Введение к работе
АКТУЛЛЫЮСГЬ ПРОБЛЕМЫ. В последние годы одной из взиболсе актуальных проблем в биологии и медицине остается изучение молекулярных процессов, лежащих в основе превращения нормальной клетки в опухолевую. Особое место занимает исследование механизмов становления метастатического потенциала опухолевых клеток.
При сравнительном изучении двух генетически блкзхпх линий адекосаркомы молочной железы мыши КСМЛ-100 и КСМЛ-0 [Ebialidze,1989], обладающих разным метастатическим потенциалом, в нашей лаборатории была клонирована кДНК транскрипта гена mtsl [Tulchinsky, 1990]. Было показано, что mtel представляет, собой однокопийкый ген, продукт которого относится к семейству малых калъций-связквающйх белков S-100. При анализе экспрессии mtsl в' различных опухолях било обнаружено, что уровень его экспрессии коррелирует с метастатическим потенциалом опухолевых клеток. Высокий уровень транскрипции наблюдается с мстасазирующих клетках, з то время как в клетках неметастазируюшмх опухолей тек молчит. Кроме того, mtsl транскрипты обнаружены в кленах тимуса, селезенки, костного мозга, лимфоцитах крови. Основываясь на этих фактах, мы предполагаем, что некоторые свойства, присущие нормальным клеткам, могут вносить вклад в формирование метастатического фенотипа опухолей. С этой точки зрения вреставляст несомненный интерес изучение экспрессии гена mtsl в нормальных клетках.
ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ. Целью настоящей работы явилось исследование экспрессии гена mtsl в ' различных расфракциотфованных клетках мислоидного происхождения и перевиваемых клеточных линиях мыши и человека; изучение влияния на функционирование гена ряда активаторов' Иммунокомпетентных клеток.
В ходе работы решались следующие задачи:
1. Изучение экспрессии гена mtsl в Т- и В-лимфоцитах,
предшественниках эритроцитов и гранулоцитах (нейтрофилах);
-
Изучение экспрессии гена mtsl в макрофагах на разных стадиях дифференцирозки ( макрофаги костного мозга, моноциты крови, резидентные ссритонсальные макрофаги);
-
Изучение экспрессии гена mtsl в культивируемых клетках линий HL60 (промнедошггы человека), U937 (промоноциты человека), К562 (эритролейкемия человека), НМ\|)2 (миелома человека), Sp2/0-Agl4 (миелома мыши), Ри5-1.8 (моноцилы/макрофаги мыши), WEH1-3 (миеломоноцяты мыши); (тимома человека ),
-
Изучение влияния активаторов иммунокомпетентных клеток ( бактериального липополисахарида, у-интерферона, конканавалина-А ) на уровень транскрипции гена mtsl в макрофагах;
-
Изучение влияния концентрации цитозольного кальция на экспрессию гена mtsl в макрофагах.
В настоящей работе мы исследовали экспрессию гена mtsl в расфракционироваиных клетках миелоидного происхождения, а также возможность модуляции экспрессии различными митогенами. Было
показано, что уровень транскрипции гена коррелирует со способностью , иммуноііомпетснтньїх клеток к перемещению и "иішазіш* и может изменяться под воздействием митогенов. Была проанализирована кальций-зависимая регуляция экспрессии гена. Обнаружена и охарактеризована перестройка гена mtsl в линии клеток WEHI-3, вызванная иисерцией ретровнрус-подобного элемента и приводящая к активации транскрипции гена.
АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ. Материалы диссертации были представлены:
на 4 Международном конгрессе Metastasis Research Society "Science and Medicine in Cancer Metastasis", Парик, Франция, 1992.
на 2 Международном симпозиуме по молекулярной биологии рака ( The Second International Cancer Molecular Biology Symposium ), Каир, Египет, 1993.
ПУБЛИКАЦИИ. По теме работы имеются две публикации.
ОБЪЕМ РАБОТЫ. Работа изложена на /^/страницах машинописного текста. Она включает: введение, обзор литературы, эксперкмектальную часть, обсуждение результатов, выводы и список цитированной литературы. Диссертация содержит 16 рисунков, 3 схемы, 1 таблиці'.