Введение к работе
Актуальность проблемы. В последние годы значительно возросло количество гнойно-воспалительных заболеваний, вызванных условно патогенными микроорганизмами. Летальность при различных нозологических формах составляет от 3 до 60 %, достигая при генерализации инфекционного процесса уровня доантибиоти-ческого периода (С.В.Прозоровский, Л.А.Генчиков, 1984; М.И.Кузин, В.М.Костюченок, 1990; D.A.Whitelaw et al., 1992).
Ежегодно в России и странах СНГ регистрируется около 5 млн. больных с гнойно-воспалительными заболеваниями (А.А.Воробьев и др., 1996). Известно, что годовой экономический ущерб от госпитальных инфекций в странах с развитой медициной (Англии, США) составляет 2,4-10 млрд. долларов (P.S.Brachman, 1981; Р.П.Венцел, 1990), а присоединение гнойно-септических осложнений в процессе пребывания больных в стационаре в 2 раза увеличивает стоимость лечения одного больного (М.Л.Лившиц, Е.Б.Брусина, 1992).
Развитию инфекций способствуют, с одной стороны, формирование и широкое распространение штаммов возбудителей, отличающихся высокой резистентностью к различным антибактериальным препаратам, в том числе, к антибиотикам (И.А.Верещагин и др., 1995; С.В.Сидоренко, 1995; R.Meyer, 1994); с другой стороны, снижение естественного иммунитета макроорганизма в результате травм, ожогов, родов, хирургических операций, диагностических манипуляций, экологического неблагополучия.
В этиологической структуре гнойно-септических заболеваний значительное место занимают стафилококк, протей, сипегнойная палочка, выделяемые из патологического материала в виде монокультур, но особенно часто в ассоциации друг с другом (М.И.Кузин, В.М.Костюченок, 1990; М.А.Галёев, Т.И.Мустафин, 1993; А.Б.Бакиров, З.Г.Габидуллин, 1995; А.З.Смолянская и др., 1995; М.С.Farinas et al., 1995; E.Ritter et al., 1995).
В связи с этим для профилактики и лечения инфекций, вызываемых условно патогенными бактериями, остаются актуальными не только разработки новых химиотерапевтических средств, но и препаратов, стимулирующих специфический иммунитет (Л.А.Левина и др., 1983; Н.Б.Егорова и др., 1988; А.Ф.Мороз и др., 1988).
Для профилактики гнойно-воспалительных заболеваний и внут-рибольничных инфекций в практике здравоохранения используют-
ся специфические моновакцины: стафилококковый анатоксин (В.В.Смирнов, А.Е.Вершигора, 1988); цитоплазматический антиген стафилококка (В.Я.Прохоров и др., 1988); стафилококковая вакцина (Н.Б.Егорова и др., 1991); вакцина протейная из антигенов сухая (Л.С.Крейнин и др., 1985; К.Г.Каверина, 1990); поливалентная химическая протейная вакцина (Ю.М.Грабарь, 1989); синегнойная поливалентная корпускулярная убитая вакцина (А.Ф.Мороз, 1986); пиоиммуноген (Е.С.Станиславский и др., 1983); псевдомонас-вак-цина (Т.А.Макаренко, 1994); анатоксин синегнойной палочки (Н.А.Михайлова и др., 1993, 1995).
Поскольку гнойно-воспалительные заболевания характеризуются полиэтиологичностыо и возможной сменой возбудителя, в нашей стране и за рубежом ведутся исследования по получению ассоциированных препаратов из условно патогенных бактерий. Анализ данных литературы по ассоциированной и комплексной иммунизации с использованием анатоксинов и бактерийных препаратов свидетельствует, что применение их позволяет значительно сократить время на создание полноценной защиты одновременно к нескольким возбудителям (Е.С.Станиславский и др., 1981; В.А.Ко-чегкова и др., 1982; Р.Л.Московцева и др., 1987; D.Wasserman, 1980).
