Введение к работе
Актуальность проблемы.
В последнее время широко используется технология рекомби-иантной ДНК для получения гибридных белковых молекул, содержащие эпитопы инфекционных агентов и являгавихся потенциальными компонентами вакцин или тест-систем. Представляется весьма перспективным использование в качестве носителей эпигонов пустых вирусных капсидов. Они состоят та множества мономерных субъединиц, что обеспечивает высокую эффективность представления антигенных детерминант з фиксированней конфермаши. Критическим моментом при конструировании таких "искусственных" антигенов является выбор района в белке-носителе, подходящего для встройки нейтрализующего эпитопа. Естрсйка не долана нарушать самоорганизацию белка-носителя и находиться на его поверхности ч антигеннс-активной зоне.
Цель работы.
Цель настоящей работы заключалась в конструировании химерных вариантов НВсАг. выяснении влияния встроек на его структуру и совершенствовакии методической бавы. используемой для создания гибридных белков.
Научная новиана и практическая ценность работа
Разработана мутационная система, позволяющая исследовать "bridge"-мутагенев. Получены данные о факторах, влияющих на. его эффективность. Показано, что важная роль в процессе мутагенеза принадлежит системе рекомбинации клетки.
Получены рекомбинантные плазмиды, направляющие синтез з Е. coli корового белка вируса гепатита В (HBcAg) и НВеАя. Обнаружена новая антигенная детерминанта на N-конце HBeAg. Показано, что М-конец КБсАг кв экспонирован на поверхности частицу.
Получены рекомбинантные плазмиды, налразлягтае синтез г Е. тої: x;iyp;:u>: -ирчантоп НБсАі?, содержала а области что 2\-;\ аминокислоты І.ЛК), либо на месте делеции 81-СЮ аминокислотных остатков (AKOV, эпитоп вируса яаура >F\V VP1 DDO-ff?). . на М-ко.чие iv-^b АКО а-галактсвидазы. исследованы інтигєнин*
Апробация работы.
Результаты работы докладывались на Всесозных конференциях: "Новейшие методы биоинженерии" (Пушино, 1991), "Новые направления биотехнологии" (Пущино.1992), "Вопросы ветеринарной вирусологии, микробиологии и эпизоотологии" (Покров,1992); на Шждународном симпозиуме "5yntheti с ol і gonucl eoti des: prob-!ems and frontiers of practical application" (Москва, 1991);' на научных конференциях НПО "Вектор".
Публикации.
По материалам диссертации опубликовано 2 статьи и тезисы шести докладов.
Объем и структура диссертации.