Электронная библиотека диссертаций и авторефератов России
dslib.net
Библиотека диссертаций
Навигация
Каталог диссертаций России
Англоязычные диссертации
Диссертации бесплатно
Предстоящие защиты
Рецензии на автореферат
Отчисления авторам
Мой кабинет
Заказы: забрать, оплатить
Мой личный счет
Мой профиль
Мой авторский профиль
Подписки на рассылки



расширенный поиск

Изучение состава, физико-химических и иммунохимических свойств иммуноглобулинов G гипериммунных сывороток животных Дедкова, Лариса Михайловна

Данная диссертационная работа должна поступить в библиотеки в ближайшее время
Уведомить о поступлении

Диссертация, - 480 руб., доставка 1-3 часа, с 10-19 (Московское время), кроме воскресенья

Автореферат - бесплатно, доставка 10 минут, круглосуточно, без выходных и праздников

Дедкова, Лариса Михайловна. Изучение состава, физико-химических и иммунохимических свойств иммуноглобулинов G гипериммунных сывороток животных : автореферат дис. ... кандидата биологических наук : 03.00.03 / НИИ молекулярной биологии.- Кольцово, 1996.- 18 с.: ил. РГБ ОД, 9 96-4/1845-6

Введение к работе

Актуальность темы. В защите млекопитающих от разнообразных микроорганизмов и токсинов ключевую роль играют иммуноглобулины класса G. К этому классу принадлежит основное количество антител, образующихся в ответ на чужеродные вещества. К настоящему времени достигнуты значительные успехи в понимании структурной организации и функционирования IgG, построена модель связывания ими антигенов, основанная на принципе пространственной комплиментарное. Показано, что IgG человека и животных подраздгляются на подклассы. Для подклассов IgG человека выявлены отличия в аминокислотной последовательности 4-7 пептидов, расположенных в С-концевом участке молекулы, а также в количестве S-S связей в «шарнирной» области. Найдено, что они различаются также и по биологическим функциям.

Значительно менее изученными являются подклассы IgG животных, хотя сыворотки иммунных кроликов, коз, баранов, лошадей и выделяемые из них антитела широко используются для решения научно-практических задач иммунологии, вирусологии, биотехнологии и медицины. Такие сыворотки гетерогенны по составу и специфичности иммуноглобулинов, и иммунизация животных даже высокоочищенными белковыми антигенами сопровождается наработкой большого количества неспецифических IgG. На разных стадиях иммунного ответа продукция их может превышать образование антител к целевым антигенам. Поэтому изучение состава и свойств подклассов IgG-фракции сывороток иммунных животных является актуальной задачей, решение которой может способствовать рациональному выбору схем иммунизации и разработке методов получения высокоактивных препаратов антител. Кроме того, изучение подклассов IgG таких сывороток представляет теоретический интерес, связанный с исследованием реакции иммунной системы млекопитающих на длительное введение больших количеств чужеродных субстанций различной природы.

Цель и задачи исследования. Целью настоящей работы являлось изучение состава и свойств подклассов IgG в сыворотках кроликов, коз и лошадей, гиперяммунизированных вируссодержащими гомогенатами органов инфицированных мышей и морских свинок. В соответствии с целью исследования решались следующие задачи:

разработка эффективного Метода количественного определения подклассов IgG животных;

сравнительный анализ состава IgG-фракции сыворотки крови иммунных и неиммунных животных;

изучение состава и специфичности подклассов IgG сывороток коз и лошадей, иммунизированных вируссодержащими гомогенатами органов животных;

исследование состава подклассов IgG в препаратах антител, полученных га гипериммунных сывороток коз методом спиртового осаждения;

разработка подходов к получению высокоактивных препаратов иммуноглобулинов с пониженной реактогенностью из гипериммунных сывороток лошадей против ВКЭ;

Научная новизна. В результате проведенных исследований разработан эффективный метод количественного анализа состава подклассов IgG в сыворотках животных.

Исследование сывороток кроликов, коз, овец и лошадей с помощью разработанного метода позволило выявить общие закономерности в составе подклассов IgG в ходе гипериммунизации. Впервые показано, что иммунные сыворотки животных отличаются от неиммунных не только количеством иммуноглобулинов G, но и составом подклассов. В сыворотках крови гипериммунных кроликов и коз, так же как и лошадей, происходит значительное увеличение подкласса IgG с большим отрицательным зарядом, независимо от типа используемого антигена.

При исследовании этого подкласса IgG, выделенного из сывороток гипериммунных коз, были выявлены его отличия от известных ранее подклассов IgGl и IgG2 по физико-химическим свойствам, строению С-конце-вых участков молекулы и специфичности.

В ходе изучения состава и свойств подклассов IgG гипериммунных сывороток лошадей против ВКЭ было установлено, что фракция IgG (Т) при содержании небольшого количества антивирусных антител проявляет значительную активность к растворимым антигенам мозга мыши. Выявлена также повышенная реактогенность этого подкласса, и экспериментально обоснованы ее возможные причины. На основании полученных результатов разработаны подходы к препаративному получению высокоактивных антител кВКЭ.

Практическая ценность. Результаты настоящей работы представляют несомненную практическую значимость, так как гипериммунные сыворотки животных и выделенные из них препараты антител широко используются в медицинских диагностических исследованиях, а в некоторых случаях все еще применяются для лечебно-профилактических целей. Такие антисыворотки и антитела часто используют в вирусологии, где наработка больших количеств очищенных вирусных белков для иммунизации животных

является достаточно дорогой и представляет потеніщальную опасность для работающего персонала.

Апробация. Материалы диссертационной работы докладывались на следующих конференциях: «Проблемы использования целлюлозы и ее производных в медицине и микробиологической промышленности» (Ташкент, 1989); «Актуальные проблемы биотехнологии» (Кольцово, 1990); «Молекулярная сорбция биологически активных веществ» (Пенза, 1990); «Вопросы эпидемиологии и ігоофотактикитлгоодаоочаговнх инфекций» (Омск, 1991).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 9 работ.

Объем работы. Диссертационная работа изложена на 105 страницах машинописного текста, включая 15 таблиц, 18 рисунков. Список литературы содержит 118 наименований работ: 13 на русском и 105 на иностранных языках.