Введение к работе
АКТУАЛЬНОСТЬ ПРОБЛЕМЫ. Нормальная микрофлора репродуктивного тракта женщин является показателем здоровья этой экологической ниши и играет большую роль в поддержании нормального микроэкологического статуса, являясь бактериальной составляющей колонизационной резистентности (И.А. Бочков с соавт., 1995).
При изменении физиологического состояния женщины (пубертатный период, менструальный цикл, беременность, климактерический период), характеризующемся сдвигом баланса половых гормонов происходит качественное и количественное изменение микрофлоры родовых путей (Л.Г. Кейт с соавт., 1988; В.А. Голубев, 1993,).
Изменение микробиоценоза половой системы женщины увеличивает риск внутриутробного инфицирования плода, ведет к возникновению самопроизвольных выкидышей и преждевременных родов, возникновению воспалительных заболеваний гениталий (С.А. Анкир-ская с соавт., 1988; J.L. Thomason et al., 1989).
В связи с этим особое значение приобретают вопросы диагностики и коррекции генитального дисбиоза, которые до настоящего времени окончательно не решены и связаны с проблемой выбора критериев оценки состояния микробиоценоза репродуктивной системы женщин (Н.А. Hammill, 1989).
Микробиологический статус половых органов женщин чаще оценивают с учетом количественных показателей, т.е. определяют отдельные виды микроорганизмов и их количество в занимаемой экологической нише (К.Я. Соколова с соавт., 1988), при этом не принимаются во внимание биологические свойства бактерий, что не позволяет достаточно полно охарактеризовать микробиоценозы описываемых эпитопов при дисбиотических состояниях.
Между тем, важно оценивать качественную сторону микрофлоры, которая отражает возможность микроорганизмов длительно находиться в занимаемой экологической нише и противостоять защитным силам организма хозяина. Такая способность микроорганизмов реализуется через факторы персистенции ответственные за инактивацию механизмов защиты хозяина (лизоцима, комплемента) и названные как антшшзоцимная активность (АЛА) и антикомплементарная активность (АКА).
Было показано, что возможность хронизации и тяжесть течения воспатительных заболеваний внутренних половых органов зависит от АЛА возбудителей (Л.А.Первушина, 1990). С другой стороны, по
данным А.В.Валышева (1996), были обнаружены высокие по сравнению с фоновым уровнем значения АЛА и АКА у условно-патогенных энтер о бактерий при микроэкологических нарушениях в кишечнике, что подтвердило их этиологическую роль в развитии дисбиоза и явилось основой для разработки способа диагностики дисбиоза кишечника с учетом персистентных свойств микроорганизмов.
Однако факторы персистенции микрофлоры биотопов репродуктивного тракта женщин исследованы не были. Решение этого вопроса позволило бы расширить знания о роли факторов персистенции микрофлоры в формировании нормо- и патобиоценозов половой системы женщины, а также определить дополнительные диагностические критерии эффективности корригирующей терапии.
ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ. Целью настоящего исследования явилось определение биологической роли факторов персистенции при дисбиотических состояниях женского репродуктивного тракта во время беременности и при воспалительных заболеваниях гениталий, а также регулирующего влияния половых гормонов на бактерии in vitro под контролем персистентных свойств.
Основные задачи исследования:
-
Определить видовой состав аэробного спектра микрофлоры репродуктивного тракта женщин во время беременности и при воспалительных заболеваниях внутренних половых органов.
-
Определить и сравнить факторы персистенции микроорганизмов, выделенных у женщин обследуемых групп.
-
Определить влияние препаратов половых стероидных гормонов (прогестерона и эстриола) на факторы персистенции и ростовые характеристики микроорганизмов.
НАУЧНАЯ НОВИЗНА. Впервые исследованы антилизоцим-ная и антикомплементарная активности микрофлоры эпитопов репродуктивной системы у женщин с воспалительными заболеваниями внутренних половых органов и у беременных женщин. Установлена высокая распространённость факторов персистенции у микроорганизмов, населяющих биотопы репродуктивной системы женщин. Выявлено наличие микроэкологических нарушений с увеличением выраженности АЛА и АКА микрофлоры репродуктивной системы у женщин с воспалительными заболеваниями внутренних половых органов по сравнению с группой здоровых.
Определено изменение массивности обсеменения микроорганизмами влагалища и факторов персистеншш бактерий в зависимости от сроков гестации. Наблюдались дисбиотические явления на ранних сроках беременности, которые проявлялись дефицитом лактофлоры и
выделением стафилококков и кишечных палочек с выраженными факторами персистенции. Было выявлено снижение АЛА и АКА микроорганизмов в зависимости от увеличения сроков беременности.
Предложен фотометрическиий способ определения антилизо-цимной активности бактерий, который позволил расширить диапазон микроорганизмов, тестируемых по этому признаку (Положительное решение формальной экспертизы ВНИИГПЭ по заявке на изобретение №97101325/13(001287) от 27.01.97.
Нами было обнаружено регулирующее влияние препаратов половых стероидных гормонов на ростовые и персистеитные характеристики микроорганизмов. Прогестерон оказывал стимулирующее влияние на развитие популяции стафилококков и ингибировал рост кишечной палчки. Эстриол подавлял развитие популяций изученных микроорганизмов. При этом было определено подавляющее действие прогестерона и эстриола на факторы персистенции стафилококков и эшерихий.
ПРАКТИЧЕСКАЯ ЦЕННОСТЬ. Для тестирования антилизо-цимной активности микроорганизмов в исследовательской работе и для решения практических медицинских задач предложен фотометрический способ определения антилизоцимной активности, который позволил определять указанный признак у труднокультивируемых и антагонистически активных микроорганизмов.
На основе полученных данных о влиянии препаратов половых стероидных гормонов на персистентпые и ростовые показатели бактерий разработан способ коррекции дисбиотических состояний репродуктивной системы женщин препаратом «Овестином», позволяющий добиться нормализации микробиоценоза за счет снижения фаісгоров персистенции микрофлоры влагалища и увеличения количества лак-тобактерий.
Материалы диссертации используются в учебной программе по микробиологии в Оренбургской государственной медицинской академии.
-
Факторы персистенции микрофлоры эпитопов репродуктивной системы женщин широко распространены и являются маркерами дисбиотических состояний при воспалительных заболеваниях внутренних половых органов.
-
Препараты половых стероидных гормонов оказывают регулирующее влияние на ростовые и персистеитные характеристики микроорганизмов.
АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ. Результаты проведенных исследований доложены на молодежном научном конгрессе «Проблемы региональной экологии» (1997), П Российской конференции «Персистенция микроорганизмов» (1997), Областной конференции акушеров-гинекологов (1997) . Диссертация была апробирована на совместном заседании кафедр микробиологии , акушерства и гинекологии ОГМА и Института клеточного и внутриклеточного симбиоза УрО РАН (1998).
ПУБЛИКАЦИИ. По теме диссертации опубликовано 4 печатных работы, получено положительное решение формальной экспертизы по заявке на изобретение № 97101325/13(001287) от 27.01.97 «Способ определения антилизоцимной активности микроорганизмов».
ОБЪЁМ И СТРУКТУРА ДИССЕРТАЦИОННОЙ РАБОТЫ.
Диссертация изложена на 130 страницах машинописного текста и содержит введение, обзор литературы, материаты и методы, пять глав собственных исследований, заключение, выводы и указатель литературы, включающий 95 отечественных и 75 иностранных научных источников.
Иллюстрации представлены 4 таблицами и 20 рисунками.