Введение к работе
Актуальность проблемы. В последние годы в Российской Федерации наблюдается увеличение числа инфекционных и аллергических заболеваний. За 1985 - 1998г.г. отмечено повышение удельного веса дисбактериозов, причиной которых являются ухудшение экологической обстановки, неконтролируемое использование в медицине, ветеринарии и сельском хозяйстве антибиотиков, химиотерапевтических препаратов, удобрений, инсектицидов, гормонов и др., снижение качества питьевой воды и продуктов питания. Широкое распространение дисбактериозов способствует развитию тяжелых рецидивирующих инфекционных заболеваний, иммунодефицитов, аллергопатий, анемий, гастроэнтерологических и других соматических болезней (Чупринина Р.П. и соавт., 1993; Грачева Н.М., Щетинина И.Н., 1980; Селезнев Е.Ф., 1993; Шаханина И.Л., 1996; Наркевич М.И., Тымчаковская И.М., 1997; Бухарин О.В., 1997).
В связи с изложенным, профилактика и лечение инфекционных заболеваний и дисбактериозов в настоящее время и на ближайшую перспективу являются приоритетными задачами общенационального значения. Решение этих задач возможно путем реализации комплекса соответствующих противоэпидемических, санитарно - гигиенических и других мероприятий, включая разработку, организацию серийного производства и внедрение в медицинскую практику новых медикаментозных средств для предупреждения и терапии инфекционных заболеваний и дисбактериозов. Новые препараты должны соответсвовать современному мировому уровню по эффективности, срокам хранения и ассортименту .выпускаемых лекарственных форм.
В настоящее время в числе высокоэффективных лечебно-
профилактических медикаментозных средств специалистами
рассматриваются эубиотики (пробиотики) - препараты из живых безвредных
для организма человека и теплокровных животных активных бактерий -
антагонистов, подавляющих in vitro и in vivo рост и размножение патогенных и условно патогенных микроорганизмов, вызывающих острые кишечные заболевания и токсикоинфекции. Эубиотики, в отличие от антибиотиков и химиопрепаратов, не оказывают негативного влияния на представителей нормомикрофлоры желудочно - кишечного тракта, наоборот, при дисбиотических изменениях способствуют ее качественному и количественному восстановлению до нормальных значений (Смирнов В.В. и соавт., 1983; Слабоспицкая А.Т. и соавт., 1995; Захаренко СМ., 1997; Бродов Л.Е. и соавт., 1997; Буланцев А.Л. и соавт., 1998; Златкина А.Р., 1999; Воробьев А.А., Лыкова Е.А., 1999).
Широкое использование эубиотиков в медицинской практике
стимулировало работы по изучению их свойств, совершенствованию и поиску
новых препаратов. Было установлено наличие у них, помимо
антагонистической активности, ряда полезных ранее неизвестных свойств:
иммуномодулирующих, антиаллергических, антирадиационных,
антитоксических (Будагов Р.С. и соавт., 1996; Лопатина Т.К. и соавт., 1996; Долгушин И.И. и соавт., 1996; Позняк А.Л. и соавт., 1997; Журило О.А., Турлюк С.А., 1998). Эти данные имеют принципиальное теоретическое и прикладное значение в плане конструирования и применения эубиотиков. Перечень конкретных препаратов, серийно производимых в настоящее время отечественной медицинской промышленностью, а также находящихся в стадии разработки и клинических испытаний, достаточно представителен и постоянно расширяется (Тремасов М.Я. и соавт., 1998; Чупринина Р.П. и соавт., 1993; Смирнов В.В., 1998; Журило О.А., Турлюк С.А., 1998). Учитывая различия в степени выраженности тех или иных конкретных лечебно -профилактических свойств и их совокупности для отдельных препаратов, выбор и применение в лечебной практике наиболее эффективных эубиотиков предопределяет актуальность проведения их сравнительных исследований как в лабораторных, так и клинических условиях.
