Введение к работе
Актуальность проблеми. Na+, К1"-АТФаза - интегральный мембранный белок, присутствукций во всех клетках животных и осуществляющий сопряженный с гидролизом АТФ трансмембранный перенос ионов На+ и К* против градиента электрохимических потенциалов. - Через создание трансмембранных ионных градиентов Na+,K+-AT5>a3a > участвует в регуляции таких разнообразных процессов, как проведение нервного импульса, поддержание водно-солевого баланса, пролиферация и диффзренцировка клеток. Иа^ЧК^-АТФаза состоит из двух' типов субъединиц: каталитической а-субъединицы (молекулярная масса ~110 кДа) и р-субъединицы (молекулярная масса "35 кДа), представляющей собой сиалогликопротеин. Роль р-субъединицы к настоящему времени не выяснена.
В Институте Оиоорганической химии им. М.Ы. Шемякина АН СССР проводятся комплексные структурно-функциональные исследования генов Na+ .К^-АТФазы. Было установлено, что каталитическая а-субъединица представлена несколькими изоформами, кодируемыми различными генами, составляющими семейство генов а-субъединицы Ка+,К+-АТФазы. К началу настоящей работы отсутствовали данные о генах р-субъединицы человека. В связи с этим представлялось актуальным исследовать последовательности генома человека, гомологичные гену р-субъединицы Na+,Kt"-AT$a3H. Работа стала возможной благодаря наличию информации о структуре кДНК р-субъединицы Ма+,К+-АТФазы из почек свиньи, определенной в ИБХ им. М.М. Шемякина АН СССР.
Цель работы. Целью настоящей работы был анализ нуклеотидных последовательностей генома человека, гомологичных кДНК р-субъединицы Na+,K+-AT$a3H свиньи.
Ч'-. Научная новизна и практическая ценность работы. В результате проделанной работы установлено существование семейства генов р-субъединицы Na+,К*"-АТФазы человека, которое содекит не менее, чем один ген и один псевдоген. В результате анализа первичной структуры геномной ДНК человека, содержащей последовательности псевдогена р-субъединицы Na+,К*"-АТФазн, выявлены две различающиеся последовательности, обладающие признаками процессированных псевдогенов. На основании сравнительно-структурного анализа оценено время образования, процессированного псевдогена р-суСьединицы Na+,К+-АТФазы человека.
- г -
Полученные результати могут быть использованы при исследованиях экспрессии гена 6-субъединицц Na+,K+-AT$a3ti, определении хромосомной локализации и изучении популящюнного полиморфизма.
Объем работы. Диссертационная работа изложена на 93 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, обсуждения результатов, экспериментальной части, выводов и списка цитируемой литературы (132 ссылки).