Введение к работе
Актуальность темы. В последние десятилетия рост онкологических заболеваний сохраняет свою динамику, и проблема лечения и профилактики болезней злокачественного роста стоит достаточно остро. В структуре злокачественных болезней рак желудка (РЖ) занимает одно из ведущих мест. Ежегодно во всем мире регистрируют 798 тысяч новых случаев, и каждый год они становятся причиной смерти 628 тысяч человек (Аксель Е.М., Давыдов М.И., Ушакова Т.И., 2001). Наряду с некоторыми государствами Юго-Восточной Азии, Южной Америки и Европы, Российскую Федерацию относят к странам с наиболее высоким показателем случаев РЖ, где регистрируют более 30 случаев на 100 тыс. населеция (Aspinall R.J. et al, 2002). При этом в РФ РЖ устойчиво занимает второе место среди прочих онкологических заболеваний (Мерабишвили В.М., 2001; Чиссов В.И., Дарьялова С.Л. и др., 2000).
Известно, что РЖ практически никогда не возникает на фоне неизмененной слизистой. Ему предшествуют процессы, обозначаемые как предраковые (Серов В.В., Пальцев М.А., 1998). Поэтому основу профилактики злокачественных заболеваний желудка может составить своевременная диагностика и коррекция изменений слизистой оболочки желудка (СОЖ), вовлеченных в этапы канцерогенеза по схеме СоггеаР. (1995): хроническое воспаление -> кишечная метаплазия -> дисплазия -* рак.
Как известно, развитию РЖ предшествует хронический атрофический гастрит, в этиологии которого важную роль играет персистенция Helicobacter pylori, что' приводит к прогрессированию патологических изменений в СОЖ. Установлено, что у лиц, инфицированных Н. pylori, РЖ встречают в 4-8 раз чаще, чем у здоровых, что послужило одним из аргументов в пользу доказательства канцерогенное бактерий (Eurogast Study Group, 1993; АруинЛ.И., 1994; FormanD., 1996). Установление связи между инфицированностью Н. pylori и РЖ дало основание Международному агентству
2 по изучению рака отнести его -.к канцерогенам I группы (IARC, 1994). Эпидемиологические исследования, показали, что в развитых странах Н. pylori инфицирован каждый третий, а в развивающихся практически каждый взрослый человек. Однако у исследователей закономерно возникает вопрос, почему при такой высокой инфицированности онкология развивается далеко не у каждого человека? (АруинЛ.И., 1997). Очевидно, что для возникновения неопластических процессов только микробной колонизации СОЖ явно недостаточно. Возможно, что условиями для их развития являются эндогенные факторы: генетические особенности, иммунный статус организма (Е.М. El-Omar et al., 2000; Кононов А.В., 2003); экзогенные факторы: характер питания, стрессы, социально- экономические условия (Соггеа Р., 2000; You W.C. et al., 2000; Zaridze D. et al., 2000; Siman D.H. et al. 2001; Brenner H. et al, 2002), а также давность и степень инфицирования вирулентными штаммами Н. Pylori (Forman D., 2000). Бактерии не синтезируют веществ, обладающих прямым мутагенным действием, но некоторые ферменты и токсины, можно рассматривать как пусковые механизмы для развития патологических процессов, приводящих к раку (Parsonnet J. et al., 1997; Домарадский И.В., 2001). Последние исследования показывают, что Н. pylori непосредственно способствует повреждению эпителиальных клеток посредством выработки цитотоксинов VacA и CagA (Бондаренко В.М., 2001; Бондаренко В.М., Червинец В.М., Воробьев А.А., 2003). Риск развития РЖ больше у лиц, инфицированных штаммами Н. pylori, образующих CagA и VacA (Crabtree J.E. е.а.,1993; Blaser M.J. e.a., 1995).
Данные литературы об обратимости последовательности желудочного канцерогенеза: атрофический гастрит -»кишечная метаплазия -> дисплазия слизистой оболочки желудка также очень противоречивы (Meining A. et al., 2001). Часть авторов склоняется к выводу о необратимости данной последовательности, а элиминация Н. pylori, возможно, приводит к замедлению её развития (Feldman R.A., 2001; Valle J., Gisbert J.P., 2001), другая часть исследований свидетельствует об обратном (Ковалева Н.Б. и соавт., 2002; Кашин СВ., Надежны А.С., 2003; Крылова И.В. и соавт., 2003).
