Введение к работе
Актуальность проблемы. Широкое распространение сальмонеллезов во многих, в том числе высокоразвитых странах, и связанный с этим огромный экономический и социальный ущерб вызывают настоятельную необходимость всестороннего изучения данной проблемы (Сатаров С. с соавт., 1997; Schmid Н. et al., 1996; Yang С.Н. et al., Holtby J. et a!.. 1997).
Несмотря на огромное количество научных исследований, проводимых во всем мире и посвященных сальмонеллезной инфекции, до последнего времени не решены многие кардинальные вопросы патогенеза и лабораторной диагностики.
Встречаясь в-любом возрасте, сальмонеллез поражает, преимущественно, детей, особенно раннего возраста, у которых он часто протекает длительно, с развитием тяжелых форм, нередко заканчивается летальным исходом и осложняет эпидемиологическую ситуацию в детских стационарах (Учапкин В.Ф. с соавт., 1996; Милютина Л.Н. с соавт.. 1997; Новок-шонов А.А. с соавт., 1997; Andersson V. et al., 1995).
Разнообразие клинической картины сальмонеллеза, зачастую, вызывает трудности в постановке диагноза и своевременном проведении комплекса необходимых лечебных її противоэпидемических мероприятий. В связи с этим ведущее значение в диагностике сальмонеллезной инфекции отводится лабораторным методам исследования: бактериологическому и серологическому, в частности реакции пассивной гемагглютинации (РПГА). Однако эти методы имеют ряд существенных недостатков, значительно снижающих их эффективность. К ним относятся: низкая чувствительность, большая трудоемкость, длительность исследования, использование дорогостоящих диагностикумов и питательных сред, приготовленных на основе мясных, казеиновых, рыбных, растительных и других гидролизатов и экстрактов, получаемых из ценного пищевого сырья (Блинова Л.П. с соавт., 1994; Амерханова Н.Н. с соавт., 1995: Куликова И.Н. с соавт., 1996; Турьянов М.Х. с соавт., 1998).
Следует отметить, что к настоящему времени разработаны и предложены к внедрению в клиническую практику многочисленные методы, позволяющие выявлять противосальмонеллезныс антитела в сыворотке крови и специфические антигены в различных биосубстратах больных (Doran J.L. et al., 1994; Jackson А.А. et al. 1995; Gast R.K. et al.. 1997: Wegener H.C. et al., 1997). Однако использование большинства из них ограничено из-за недостаточной специфичности и чувствительности, подтверждения диагноза только в поздние сроки заболевания или из-за сложности постановки, отсутствия стандартных коммерческих препаратов, реагентов, оборудования, или из-за больших экономических затрат. Кроме того, до сих пор продолжаются поиски непищевого сырья для приготовления микробиологических питательных сред.
Анализ данных специальной литературы и высказанные выше предпосылки позволили сформулировать цель и определить задачи работы.
Цель настоящей работы - разработка и апробация нового оригинального метода - реакции гидрозольной агглютинации для серодиагностики сальмонеллезов, а также усовершенствование бактериологической диагностики этой инфекции.
Конкретные задачи исследования:
-
Разработать гидрозольные антигенный и антительный диагно-стикумы для серодиагностики сальмонеллезной инфекции.
-
Дать сравнительную оценку эффективности реакции гидрозольной агглютинации и реакции пассивной гем агглютинации при выявлении сывороточных противосальмонеллезных антител.
-
Изучить возможность применения гидрозолъного антительного диагностикума с целью обнаружения антигенов сальмонелл в исследуемом материале.
-
Оценить эффективность новых питательных сред, приготовленных на основе отходов пушного производства и предназначенных для выделения сальмонелл, по сравнению с контрольными средами.
Научная новизна работы.
Впервые для диагностики сальмонеллеза предложены гидрозольные антигенный и антительный диагностикумы. В реакции гидрозольной агглютинации (РГЗА) определены диагностические титры и изучены частота обнаружения и величина титров противосальмонеллезных антител у больных острыми кишечными инфекциями. Проведено сравнительное изучение эффективности использования реакции гидрозольной агглютинации и реакции пассивной гемагглютинации при диагностике сальмонеллезной инфекции. Впервые показана возможность использования гидрозольного антительного диагностикума для выявления антигенов сальмонелл в исследуемом материале. Впервые для обнаружения сальмонелл предложены новые питательные среды, приготовленные на основе отходов пушного производства, и доказана эффективность их применения.
Практическое значение. На основании полученных результатов исследования показано, что простота и экспрессность постановки, экономичность, достаточная чувствительность и специфичность реакции гидрозольной агглютинации со специфическими антигенным и антительным диагностикумами позволяют рекомендовать ее для серодиагностики сальмонеллезов. Определены оптимальные сроки проведения серологического обследования больных сальмонеллезом в зависимости от их возраста. Предложенные питательные среды на новой оригинальной основе, не отличающиеся по физико-химическим характеристикам, ростовым
свойствам и высеваемости от контрольных, могут быть успешно использованы для выделения сальмонелл.
Внедрение в практику. Материалы исследований внедрены и используются в практической деятельности врачей городской инфекционной больницы г. Кирова, в учебном процессе на лечебном и педиатрическом факультетах Кировского государственного медицинского института.
Основные положения, выносимые на защиту:
-
Реакция гидрозольной агглютинации при выявлении в сыворотках крови противосальмонеллезных антител по своим основным характеристикам не уступает реакции пассивной гемагглютинации.
-
Реакция гидрозольной агглютинации с антительным диагности-кумом может быть использована для обнаружения антигенов сальмонелл в материале от больных острыми кишечными инфекциями.
-
Питательные среды, приготовленные на новой основе из отходов пушного производства, по своему химическому составу, ростовым свойствам и высеваемости в отношении сальмонелл соответствуют контрольным средам.
Апробация диссертационного материала. Основные положения диссертационной работы доложены и обсуждены на научно-практических конференциях "Острые инфекционные заболевания" (Киров-Екатеринбург, 1993), "Актуальные вопросы трансфузиологии и клинической медицины" (Киров, 1997), "К 75-летию санитарно-эпидемиологической службы" (Киров, 1997), III Международном конгрессе "Иммунореабилитация и реабилитация в медицине" (Эйлат-Израиль, 1997), VIII съезде педиатров России (Москва, 1998), на заседании проблемной комиссии "Медико-биологических дисциплин" Кировского государственного медицинского института.
Публикации. По теме диссертации опубликовано 7 работ.
Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 136 страницах машинописного текста, иллюстрирована 18 таблицами и 3 рисунками: состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов, 2 глав собственных исследований, а также заключения с обсуждением полученных результатов, выводов, практических рекомендаций. Список литературы включает 221 наименование работ отечественных и зарубежных авторов.