Введение к работе
Актуальность проблемы. Организм человека и его микрофлора, как единая экологическая система, находятся в состоянии динамического равновесия, поддерживаемого процессами саморегуляции. Однако под действием техногенных факторов среды обитания компенсаторные возможности экосистем не беспредельны. В связи с этим отмечается рост числа дисбиотических нарушений различных биотопов организма человека, что приводит к формированию новых микробных сообществ (патоценозов), развитию бактерионосительства [Шендеров Б.А., 1992; Алимов А.Ф., 1993]. Дисбиотические изменения в микрофлоре способствуют развитию и широкому распространению внутри-больничных, оппортунистических инфекций [Семина Н.А. с соавт., 1995].
Одной из форм нарушения нормальной микрофлоры слизистой оболочки переднего отдела носа является стафилококковое бактерионосительство [Николаева Т.А., 1982]. Носители патогенных стафилококков - основные источники распространения заболеваний микробной этиологии в неинфекционной клинике [Филиппович Ю.В. с соавт., 1983]. Стафилококковые бактерионосители относятся к группе риска, так как у них самих часто возникают различные формы инфекционной патологии [Бойко А.В., 1990; Кулагина Е.П., 1995]. Вместе с тем, условия формирования микробного биоценоза слизистой носа у здоровых лиц разного возраста и у стафилококковых бактерионосителей изучены недостаточно. Имеются данные о роли антилизоцимной и антиимму-ноглобулиновой активности золотистых и эпидермальных стафилококков в формировании бактерионосительства [Чернова О.Л., 1989; Михайлова Е.А. с соавт., 1990]. Показано, что факторы персистенции золотистых и эпидермальных стафилококков являются информативными признаками при дифференциации резидентных и транзиторных бактерионосителей [Бухарин О.В., Дерябин Д.Г., 1994; Матюшина СБ., 1996]. Выявлены закономерности внутривидового разнообразия золотистых и эпидермальных стафилококков и селекціпі определенных биоваров в разных экологических нишах [Дерябин Д.Г., 1997].
Однако, комплексная оценка факторов колонизации и персистенции у таксонов, составляющих микробный биоценоз слизистой оболочки носа, не проводилась. Не изучались особенности формирования микробного биоценоза слизистой оболочки носа у взрослых и детей - носіггелей S.aureus и лиц, свободных от носительства. Колігяественная и качественная оценка микробных биоценозов слизистой носа носителей S.aureus и лиц, свободных от носительства, с учетом возраста позволит получить сведения о закономерностях фор-
мирования микрофлоры определенной экологической ниши в норме и при патологии, что может быть использовано для разработки способов прогнозирования и санации стафилококкового бактерионосительства и, следовательно, для профилактики гнойно-воспалительных заболеваний.
Целью исследования явилось изучение особенностей формирования микрофлоры слизистой оболочки носа у стафилококковых бактерионосителей и лиц, свободных от носительства S.aureus, разного возраста с учетом перси-стентных и антагонистических свойств бактерий-симбионтов.
Основные задачи исследования:
-
Изучить качественный и количественный состав бактериальной нормоф-лоры слизистой оболочки носовой полости взрослых и детей 10-12 лет.
-
Определить дисбиотические качественные и количественные изменения в биоценозах слизистой носовой полости носителей S.aureus различного типа, по сравнению с неносителями, с учетом возраста обследуемых .
-
Оценить роль факторов персистенции и антагонизма основных таксонов микрофлоры в формировании биоценоза слизистой оболочки носа у носителей и неносителей разного возраста.
-
Изучить влияние электролизного водного раствора гипохлорита натрия на персистентные и вирулентные свойства S.aureus и разработать эффективный способ санации резидентных носителей.
Основные положения, выносимые на защиту:
-
Нормальная микрофлора слизистой оболочки носа у взрослых и детей 10-12 лет по количественным и качественным критериям дифференцируется на основную, добавочную и случайную группы: установлены возрастные отлігчия в составе выделенных групп.
-
У резидентных и транзиторньгх носителей S.aureus разного возраста, в сравнении с неносителями, формируются своеобразные микробные биоценозы, отличающиеся по таксономическим характеристикам, количественным показателям, уровню экспрессии факторов персистенции и антагонизма.
-
Электролизный раствор гипохлорита натрия в концентрациях 1,7-1,9 мг/л подавляет факторы персистенции и вирулентности S.aureus и может быть использован для санации стафилококкового бактерионосительства.
