Введение к работе
Актуальность исследований. Леіікоз крупного рогатого скота -хроническое инфекционное'заболевание опухолевой природы, наносящее народному хозяйству значительные экономический ущерб, слагающийся из вынужденной преждевременной выбраковка и убоя животных, недополучения, приплода, снижения продуктивности, ограничения плеііпродаки и реализации молока,, утилизации пораженных туи, а такав потерь, связанных с оздоровительными мероприятиями в неблагополучных хозяйствах.
Зпизоотологическпе исследования (B»; ш>4; ІШОп tt al. 1968) и экспериментальное воспроизведение лейкоза у крупного рогатого скота и на овцах (Menki^et lW6;^etitiU. q, IS68) позволили предполокить инфекционную природу этого заболевания.
В 1969 г. flwWLT.rt.Q соавтораиі обнаружит и выделили от
больного лейкозом животного вирус типа С. На основан:;;: морфологичес
ких, биохимических и іимунологических свойств выделенный вирус бил
классифицирован как онкорнавирус ( 1974; Жданов и
др., 1974), .изучены его ультраструктура и морфогенез С ііеньпикова
и др., ІЖ^ОЛфїtt at. , IS77). пути передачи (7-eizM.f.f t is?9;
Валихов, 1978; Крикун, Ї984), разработанны элективные методы
алгиунодиагностики {&(UP*$0MUiub d НІ, 1975; fan Лі Jhm«. ,
L974, 1976). '"
По биохимическим и морфологическим свойствам вирус леіікоза крупного рогатого окота имеет много общего с открытыми в последние годы вирусами Т-клеточных лейкозов человека, что еще более ювышает значимость" исследовании лейкоза крупного рогатого скота 1-320
как уникально:-: модельной, системы., . . 9
' Разрабатываются эффективные мэры профилактики а пути оздоров
леній хозяіісте, неблагополучных по деіхкозу, на основании серодиаг
ностики (Крикун и др., 1954; Кахиансон, IS6). Однако широкое ис
пользование п^лунодиагностіїки.леПкоза крупного рогатого скота стад
кивается с трудностшлп,: сшзанньсж с наработкой необходимого коли
чества вируса и вирусных антигенов. ..-
для получения препаративній количеств вируса леїікоза крупногс рогатого скота (ЕІКРС) и его антигенов в начале использовались первичные культуры клетей крови больных лейкозом КНЕОТНЫХ ^Ш(у(лЛ-п 4... 1969). Б последуюце;.; была получены перевиваем:о культурк . меток,хронически инфпцпроЕашшЕ RUCPC $#-Ju%ttlM- , IS74, IS76; (rXoW,^ ?WU-J^I976; Крикун і: др., 1979), которое позволили стабильно получать глжопротепдньс; и полипєптидньгіі антигены НИЩ!.
Необходимость получения препаративных количеств ELivFC и его растворит антигенов для приготовления вакцин и дпагностккуков диктует поиск новых ко;лпоненгов питательно! cp-зды, иозволякздх стп:,гудировать репликации БЖРС е продукцию его антигеноЕ в культурах переваьазных хронически ин-Т;иццровашшх линпіі клеток.
Б сеязи с з'плл, указанные причины делаит разработку электив
ных методов получения вируса леіікоза крупного рогатого: скота и
его растворимых антигенов в перевиваемых культурах клеток задачей
восьма* актуальной, от решения кстороіі бо і,:ногоі.і зависит экономич
ное производство диагшетикумов и вакцин лротиЕ лейкоза крупного .,.
рогатого скота. - :.
Цель и задачи исследования. Цельи настоян^: работу было,-изучение особенностей течения хронической инфекции аир-уса лейкоза,,.-.', крупного рогатого скота в перевиваемых -культуpax. клеток й'определенно оптимальных условии для;; продукции'ь»русч-.и;како:яеідгя::раот-„;
воримого гликопротеидного антигена в культуральной жидкости при воздействии стимулирующих препаратов.
В соответствии с целью работы были поставлены следунцие задачи:
-
Изучить морфологию клеток двух перевиваемых линий клето^хро-нически инфицированных вирусом лейкоза крупного рогатого скота.
-
Изучить влияние инсулина, диметилсульфоксида (ДМСО). и полнбре-на на ростовые и морфологические параметры перевиваемых культур клеток, хронически 'инфицированных БЛКРС.
-
Дать оценку антиген- и вирус-продуцирупцей способности перевиваемых клеток FLK-bLV и ТЭК ЫВА 76, выращенных на средах с добавлением различных концентраций инсулина, ЛЫСО и полибрена.
Ра'учная новизна.' Дана характеристика культуральным свойствам двух перевиваемых линий клеток хронически инфицированных вирусом лейкоза крупного рогатого окота.
Изучено влияние различных доз инсулина, диметилсульфоксида и полибрена на морфо-функциональные особенности хронически инфицированных BIKPC перевиваемых линий клеток в процессе пассирования.
Изучены закономерности развития хронической инфекции БЯКРС в
переваЕаеіаїх культурах клеток при различных условиях культивирова
ния. '
Остановлено стйлулдрузздео действие инсулина на пролиферация пэрзвиваеглнх-клеток, хронячосиа инфивдрсБзнных ВЖРС..
Поісазапо стгомуларундео действие JKCO на развитие хронической инфекции БЛКРС в перозпваекнх культури" клеток и на продукцию растворимого гликопротеидного антлггпа.
Установлено, что подпкаткон ползброн способствует усилению Еяруспродукции з хронически нн'Т<л5іроЕаігнііх НЕКРС перевираемых культурах клогок.
Виявлена корреляция мекду репликацией БІКРС, выявляемо}*;» в тесте сншіитиеобразоваяля, с продукцией растворимого гликопротеид-кого антигена, определяемого в реакции кшунодиффузии.
Практическая ценность работы. Результати исследования препаратов, влияющих ivt рост и продуктивность перевиваемых линий клеток, хронически инфицированных БЛКРС, могут быть использованы для поЕшенЕл эТсективкостп и экономичности производства диагностикумо и гаюцш.
Публикации. По теме диссертации опубликована I статья и 2 сданы в печать.
Апробация диссертации. Материалы диссертации доясгеїш на научно-методической конференции по патологической анатомии сельско хозяйственных шшотных (г.Вороне?., 1993 г.), на научно-методпческо уеквузовскоЗ конференции по подготовке кадров для зарубеглкх. стран (МЕА, 1993 г.) и заседаниях Ученого соеєтз ША.
щ Объем и структура работы. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения результато к выводов.