Введение к работе
Актуальность теми. Задача эффективного использования наиболее ценных в генетическом плане особей для совершенствования генетически обусловленных продуктивно-биологических качеотв отдельных популяций сельскохозяйственных животных всегда была актуальна, и она привлекала пристальное внимание исследователей, а также практических работников занятых в животноводстве. При этом возникает одинаковая необходимость интенсивного использования генетически ценных особей обоего пола, как самцов, так и самок.
Эту проблему можно в определенной отепени решить путем использования метода трансплантации эмбрионов. Эта методика болев широко используется для получения высокопродуктивных животных в молочном скотоводстве (Эрнст и др., 1989), в овцеводстве и козоводстве (Мухамедгалиев и др., 1981; Тойшибеков, 1986; Ка-сымов, Аузбаев, Утеоинов, IS80; Егяазарян, 1991).
В плане изложенного выше, имеет как научную актуальность, так и прикладную значимость разработка метода трансплантации эмбрионов в козоводстве. Тем более она необходима в виду того , что в пределах стран СНГ, данная проблема до сих пор не отави-' лаеь для изучения, а козоводство как важная отрасль животноводства, дающее ценное сырье занимает довольно значимое место в сельскохозяйственном производстве Республики.
Цель и задачи исследований. Целью работы является ивуче-кие влияния различных доз и типов гонадотропних гормонов для получения максимального количества полноценных эмбрионов, изу -чение характера развития козлят - траноплантантов и особенности' формирования их хозяйственно-полезных признаков.'
В задачу исследований входило установление вариабельности
дпительнооти полового цикла коз и на основе этих данных определить оптимальные сроки гормональной индукции суперовуляции, определить влияние различных доз фолликулостимудирущего гормона на уровень овуляций и количества эмбрионов у коз советской шер-отной породы различных возрастов, а также изучить характер роо-та, развития и продуктивности козлят-трансплантантов.
Научная новизна. Впервые разработаны методы гормональной регуляции уровня овуляции у коз. Установлено, что разработанные методы суперовуляции с последующей трансплантацией эмбрионов позволяют получить за один астральный сезон от 1,5 -летней козоматки 6-9 эмбрионов (или 2-4 козлят-трансплантантов) , а от взрослой (4-летней) козсматки - 12-14 эмбрионов (5-7 козлят-трансплантантов); впервые достигнута у коз относительно высокая приживляемость (50-53Я трансплантированных эмбрионов. Установлено, что после извлечения эмбрионов козоматки сохра -кяют потенции дальнейшего воспроизводства.
Практическая ценность и тзеалиаапия результатов иооледо -ваний. Разработанная нами методика по ускоренному размножению коз путем стимуляции суперовуляции и трансплантации эмбрионов коз при широком практическом применении резко повышает значение самок коз в селекционно-племенной работе в козоводстве.
В результате исследований в течение одного года от 10 козоматок-докоров получено 43 козлят-трансплантантов. Таким образом, от каждой козоматки за один экстральнкй сезон (осень .) получено 4,3 козлят, что невозможно при традиционных методах разведения.
Осноькве положения, выносимые на защиту.
I. Результата разработанной вами схемы гормональной индукции полиовуляции и пересадки эмбрионов с целью получения до
_ з -
5-6 генетически ценных козлят-трансплантантов от одной козома-тки-донора в один экстральный сезон.
2. Установление видовой особенности экструоа коз, заключающаяся в большой вариабельности во времени проявления- их половой отклики, что требует индивидуального подхода к каждой особи для установления оптимальных сроков гормональной обработки доноров эмбрионов и подбору к ним реципиентам.
Апробация работы. Материалы диссертации доложены и одобрены на методичеоком Совете Института экспериментальной биологии Национальной Академии Наук Республики Каэахотан (1994г.), научных отчетах 1990, 1991 гг. и опубликованы в трех печатных работах.
Объем тэаботи. Диосертация изложена на страницах машинописного текста, иллюстрирована 18 таблицами и 6 рисунками. Основные разделы работы: введение, обзор литературы, методика, результаты исследования. Список литературы включает 190 названий, в том чиоле 73 на иностранных языках.
2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ'
Экспериментальная часть работы проведена в опытной базе лаборатории трансплантации эмбрионов Института экспериментальной биологии Национальной Академии наук Республики Казахстан, расположенной на территории совхоза "Илийский" Илийского района Алматинской области в І989-І99І гг.
