оказывают постоянное воздействие на рост и развитие растений. Степень их влияния на растение в значительной мере определяет урожайность выращиваемых культур. Интенсивность роста и развития растений зависит не от отдельных факторов, а от их суммарного воздействия на организм. Н. И. Вавилов [22] отмечал глубокую взаимосвязь между растениями и внешней средой. В комплексе факторов, которые постоянно воздействуют на растение, почва и климат являются одними из самых важных. Крым характеризуется высоким напряжением тепла и света и дефицитом атмосферной и почвенной влаги. В среднем здесь наблюдаются 2469 часов солнечного сияния и 29 дней без солнца. Минимальная освещённость отмечается в декабре, что вызвано как наименьшей длиной дня, так и наибольшей облачностью [3].
Район исследований относится к одному из пяти агроклиматических районов - верхнему предгорному, теплому, недостаточно влажному, к северному подрайону с умеренно мягкой зимой. Климат данной территории умеренно-континентальный [3, 85,154].
По данным Л. П. Савчук, более шести месяцев в году наблюдается положительная среднемесячная температура воздуха, которая составляет +10 С. Температура самого холодного месяца, января, составляет -0,8 С, а самого теплого - июля + 21 С. В III декаде июля - I декаде августа на глубине 5 см
Продолжительность теплого периода с положительной средней суточной температурой воздуха составляет 292 дня, холодный период, может длиться более трех месяцев [153, 154]. Продолжительность безморозного периода в воздухе составляет 194 дня, на поверхности почвы - 167 дней [154].
Крым относится к числу засушливых зон. Несмотря на то, что Крымский полуостров почти со всех сторон окружен морем, гидротермический коэффициент составляет здесь всего 0,5-0,7, а годовое количество осадков преимущественно 350-550 мм. Засушливость определяется не только малым количеством осадков, но и сухостью воздуха. С июля по сентябрь включительно средняя относительная влажность воздуха в 13 часов составляет около 40 15 % [3].
Водные запасы почвы пополняются за счёт атмосферных осадков в основном поздней осенью, зимой и ранней весной. За год насчитывается всего 147 дней с жидкими и твердыми осадками [153]. К концу зимы влага проникает на глубину 70-100 см, в отдельные годы до 200 см, что вызывает обильную естественную влагозарядку корнеобитаемого слоя. В летний период дожди малоэффективны. Выпадая в виде ливней на иссушенную почву, они дают большой сток, не успевая впитываться. К июлю, как правило, происходит интенсивное иссушение корнеобитаемого слоя почвы на глубину 200 см и более. В последующем до осени существенного накопления влаги не происходит [143].
Особенности окраски растений
По ширине чашечки все коллекционные образцы разделяются на 2 группы -с узкой (менее 1,1 мм) и широкой (1,1 мм и более) чашечкой. Большая часть изучаемых образцов (56,8 %) была отнесена к группе с узкой чашечкой.
Исходя из различий в длине и ширине чашечки, наиболее распространенными были растения с короткой и узкой (35,1 %), средней по длине и широкой по ширине (27,1 %) и средней по длине и узкой по ширине (18,9 %) чашечкой. Реже всего в коллекции встречаются растения с короткой и широкой, длинной и широкой, длинной и узкой чашечкой (таблица 3.6).
Таким образом, изучаемые образцы О. vulgare в условиях Предгорной зоны Крыма характеризуются различными размерами цветков и прицветников. В большинстве случаев цветки являются более стабильными по размерным параметрам, чем соцветия. Таблица 3.6 - Размерные параметры чашечки образцов О. vulgare (2008-2009 гг.)
В 2007-2008 годах коллекционные растения были проанализированы по состоянию генеративной сферы, и было установлено, что у всех образцов душицы завязывались семена от свободного опыления. Однако способными к принудительному самоопылению под изолятором оказались лишь некоторые образцы. Так, в 2007-2008 годах в большом количестве семена завязались только у четырёх образцов О. vulgare (№№ 1, 5, 64, 89). Единично завязались семена у 12 образцов, и у 21 образца не сформировалось ни одного семени (приложение 1).