Научная новизна. Впервые по количественным и качественным критериям проведена дифференциация нормальной микрофлоры слизистой оболочки носа здоровых взрослых людей и детей 10-12 лет на 3 группы: основная, добавочная и случайная. Определены возрастные особенности формирования
микробного биоценоза слизистой носа.
Выявлены закономерности развития дисбиоза у резидентных и транзи-торных стафилококковых бактерионосителей в разных возрастных группах на основе данных по изменению количественного и качественного состава микрофлоры слизистой носа. Биоценоз слизистой носа у носителей S.aureus, в отличие от неносителей, характеризовался меньшими значениями ОГГМО и ПМО основной кокковой микрофлоры, малым видовым разнообразием, менее равномерным распределением видов, ослаблением и инверсией межмикробных связей. Формирование стафилококкового бактерионосительства сопровождается изменением структуры стафилоценоза - снижением количественной представленности и числа видов КОС, изменением состава доминирующей стафилофлоры (наряду с S.epidermidis, отмечалось доминирование таких видов КОС, как S.haemolyticus, S.hominis, S.xylosus).
Установлена роль факторов персистенции и антагонизма у разных таксонов микробного симбиоза в формировании нормальной микрофлоры слизистой носа и в развитии дисбиоза при стафилококковом бактерионосительстве. В норме (у неносителей S.aureus) основная микрофлора слизистой носа (КОС) характеризовалась наличием бактериоциногенных свойств и признаками межвидового антагонизма. При резидентном носительстве S.aureus штаммы КПС и отдельные таксоны добавочной микрофлоры помимо высокой антагонистической активности обладали выраженными персистентными свойствами. В биоценозах носителей и неносителей S.aureus происходила селекция биоваров основных таксонов с определенным набором персистентных и антагонистических свойств. Выявлена взаимосвязь показателей количественной представленности и биологических свойств штаммов первых двух домішируюгдих видов стафилококков в биоценозах носителей S.aureus и неносителей, что свидетельствует о симбиотических взаимоотношениях представителей стафилоценоза при колонизации слизистой оболочки носовой полости.
Разработан способ подбора оптимальных доз антисептика - электролизного раствора гипохлорита натрия для санации резидентных стафилококковых бактерионосителей (положительное решение о выдаче патента на юобретение №95121175/13(037028) от 5.11.97).
Практическая ценность. Полученные новые знания по закономерностям формирования микробных биоценозов слизистой оболочки носа в норме и при развитии носительства S.aureus могут быть использованы для разработки методов ранней диагностики дисбиоза, прогнозирования формирования ре-
зидентного стафилококкового бактерионосительства и своевременной его профилактики. Разработанный способ определения эффективной дозы электролизного водного раствора гипохлорита натрия для лечения и профилактики гнойно-воспалительных заболеваний апробирован на базе Оренбургского областного Центра Госсанэпиднадзора, внедрен в практику работы 1-ой клинической больницы г.Оренбурга и Оренбургской областной клинической больницы (акты внедрения). Результаты работы включены в программу обучения студентов Оренбургской государственной медицинской академии.
Апробация работы. Основные результаты исследования были доложены и обсуждены на XII итоговой конференции молодых ученых-медиков "Молодые ученые - здравоохранению", посвященной 50-летию ОГМИ (1994, г.Оренбург); региональной конференции молодых ученых Урала и Поволжья, посвященной 250-летию Оренбургской губернии и 60-летию образования Оренбургской области (1994, г.Оренбург): межвузовской научно-практической конференции молодых ученых и студентов "Актуальные вопросы экологии" (1994, г.Оренбург); 60-й научной конференции студентов и молодых ученых Башкирского государственного медицинского института (1995, г.Уфа); областном совещании врачей - бактериологов центра Госсанэпиднадзора (1995, г.Оренбург); Российской научной конференции "Персистенция микроорганизмов" (1997, г. Оренбург).
Публикации. По теме диссертации опубликовано 7 печатных работ, получено положительное решение ВНИИГПЭ о выдаче патента на изобретение №95121175/13 (037028).
Объем її структура диссертации. Диссертация изложена на 154 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, трех глав результатов собственных исследований, заключения, выводов и приложений. Библиографический указатель включает 117 источников отечественной и 69 источников зарубежной литературы. Иллюстрации представлены 18 таблицами и 22 рисунками.