Объектом для исследования служило 84 козы советской шеро-тной порода и 100 местных грубошерстных коз, сформированных в одну отару. Опыты проводились на схеме, указанной на рио.І.Для проведения экспериментов из числа коз ооветокой шеротной породы были отобраны в качестве доноров 20 маток, которые были разбиты на четыре группы: три опытные, одна контрольная по
Рио.І. СХЕМА
ОПЫТА
ОТБОР К030МАТ0К-Д0Н0Р0В И РЕЦИПИЕНТОВ
КОЗЛЫ-ПРОИЗВОДИТЕЛИ
ПОЛУЧЕНИЕ КОЗЛЯТ-ТРАНСПЛАНТАНТОВ
ОЦЕНКА И ОТДЕЛЕНИЕ ІІРИГСДШХ ДЛЯ ТРАН-СШАНТАЦИИ ЭМБРИО -НОВ
пять голов в каждой из них. Из числа местных коз были отобраны в качестве реципиентов - 30 голов. Возраст подопытных маток- доноров и реципиентов составлял 1,5-4 года, козлов-произ -водителей - 3-4,5 лет. У подопытных животных учитывались основные показатели продуктивности - живая масса и шерстная продуктивность.
Поголовье коз в период проведения исследований находилось в условиях круглогодичного пастбищного содержания о подкормкой в зимний период из расчета по 1,5 кг сена и 200 г концентратов еяедневно на I голову.
Продолаательяость полового цикла коз советокой шероткой породы в период случной і компании определялась индивидуально по результатам прихода в охоту в течении 45 дней.
Донорами олужили козн советской шерстной породы в возрао-те 1,5-4 года о длительность» полового цикла 18 дней. Козома-ток-доноров обрабатывали гормональными препаратами о целью индукции у них полиовуляции. Обработка проводилась в олучной период по следующим охемам: ФСГ (производство США, Sigma.) вводили I,5-летним маткам по двух- и четырехдневной схеме, а 4 -летних каток только четырехдневной. По двухдневной схеме I,S-летним маткам на 17-18 день экстрадьного цикла общей дозой 10 мг ФСГ вводили (подкожно) через каждые 12 часов в четырех инъекциях в дозах:. 2,5; 2,5; 2,5; 2,5 мг, по 4-дневной схеме на 15-18 день эяотрального цикла вводили дозу 16 мг ФСГ через кадяые 12 чаоов в вооьми инъекциях в уменьшающихся дозах: 3,5; 3,5; 2,5; 2,5; 1,5; 1,5; 0,5; 0,5 мг. Взрослых 4-летних маток обрабатывали только по четырехдневной охеме путем инъекции ФСГ в общей дозе 16 мг на 15-18 день полового. цикла через каждые. 12 часов в восьми инъекциях уменьшающимися дозами как было при-
- є -
нято для 1,5-яетних маток.
Препарат зотрофан в дозе 125 мкг вводили (внутримышечно) при двухдневной схеме обработки через 12 часов оо второй инъ -акцией ФСГ, а при четырехдневной схеме обработки через 48 ча-оов с шестой инъекцией ФСГ. При атом эстрофан вводили по времени на 17 день полового цикла.
Охоту выявляли козлами-пробниками два раза в сутки: утром ж вечером. Козоматок-доноров случали козлами-производителями трижды, через каждые 8 часов после выявления начала охоты. Хо-риогонический ганодотрошн в дозе 1000 ед вводили (внутривенно) донорам тут же после первой случки. Вымывание эмбрионов из яйцеводов доноров производили на 4-е сутки пооле их осеменения.
Хирургичеокую операцию для вымывания эмбрионов из репродуктивных трактов козоматок-доноров и их трансплантацию про -водили согласно методике, описанной Ф.М.Мухамедгалиевым и др. (1981) и М.и.Тойпибековым (1986).
Морфологическую оценку вибрионов коз производили по 5-ти бальной шкале, разработанной для эмбрионов крупного рогатого скота и овец (Л.К.Эрнот, Н.И.Сергеев, 1989).
Прнживяяемость переоаяеннюс эмбтоолов устанавливалась путем выявления козоматок-реципиентов ь стадии половой охоты в последующих половых циклах, прг помощи козлов-пробников. При зтом необходимо учитывать соответствие стадии полового цикла реципиента со стадией полового цикла донора с точностьв ± 1 дзвь.
Рост и развитие похопнтинх козлят-грансшіантантов изуча -лиоь по методике описанной в трудах"'Е.Я.Борі;сенко (1967), Н.А» Кравченко (1973). Живая масса козлят-трансплантантов производилась при рохдении, в 4, 8 и 12-месячном возрасте, а козлов-
производителей, маток-доноров и реципиентов осенью перед олуч-кой. Вычисляли абсолютную (среднесуточный прироот) и относительную скорость роста козлят-трансплантантов.
Экстерьер изучался путем взятия основных промеров у коз-лят-траноплантантов при рождении и в возрасте 4, 12 и 18 месяцев.
Молочность козоматок определялась в течении подсосного периода козлят по разнице в живой масое козлят до и пооле сосания с последующим додаиванием, оставшегося в вымени молока, устанавливали среднесуточную молочность.
Цифровой материал, полученный в процессе опытов, обраба -тнвали методом вариационной отатистики (Н.А.Плохинокий, 1970 ; Е.К.Меркурьева, Г.Н.Шангина-Бере80вский, 1983).