Установлено, что среди изучаемых образцов душицы обыкновенной встречаются растения как с фертильными, так и со стерильными по мужской линии (функционально женскими) цветками. Образцы, цветки которых имеют фертильные тычинки, составили 56,8 % (21 образец) в 2007 году и 51,4 % (19 образцов) в 2008 году (таблица 3.7, приложение 1). В таких цветках тычинки хорошо развиты, окраска пыльников варьирует от бледно- до ярко-малинового цвета, пыльца 3-х клеточная (рисунок 3.11, рисунок 3.12). Однако, по сравнению с данными 2007 года, в 2008 году у двух образцов (№10 и №11) наблюдалось появление на одном и том же растении наряду с цветками с фертильными пыльниками также цветков с недоразвитыми пыльниками, окрашенными в коричневый цвет со стерильной пыльцой (рисунок 3.11, рисунок 3.12).
На стерильных по мужской линии растениях (13 образцов) были обнаружены два варианта цветков: а) цветки с коричневыми (от светло- до тёмно-коричневого цвета) пыльниками, которые находятся на длинных или укороченных тычиночных нитях (пыльца практически не выдавливается); б) цветки с редуцированными видоизмененными лепетковидными тычинками - стаминодиями (рисунок 3.11). Таблица 3.7 - Мужская фертильность исследуемых образцов О. vulgarе
Годпроведенияисследований Количество образцов Цветки на одном растении фертиль-ные стерильные фертильные и стерильные снедоразвитымипыльниками со стаминодиями 2007 шт. 21 12 1 % 56,8 32,4 2,7 8,1 2008 шт. 19 13 0 % 51,4 35,1 0 13,5
В ходе исследований в 2007 году обнаружен один образец (№8) со стаминодиями, при этом пыльники вообще не формировались. В более мягких климатических условиях 2008 года по сравнению с экстремальными условиями 2007 года (очень жаркий и засушливый с недостатком влаги: максимальная температура в июне-июле достигала 38,6С, количество осадков - около 40 % от нормы) у этого образца пыльники сформировались, но они по-прежнему оставались стерильными.
Также нами было выявлено 3 гиномонэцичных образца (№№ 2, 17, 25), у которых на одном растении в течение двух лет исследований формировались цветки и с фертильными, и со стерильными тычинками (таблица 3.7, приложение
Полученные данные частично согласуются с литературными источниками, где указывается, что для душицы обыкновенной характерна женская дву- и однодомность (гинодиэция и гиномонэция). При этом у функционально женских цветков тычинки практически редуцированы (длина тычиночной нити почти в 10 раз меньше, чем у обоеполых цветков, а пыльники недоразвиты, бесплодны и заметны в виде небольших зачатков) [6, 8, 24, 87, 176, 180]. Однако в литературе не было известно об образовании стаминодиев (видоизменённых лепестковидных тычинок с редуцированными пыльниками) у представителей рода Origanum.
При характеристике видов, форм и сортов растений значительное внимание уделяется особенностям окраски растений. При исследовании коллекции душицы обыкновенной в течение трёх вегетационных периодов (2007-2009 гг.) отмечена широкая изменчивость окраски листа, стебля, цветка и прицветников.
По окраске листовой пластинки все исследуемые образцы были разделены на четыре группы: 15 образцов с зеленой листовой пластинкой (Yellow-green group, 147 В), 4 образца с желто-зеленой листовой пластинкой (Yellow-green group, 146 В), 12 образцов - с сизо-зеленой (Greyed-green group, 191 А) и 6 образцов с темно-зеленой окраской (Yellow-green group, 147 А) (рисунок 3.13, таблица 3.8).