Среди большого числа используемых в настоящее время эубиотиков особое значение придается препаратам, приготовленным на основе аэробных спорообразующих бактерий — представителей экзогенной микрофлоры, являющихся важной составляющей нормомикробиоценоза кишечника человека и теплокровных животных. Эти препараты предназначены для использования в тех случаях, когда препараты на основе эндогенных микробов мало эффективны (Смирнов В.В. и соавт., 1988; Войчишина Л.Г. и соавт., 1991; Фазылова А.А. и соавт, 1996; Тремасов М.Я. и соавт., 1998). Наибольшее распространение среди них имеют бактисубтил, биоспорин, споробактерин, цереобиоген, флонивин - БС. Из них бактисубтил и флонивин - БС являются импортными препаратами, поступающими в Россию из Франции и Югославии. Наиболее известным практическим врачам из числа импортных препаратов является бактисубтил, изготовленный на основе В.species. Вместе с тем результаты сравнительных испытаний указанных лекарственных средств в доступной литературе отсутствуют, поэтому представляется целесообразным дать сравнительную характеристику подобных эубиотиков. Указанная задача является особенно актуальной в связи с разработкой новых технологий производства подобных препаратов. В частности, в Центре воєнно - технических проблем биологической зашиты НИИ микробиологии МО РФ разработана технология глубинного культивирования компонентов биоспорина (B.subtilis и B.licheniformis), создана и сертифицирована аппаратурно - технологическая линия по его выпуску в различных готовых лекарственных формах (лиофильно высушенный препарат в ампулах или флаконах, таблетки, суппозитории). Это позволило нам сформулировать цель и задачи исследования.
ЦЕЛЬ РАБОТЫ: Выявить особенности фармакодинамики и фармакокинетики эубиотиков, изготовленных на основе аэробных спорообразующих бацилл на примере бактисубтила (B.species) и биоспорина
(B.subtilis и B.licheniformis), а также оценить профилактическую и лечебную эффективность биоспорина в эксперименте на животных.
ЗАДАЧИ:
-
Изучить биохимическую и антагонистическую активность микроорганизмов, входящих в состав биоспорина и бактисубтила.
-
Оценить безвредность в опытах по изучению острой и хронической токсичности биоспорина и бактисубтила и их влияние на некоторые показатели иммунитета у животных.
-
Определить фармакокинетику исследуемых препаратов.
-
Показать эффективность биоспорина и бактисубтила на модели инфекционного процесса.
-
Усовершенствовать методы производственного биологического контроля биоспорина с целью включения этих методов в «Стандарты предприятия», «Фармакопейную статью» и «Инструкцию по медицинскому применению».
ОСНОВНЫЕ ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ Все положительные биологические и лечебно-профилактические свойства биоспорина, при использованием технологии глубинного выращивания компонентов препарата, сохраняются.
Комплексный эубиотик биоспорин, приготовленный на основе двух штаммов аэробных спорообразующих бактерий (B.subtilis и B.licheniformis) по совокупности положительных фармакодинамических и фармакокинетических свойств превосходит аналогичный зарубежный препарат бактисубтил.
В эксперименте на животных при сравнительной оценке фармакодинамических и фармакокинетических свойств биоспорина и
бактисубтнла выявлена более высокая эффективность биспорина.
В эксперименте на животных (изучена острая и хроническая токсичность) показана безопасность применения биоспорина и бактисубтнла.
Разработаны и включены в «Стандарты предприятия» и «Фармакопейную статью» методы производственного биологического контроля биоспорина.
Результаты, полученные в процессе выполнения данной диссертационной работы, позволили реализовать преимущества биоспорина путем внесения изменений в «Инструкцию по медицинскому применению», обосновании необходимости более широкого его применения в медицинской практике с точки зрения профилактики и лечения ОКИ и дисбактериозов.
Апробация и реализация результатов работы.
Диссертация апробирована на заседании Ученого совета Центра военно-технических проблем биологической защиты НИИ микробиологии МО РФ 21 июня 2000г., а также на заседании Ученого совета Института новых технологий РАМН 25 сентября 2000г.
Основные положения работы доложены на юбилейной научной конференции, посвященной 70-летиго НИИ микробиологии МО РФ (Киров, 1998), на юбилейной научной конференции "Диагностика, лечение и профилактика инфекционных заболеваний. Биотехнология. Ветеринария" _ (Екатеринбург, 1999) и на научных конференциях отдела лечебных препаратов Центра воєнно-технических проблем биологической защиты.
По материалам диссертации опубликовано б научных работ, в том числе 2 отчета по плановым темам НИР.
Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 115 страницах машинописного текста и состоит из введения, 5 глав,
заключения и выводов. Список использованной литературы включает 180 источник отечественных и зарубежных авторов. Диссертация содержит 32 таблицы.