Вышеуказанное свидетельствует о необходимости дальнейшего изучения роли Н. pylori в патогенезе онкологических заболеваний желудочно-кишечного тракта и совершенствования методов их профилактики.
Цель исследования. Определить значимость инфицирования Н. pylori в развитии злокачественных опухолей желудка.
Задачи исследования:
-
Выявить частоту инфицирования. Н. pylori у больных с предраковыми состояниями и онкологическими заболеваниями желудка
-
Изучить гистологическую картину морфологических изменений СОЖ при очаговой патологии желудка
-
Определить вирулентность и адгезивность штаммов Н. pylori, выделенных от больных с очаговой патологией желудка
-
Исследовать возможность обратимости морфологических изменений СОЖ после элиминации Н. pylori
-
Изучить возможность длительного сохранения штаммов Н. pylori.
Научная новизна. Разработаны методики определения вирулентных свойств Н. pylori в пробе с красителями Романовского-Гимзы и изучения адгезивности в реакции прямой гемагглютинации с эритроцитами барана в присутствии D-маннозы. Впервые предложено использование выявленных адгезивных свойств Н. pylori в качестве маркера вирулентности данного микроорганизма. Выявлена высокая частота инфицирования Н. pylori, сочетающаяся с высокой степенью обсемененности СОЖ, у больных воспалительными и неопластическими заболеваниями. Разработан алгоритм
4 повторного обследования больных очаговой патологией желудка комплексным методом. Впервые разработана методика длительного сохранения Н. pylori при -20 С в специальной консервирующей смеси.
Практическая значимость. Доказана зависимость развития очаговой патологии, имеющей различный злокачественный потенциал, от частоты, степени обсемененности вирулентными штаммами Н. pylori.
Предложен алгоритм повторного обследования больных очаговой патологией желудка комплексным методом, включающим бактериоскопический, бактериологический, биохимический, гистологический методы исследования с целью определения эффективности эрадикационной терапии и возможного регресса морфологических изменений эпителия СОЖ.
Предложены доступные методики определения вирулентности и адгезивности выделенных штаммов Н. pylori. Предложена сахарозо-желатиновая среда в буферном растворе для консервирования штаммов Н. pylori при -20 С.
Внедрение результатов исследования. Результаты исследования внедрены в работу бактериологической лаборатории Казанской государственной медицинской академии МЗ РФ, в работу клинического онкологического диспансера МЗ РТ, в учебный процесс кафедр микробиологии Казанского государственного медицинского университета и Казанской государственной медицинской академии МЗ РФ.
Положения, выносимые на защиту.
1. Большинство форм очаговой патологии желудка ассоциировано с колонизацией Н. pylori.
2. Тяжесть морфологических изменений СОЖ зависит от степени
вирулентности штаммов Н. pylori.
-
Адгезивность Н. pylori, выявленная в реакции D-маннозонезавнсимой гемагтлютинаини (МНГА), является маркером вирулентности.
-
Эрадикация Н. pylori может приводить к регрессу морфологических изменений преимущественно на начальных стадиях канцерогенеза.
-
Возможно длительное сохранение штаммов Н. pylori при -20 С в специальной консервирующей смеси.
Апробация материалов работы. Основные положения диссертации доложены на юбилейной конференции, посвященной 55-летию онкологической службы Тюменской области (Тюмень, 2001); на VIII съезде Всероссийского общества эпидемиологов, микробиологов, паразитологов (Москва, 2002); на научно-практических конференциях молодых ученых (Казань, 2002; 2003); на X научно-практической конференции Поволжского региона «Окружающая среда и здоровье населения» (Казань, 2002); на VI КАНТовской научно-практической конференции «Проблемы человека в современном обществе» (Казань, 2003); на юбилейной научной конференции с международным участием «Современная микробиология - клинической медицине и эпидемиологии» (Санкт-Петербург, 2003); на VI Международном симпозіуме «Диагностика и лечение заболеваний, ассоциированных с Helicobacter pylori» (Екатеринбург, 2003).
Публикации. По материалам диссертации опубликовано 11 научных работ, получен патент на изобретение.
Объем и структура работы. Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы, главы с описанием материалов и методов
исследования, раздела собственных исследований, включающего три главы, заключения, выводов, практических рекомендаций, списка литературы, содержащего 36 отечественных и 201 зарубежных источников, приложений. Материалы диссертации изложены на ПО страницах машинописного текста, иллюстрированы 12 таблицами, 12 рисунками. Весь материал, представленный в диссертации, получен, обработан и проанализирован лично автором.