Образцы душицы существенно различались и по окраске венчика. Распределение образцов по группам в зависимости от окраски следующее: 13 образцов с белым венчиком, 7 образцов со светло-розовым (Red group, 56 D), у 8 образцов светло-сиреневый (Red group, 56 А) и 9 образцов с сиреневым (Red-purple group, 65 А) венчиком (рисунок 3.14, таблица 3.8).Среди образцов с окрашенным венчиком чаще всего встречались растения с зелёной листовой пластинкой (15 образцов), по 3 образца имели сизо-зелёную, либо жёлто-зелёную, либо тёмно-зелёную окраску листа (таблица 3.9). Наиболее обширными являются группы образцов со светло-сиреневой (7 образцов) и сиреневой (5 образцов) окраской венчика и зелёной окраской листовой пластинки.
Среди белоцветковых образцов наиболее распространена сизо-зелёная окраска листа (9 образцов), для 3 образцов характерна тёмно-зелёная окраска листовой пластинки, жёлто-зелёная окраска листа встречается только у одного образца (таблица 3.9). Среди образцов с белой окраской венчика не встречаются растения с зелёной окраской листовой пластинки. В этой группе доминирует сизо-зелёная окраска листа (69,2 % образцов). В тоже время сизо-зелёная окраска листовой пластинки не наблюдается у растений со светло-сиреневой окраской венчика. Среди образцов с наиболее тёмной окраской венчика (Red-purple group, 65А) не встречаются растения с жёлто-зелёной окраской листовой пластинки. А тёмно-зелёная окраска листа характерна только для образцов с белой и сиреневой окраской венчика (таблица 3.9).
Характерной особенностью растений душицы является различное по интенсивности (слабое, среднее, сильное) антоциановое окрашивание некоторых органов растения, которое имеет большое значение при таксономическом определении и идентификации сортов [183].
Локализация эфирного масла в органах растений
Такие расхождения с имеющимися в литературе сведениями, повидимому, связаны с тем, что в районе исследований 3. Н. Дорошевой (Лесостепное Предуралье Башкортостана) семена душицы не успевают вызреть в отличие от благоприятных условий Предгорной зоны Крыма, где растения душицы успевают пройти полный цикл развития и сформировать полноценные вызревшие семена.
В большинстве случаев максимальная всхожесть (67-78 %) наблюдалась через месяц после сбора семян. Затем она несколько снижается и снова возрастает до 54-70 % через год после уборки. Далее всхожесть исследованных образцов падает и к концу третьего года хранения семян составляет 2-5 %.
Таким образом, наибольшая лабораторная всхожесть семян душицы обыкновенной наблюдается через месяц после уборки семян. Семена образцов №№ 64 и 79 сохранили высокую всхожесть через 6 и 12 месяцев после уборки, что удовлетворяет требованиям Национального стандарта Украины [127].
Расщепление признаков в семенном потомстве. Важный фактор, который необходимо учитывать при создании сортов душицы - это расщепление признаков при семенном размножениее ценных образцов. Также оно представляет большой интерес при поиске высокопродуктивных форм в селекции. По результатам исследований коллекции О. vulgare нами были отобраны 4 образца, наиболее перспективные по массовой доле эфирного масла и урожаю зелёной массы. Весной 2008 года были полученны сеянцы - семенное потомство этих образцов от свободного опыления. В потомстве во всех образцах произошло расщепление по признаку «окраска венчика» (таблица 5.3).
На второй год развития растений исследовали урожайность зелёной массы с растения и массовую долю эфирного масла. Выделено 3 высокоурожайных образца с массой растения более 500 г (таблица 5.4). Причём, в образце №т8 восемь растений имели массу куста, превышающую материнское растение второго года вегетации (485-530 г/растение), в образце №т10 - девять растений (290-550 г/растение). В образцах №т73 и №т78 не наблюдалось растений, масса куста которых превысила бы массу материнского растения. Средняя масса полученных сеянцев второго года вегетации была ниже массы родительских форм второго года вегетации на 5,8 17,7 %.
