Введение к работе
- з -
Актуальность проблей ы Метод лиофильного высушивания уже иного лет как вошэл а повседневную практику для сохранения исходных свойств биологических объектов. В последнее время особенно широко он применяется в связи с разработкой и доступностьп высоко эффективного оборудования. Все живые вакцины, в том числе и чумная, выпускается в лиофильновысушенном виде. Усовершенствовании способа высушивания посвяшэно большое количество работ. Однако все возможности этого метода ещэ не исчерпаны. Несмотря на то, что НГД на чумнуп вакцину при выпуске обуславливает высокое качество препарата, основным недостатком остается значительная гибель и. к. в процессе хранения.
Известно, что почти все технологические этапы приготовления чумной вакцины довольно глубоко изучены. При этом, с нашей точки зрения, не уделено должного вникания роли остаточной влажности при длительном хранении препарата. Литературные данные в этом отношении довольно разноречивы. Ряд авторов не отмечает разницы в выживаемости микробов при остаточной влажности от 2,0 цо 6.8S ( К.Е. Долинов, 19ББ; С. Л. Степанова, 1960; ЕЕЗахарина я Л. U. Агафонова, 1966" и др.), в том числе и чумной вакцины [А. К. Скуратова, 19Б5; А.ККрайяова с соавт., 1958,1960; Ї. В. Шчниковз, 197Б). Другие исследователи описывает наличие обратной зависимости между показателем остаточной влажности сухих трепаратов и выживаемостьп шкробов (С. Г. Колесов, 1S59; 3. И. Бланков, Л. Л. Клебанов, 1961; Б. Ы. Париж, 1963, 1968; К.Е.ДО-шнов, 1969; А.И.ТИНКЄР, 1971; И. Е. Бекер, 1981; А. М. Белоус, I Д. Цветков, 1985; Hover R. 0., 1979).
Анализ литературных данных говорит о том, что медленнее іроисходит гибель при низких показателях остаточной влажности, 'ледовательяо, при изготовлении чумной вакцины ems значительным >езервом остается именно это звено, поскольку <СС 42-32ВС-90 до-ускает количество остаточной влаги до 47.. Указанный показатель ыл введен в документации очень давно, когда режимы высушивания умной вакцины отрабатывали на препарате изготовленном на саха-оэо-желатиновой среде высушивания.
- < -По данным К.Е.Долинэва (1969),достигнуть низких величин остаточной влажности можно за счет интенсификации процесса высушивания. С этой целы: предлагается повысить температуру подогрева ДО 40С (ЬЛ-СубботиЕЗ, 1957; Б. U. Шриж С соавт. 1963).
Таким образом, основной задачей является выяснение максимально допустимой температуры подогрева чумной вакцины при ее лиофилизации.
Следовательно, имеется реальные предпосылки тому, что можно оптимизировать режим лиофилизации чумной вакцины, снизив в 1,5-2 раза процент остаточной влажности в препарате без существенного изменения его качественных характеристик. Этим самым можно добиться стабилизации дозы в период срока годности вакцины.
Решение данной проблемы затрагивает еще один аспект, на который ранее практически мало обрап^али внимания. Все закономерности, связанные с отработкой режимов лиофилизации, применением различных стабилизаторов, степени разрежения водуха, температуры хранения чумной вакцины и т. д. изучали в строго стандартных условиях, связанных с единым объемом ампул (6мл) и количеством суспензии в них (2мл). Изменение вместимости сосуда и тем более вида материала контейненров влечет за собой отработку целого ряда параметров. Особенно актуальным стал вопрос замены бьющейся тары современной, изготовленной из полимерных материалов. Важным является также и решение вопроса стерильного переноса взвеси из ампулы во флаконы с изотоническим раствором хлорида натрия в соответствии с количеством доз, используемой серии вакцины. Однако все эти проблемы упирается в вопрос сохранения остаточной влажности препарата в контейнерах большого объема, в которых по техническим причинам нельзя создать хотя бы частичное разрежение воздуха.
.г
Все это явилось основанием для изучения режимов лиофилизации чумной вакцины ЕВ, обеспечивающих низкую остаточную влажность препарата, способствущую более полному сохранению ж. м. к. в человекодозе.
