Введение к работе
Актуальность: развитие Онотехнологии в СССР привело
к необходимости создания подходов к контроля
биотвхнолопгческих процессов. При этом необходимо решать
задачи массового анализа при отборе перспективных
штаммов-продуцентов и экспресс- контроля яри оптимизации
условий ферментации и контроле бштзхнологических
щюцессоа. Основные требования к аналитическому методикам контроля в биотехнологии, - учитывая объем и характер выполняемой работы - зкспрессность анализа, простота подготовки проб и возможность получения точных количественных результатов.
Для решения этих аналитических задач используют различные
методы, среди которых широкое применение нашла газовая
хроматография. Ее распространенность обусловлена рядом
факторов, в том числа быстротой анализа, доступность!) оборудования, возмогностыо селективного определения различных низксмолекулярных соединений в биологических образцах. Как правило, газо-хроматографические катода используют для анализа веществ в парах или неводних растворах, а биотехнологическиа образцы чаще всего представляют собой водные растворы полярвых веществ. Выделение из них анализируемой фракции увеличивает продолжительность и снижает точность анализа. Для ускорения анализа необходимы сорбенты пригодные для прямого ввода годных проб. Дальнейшее сокращение времени анализа возможно три использовании неподвижных фаз с пониженной способностью к гдсперсионным " взаимодействиям.
іієлье настоящей работы является создание новых сорбентов,
_2-
глжгодных для прямого ввода водных проб и анализа при низких ' температурах колонки, оценка свойств иследуемых сорбентов с термодинамической точки зрения, создание системы колонок для определения полярных веществ в водных растворах и разработка методик анализа образцов ферментационных растворов с использованием этих сорбентов.
Научная новизна работы заключается в том что с ходе ее выполнения была проведена количественная оценка способности неорганических еєщєстб:едкого кала, тринарийфосфата и фторида калия к специфическим взаимодействиям с copOaiais: . исследована пригодность расплава кристаллогидратов, фторида калия и тринэтрлйфосфата в качестве непсдвккшх фаз для определения полярных веществ в водішх растворах методом газовой хроматографии . Установлено/ что кристаллогидрат фторида кзлия является неподвижной фазой с уникально низкой способностью к
ДИСПерСИОННКМ ВЗаИЮДейСТБЙЯМ (uGfCHg )=-490 Дзк/юль) по сравнение с традиционными неподвижными фазами (agCot,) -1400-2200 Дж/моль). Эта его способность была использована для создании экспресс-методик контроля Онотехнологических процессов. На основании полученных данных была предложена система колонок с комбинированными неподвижными фазами, содержащие расплав кристаллогидрата фторида кадия і органическую сидкость - сквалан, Тритон Х-зо5, полизгиленглпколі и т.д.. Подобные сорбенти такгз пригодш: для прямого ввод; еодных проб, но отличаются Оольаей селективность!),' чем сорбенті с кристаллогидратом фторида калия.
Практическая значимость работа. Разработана серия колонок с неподвикныыи фазами различное полярности, пригодных для определения полярных соединений в водша растворах с прямої
вводсм проб. С использованием этих колонок раэраооганны
экспресс-методики определения в 'ферментационных растворах
полярных соединения различных классов (спиртсз, органических
оснований и т.д.). Разработанные методики были использованы
для проведения скринникга потенциальных продуцентов различных
веществ, контроля потребления субстратов и накопления
токсичных соединений е ферментационных растворах. Ряд
разработанных методик включен з лабораторные и
ішітно-прошшленкке регламенты, в частности, регламент на
юлучение натурального красного пигмента(Утвержден 27 шсня 1983
\) и регламент на получение искуственного подсластителя
зспартзыа (Опытно-про;.ьтпле;-Еый регламент производства
зспаргама СЕР 64-т-аэ)
Апробация работы результаты работы докладывались на з к 5 Іунайских симпозиумах по хроматографии (Братислава, 1983 г., [лта, 1985 г.), Всесоюзной конференции Технические средства интроля окрукавдэй среда,. качества микробиологической гродукции и технических параметров микробиологического интеза" (Кирили, 1984 г.), ВсесоБзноя конференций "Контроль и правление биогехнологическими процессами " (Горький, 1985 г.). Публикации.Осношов содержание работы излояено в 8 ' татьях.
Структура и объем работы.. Диссертация состоит из
ведения, обзора литературы (глава и, результатов и их
Осуждения (главы 2,з>, примеров методик
азо-хроматограОкеского определения полярных соединений в здных растворах (глава 4), экспериментальной части (глава 5), даздов я списка литературы. Работа излояена на 182 границах, содержит 21 рисуЕск и 24 таблицы. Библиография
-4-вклвчает 152 названия.