По массовой доле эфирного масла в потомстве исследованных образцов выделены растения, превышающие родительскую форму. Семенное потомство образца №73 в 83 % случаев превысило по массовой доле эфирного масла и в 8 % случаев осталось таким же, как у родительской формы. В образце №т8 только 37,5 % семенного потомства превысило по данному параметру материнское растение, остальные растения характеризовались следовым количеством эфирного масла. В потомстве образца №т78 только у 3 растений (18 %) массовая доля эфирного масла была выше материнской, у 5 растений (29 %) она была равной исходной (родительской), а у 9 особей (53 %) были обнаружены только следы эфирного масла. В образце №т10 только у одного растения (4,5 % образцов) был превышен уровень материнского растения по массовой доле эфирного масла. Все остальные растения имели или такое же (4,5 % образцов), или меньшее (50 % образцов) количество эфирного масла, или его следы (41 % особей).
Только у образцов №т73 средняя массовая доля эфирного масла превысила показатели материнской особи (следовое количество эфирного масла) и составила 0,07 % от абсолютно сухой массы. У образцов №№ т8, тЮ и т78 она была в 2,1-4,4 раза ниже, чем у материнской формы (таблица 5.4).
Таким образом, чем выше массовая доля эфирного масла у исходного материнского растения, тем ниже (4,5-18 %) вероятность появления более высокомасличных особей в семенном потомстве, полученном от свободного опыления (таблица 5.4).
В результате проведенных исследований показано, что в условиях Предгорной зоны Крыма душица обыкновенная хорошо размножается семенами. При размножении ценных коллекционных образцов О. vulgare (№№ тЮ, т78) семенами от свободного опыления существенно понижаются массовая доля эфирного масла (в 2,1 1,4 раза) и урожайность зелёной массы (на 5,8 14,3 %).
Поскольку семена душицы очень мелкие и при этом в ряде случаев имеют довольно низкую всхожесть, а семенное возобновление приводит к высокому расщеплению в потомстве с понижением хозяйственно ценных признаков образцов, что противоречит требованиям, относящимся к сорту, была поставлена задача исследовать возможность вегетативного размножения ценного селекционного материала для дальнейшего ускоренного создания промышленных насаждений. Были изучены два способа вегетативного размножения: деление куста и зелёное черенкование в условиях мелкодисперсного увлажнения.
Получение посадочного материала. Согласно литературным данным, основной путь размножения душицы обыкновенной - деление куста [82, 99, 113, 142]. В то же время, в ИСХ Крыма был разработан способ зелёного черенкования для ряда эфиромасличных культур [140, 147, 162, 194]. Поэтому мы исследовали возможность ускоренного размножения ценных образцов О. vulgare черенкованием в условиях мелкодисперсного увлажнения, который отличается высоким коэффициентом размножения.
Черенкование коллекционных образцов О. vulgare №№ 7, 8, 34, 78 проводили в I декаде июня. Повторность опыта трехкратная. В каждой повторности брали по 30 черенков. В качестве стимуляторов корнеобразования использовали препараты «Корневин» и «Чаркор». Контрольные черенки выдерживали в дистиллированной воде. Выборку и сортировку полученных саженцев проводили во II декаде июля перед высадкой их в перешколку. Стандарт на саженцы душицы к настоящему времени еще не разработан, поэтому при оценке саженцев душицы мы ориентировались на следующие государственные стандарты: ГОСТ 3579-98 - стандарт на саженцы лаванды узколистной и ГОСТ 26869-86 - стандарт на саженцы декоративных кустарников [37, 38]. Наиболее часто при оценке саженцев используются такие параметры как высота надземной части и длина корневой системы. Однако в связи с тем, что образцы душицы обыкновенной, а, следовательно, и их укоренённые черенки, довольно сильно различаются по морфологическим признакам, выделение классов по длине надземной и подземной частей не целесообразно (на рисунке 4.10 показано отличие по степени развития надземной и подземной частей саженцев двух образцов). Для определения качества саженцев душицы оценивалась степень развития надземной и подземной частей саженцев по 4-х бальной шкале, где: 1 балл - растения с единичными корнями или без них; 2 балла - растения