- 5 -Цель работы. Отработать режимы лиофилизации чумкой вакцины ЕВ, в зависимости от вида контейнера, обеспечиващие остаточную влажность препарата не выше 2-2,5% и снижение за счет этого гибели ж,м.к. в дозе в период срока годности вакцины.
Задачи исследования:
-
Проанализировать качество комшрческих серий чумной вакцины ЕВ, выпускаемой в НШИЙ Кавказа и Закавказья, в зависимости от остаточной влажности сухой таблетки.
-
изучить возможность снижения остаточной влажности чум-ной вакцины до 2-2,57. в процессе производства за счет интенсивного подогрева препарата на стадии завероэвня сушки.
-
Достичь более полного сохранения Ж.И.К. в человекодозе вакцины на период срока ее годности.
-
Определить степень повреждения ж. к. к. при использовании различных режимов лиофилизации.
5. Отработать режим лиофилизации в полимерных контейнерах.
Научная новизна и практическая
значим ос ть
Проведен экспертный анализ качества коммерческих серий чум-зЛ вакцины, выпускаемой НЙПЧИ Кавказа и Закавказья. Новыми явился данные о значительном колебании остаточной влажности меж-' ампулами разных серий и внутри каждой из них, несмотря на из-товление препарата в строгом соответствии с НГД.
Установлено, что низкие показатели влаги в сухой таблетке
эсобствуот значительному сохранение ж. ы. к. в прививочной дозе
ганцу срока годности чумной вакцины и повышают термостабиль-
ть препарата особенно при высоких температурах хранения
+1).
Впервые разработаны режимы лиофилизации чумной вакцины ко-зые предусматривает для удаления связанной воды подогрев ма-іала до 50 С. Это позволяет получать низкую остаточную влаж-ь без увеличения общей продолжительности лиофилизации и сни-я качества препарата.
Впервые разработан новый способ консервации чуной вакцины
в полимерных пакетах, который предусматривает вытеснение газовой среды после лиофилизации за счет тугого скатывания юс и адсорбции диффузной влаги из внешней среды силикагелем во вторичной упаковке (авторское свидетельство N 1510154 от 22 мая,1989г, "Способ консервации чумной вакцины").
Предложена система для ресуспенаирования сухой таблетки и стерильного переноса содержимого ампулы во флакон с изотоническим раствором хлорида натрия в соответствии с количеством чело-векодоз, (авторское свидетельство N 1491522 от 8 марта, 1989г. "Устройство для введения лекарственных веществ).
Разработана нормативно-техническая документация предусмзт-ривающаяя оптимизированный режим лиофилизации чумной вакцины, t обеспечивающий низкие показатели остаточной влажности (до 2,5 не зависимо от используемой вакуум-сушильной аппаратуры. Внедрение, в.практику.
-
Разработан режим лиофилизации чумной вакцины с использованием высоких температур (до 50С) подогрева материала на конечном этапе:сушки, обеспечивающий содержание остаточной влаги не более 2,5Х (Изменения N 2 к регламенту производства вакцины чумной живой сухой N 37-88, утвержденные директором НИПЧИ Кавказа и Закавказья 28 ноября 1990г, согласованные с директором ГИСК им. Л. А. Тарасовича 28 декабря 1990т).
-
Штодическиё приемы, разработанные в процессе выполнения диссертационной' темы используются в производственном отделе НИПЧИ Кавказа и Закавказья.
Апробация работы материалы диссертации доложены на 5 краевой научно-практической конференции, посвященной БО-летип противочумной службе Кавказа (Ставрополь, сентябрь 1985), на 6 краевой научной конференции, посвященной 70-летию Великой Октябрьской Социалистической Революции (Ставрополь, декабрь 1987), на Всесоюзном совещании сотрудников противочумной системы (Саратов, «зрт 1988), на межведомственной конфереции "Актуальные вопросы вакцинопро-филактики особо опасных инфекция"(Киров, март 1991), на межлабораторных конференциях НИПЧИ Кавказа'и Закавказья (Ставрополь,
- 7 - l h
Публикации
Основное содержание работы отражено в 12 опубликованных работах.
Объем и структура работы.