В последние годы разработаны и успешно применяются в клинике для терапии воспалительных заболеваний органов дыхания ассоциированные вакцины, полученные из микробных клеток и антигенов условно патогенных бактерий: бронховаксом, респивакс, бронхомунал, бесклеточная поликомпонентная вакцина ЦНИИВС им.И.И.Мечникова (Н.Б.Егорова и др., 1983, 1991; Г.Л.Осипова, 1993; A.Basacopol et al., 1986; A.G.Palma-Carlos, M.L.Palma-Carlos, 1990). Однако препараты для вакцинопрофилактики смешанных форм гнойных инфекций не созданы.
Цель работы. Разработка ассоциированной вакцины на основе протективных антигенов, наиболее часто встречающихся в клинике возбудителей (стафилококк, протей, синегнойная палочка), и изучение профилактической эффективности препарата.
Задачи исследования:
подобрать состав вакцины и изучить взаимодействие антигенов в ней;
изучить в эксперименте иммунобиологические свойства препарата (протективную активность, сенсибилизирующие свойства, токсичность);
- изучить безвредность, реактогенность и антигенную активность ассоциированной вакцины на людях.
Научная новизна и практическая значимость работы
Впервые сконструирована новая стафило-протейно-синегнойная вакцина адсорбированная жидкая (СПСА-вакцина), представляющая собой комплекс сорбированных на гидроокиси алюминия очищенных концентрированных анатоксинов стафилококка, синегной-ной палочки, цитоплазматического антигена стафилококка и протейной химической вакцины. Обосновано профилактическое назначение препарата против инфекций, обусловленных условно патогенными микроорганизмами.
На основе математического моделирования определены оптимально сбалансированные дозы монокомпонентов.
Выявлена стимуляция иммуногенной активности стафилококкового анатоксина протейными антигенами и анатоксином синегной-ной палочки.
Установлена высокая иммуногенная активность, безвредность, низкие сенсибилизирующие свойства препарата в экспериментах на животных, отработаны методы контроля его специфической активности и безвредности.
При испытаниях на людях препарат оказался иммунологически безопасным, хорошо переносимым, проявил высокую специфическую активность.
Новизна проведенных исследований подтверждена патентом РФ № 2035189 «Способ получения ассоциированной вакцины для профилактики инфекций, вызываемых условно патогенными бактериями», зарегистрированным 20.05.95 г.
Разработана и утверждена нормативно-техническая документация на препараты:
-
Диагностикум эритроцитарный синегнойный антигенный сухой (ВФС 42-361ВС-92 и ЭПР № 405-92). Инструкция по применению утверждена Минздравом РФ (1992).
-
Ассоциированная стафило-протейно-синегнойная вакцина (ВФС и ЭПР № 537-95).
Работа выполнена в рамках Союзной программы С-23 «Разработать и внедрить в практику здравоохранения эффективные меры борьбы и профилактики внутрибольничных инфекций и сепсиса».
Апробация работы
Материалы диссертации доложены на республиканской конференции «Иммунобиологические препараты» (Уфа, 1983); республиканской конференции «Иммунобиологические препараты для профилактики, диагностики и лечения инфекционных заболеваний» (Уфа, 1985); 1-ой Всесоюзной конференции «Молекулярная структура бактериальных токсинов и генетический контроль их биосинтеза» (Москва, 1985); научной конференции «Научно-производственные проблемы улучшения качества вакцинно-сывороточ-ных препаратов» (Ташкент, 1986); республиканской научной конференции «Вопросы медицинской биотехнологии и иммунопрепа-ратов» (Уфа, 1988); Всероссийском семинаре-выставке диагностических, профилактических и лечебных иммуно-биологических препаратов, производящихся в НПО и предприятиях концерна «Им-муноген» (Уфа, 1992); научно-практической конференции, посвященной 25-летию со дня основания НИИ военной медицины МО РФ «Актуальные проблемы разработки медицинских средств и методов сохранения и восстановления боеспособности личного состава вооруженных сил» (Санкт-Петербург, 1994); международном симпозиуме, посвященном 150-летию со дня рождения И.И.Мечникова и 90-летию Уфимского НИИВС им. И.И.Мечникова НПО «Иммунопрепарат» (Уфа, 1995).
Структура и объем диссертации
Работа изложена на 143 страницах машинописного текста, включает 29 таблиц, 6 рисунков, состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, заключения, выводов, указателя литературы, содержащего 207 источников (138 отечественных и 69 иностранных).