Введение к работе
Актуальность проблемы,
Дисбактериозы кишечника продолжают оставаться одной из важных проблем современной медицини, что связано как с увеличением числа этиологических факторов (применение антибиотиков, инфекционные заболевания, ионизирующее излучение, стрессовые перегрузки и др.і, так и с недостаточной эффективностью существующих терапевтических средств (Гончарова Г.И. с соавт., 1989; Ван дер Ваая Д., 1892; Mltsuoka Т., 1G69I.
В связи с этим, до настоящего времени остается актуальной задача разработки методов поиска штаммов микроорганизмов-представителей индигениой микрофлоры кишечника, в частности лактобактериа, перспективных для создания на их основе высокоэффективных бактерийных препаратов-эубиотикоо (Коршунов В.М. с соавт., 1905; Холодова И.П..1980; Cnateau N. et al., 1995).
Перспективным подходом, позволяющий с одноп стороны определять биологическио свопства микроорганизмов во вэаиыодеяствии с-организмом хозяина и, с другой стороны, проводить отбор штаммов лактобактерий, обладающих высокой колонизирующей способностью и антагонистической активностью в условиях in vivo, является применение оезмикробиих животных а комплексе с гнотобнологической технологией (Интмэаров М.М., 1966; Барэашка-Попова С.Н., 1990; Ефимов Б.А. с соавт., 1992; Prater П., 19681.
Известно, что инднгенные лактобактерий являются естественными стимуляторами иммунной системы макроорганиама (Мальцева Н.Н. с соавт.,1992; Perallgnn С, 19001. Однако, до настоящего времени при создании препаратов-эубиотиков не учитывается возможность выраженных различий иммунотропных свойств различных итаммов лак-
- 2 -тобактерий и не исследуется их воздействие на иммунологические п
раметры.
Широкая распространенность Оактериоцин-опосредованных конкурентных взаимоотношений среди лактобактерия iKlaenhammer Т.н.., 1906) указывает на необходимость исследования участия бактериоциногении в регуляции состава микробиоценоза кишечника с цель» создания препаратов-эубиотиков, не оказывавших повреждающего действия на индигенную лактофлору, и не подверженных влияние бактериоцинов собственных лактобактерия кишечника хозяина.
Таким образом, поиск перспективных штаммов лактобактерия с учетом способности эффективно колонизировать кишечный тракт макроорганизма и выраженно ингибировать рост и размножение условно-патогенных микроорганизмов целесообразно проводить методами in vivo с использованием гнотобиологических моделей. При этом необходимо принимать во внимание возможность бактерио-цин-опосредованных конкурентных взаимоотношений экзогенных лактобактерия с индигенной лактофлорой и выраженность иммуномо-дулирующих свойств отбираемых штаммов лактобактерий.
Цель исследования.
Изучение бактериоцин-опосредованных взаимодействия лактобактерия, их иммуномодулируюшей, антагонистической активности и колоиизируощея способности с использованием гнотобиотехнологи-ческих методов In vivo в применении к создании новых препаратов эубиотиков.
Задачи исследования.
1. Провести сравнительное исследование биологических свой-
- з -ств различных штаммов лактобактерии методами In vitro и In
vivo.
-
Изучить иммуномодулирующие свойства различных штаммов L.acidophilus.
-
Изучить конкурентные взаимоотношения между лактобактери-ями методами In vitro.
-
Исследовать бактериоцин-опосредованные взаимоотношения лактобактерии in vivo с использованием лактацин F-продуцента L.acidophilus П088.
3. Изучить влияние бактериоциногении и чувствительности к бактериоцинам на лечебные свойства лактобактерии при экспериментальном посглучевоы дисбактёркс-зе кишечника.
Научная новизна.
Впервые установлено, что бактериоцин-продуцируюшип. штамм лактобактерии способен эффективно вытеснять чувствительный штамм лактобактерии из кишечника экспериментальных животных: определено, что различные штаммы L.acidophilus проявляют выраженные отличия в иммуномодулирусмея активности. Показано, что точное определение параметров антагонистической активности и колонизируется способности лактобактерии возможно только на моделях In vivo с использованиеи гнотобиотехнологии. Установлено, что применение штамма L.acidophilus 22. непродуцируюшего и нечувствительного к бактериоцинам, увеличивает показатели выживаемости тотально облученных мышея.
Научная и практическая ценность.
На основании полученных экспериментальных-данных предложено использовать при создании препаратов-эубиотиков на основе лактобактерии такие критерии, как степень выраженности иммуностимулирующей активности, способность к продукции и чувствитель-
ііость к бактериоцинам. Показано, что определяющими при изучении
антагонистической активности и приживляемости лактобактерия, должны бить методы In vivo с использованием пютобиологическоя технологии.
Предложено использовать штамм L.acidophilus 22, обладающий естественной полирезистентностью к антибиотикам, способностью колонизировать кишечный тракт, не продуцирующий бактериоцины и устоячивыя к их действию, а также оказывающий лечебный эффект при экспериментальном постлучевои дисбактериозе кишечника для создания на его основе нового бактерийного препарата-эубиотика.
Апробация работы.
Основные положения диссертации доложены на заседании секции гнотобиологии Московского городского общества микробиологов, эпндешюлогов и паразитологов им И.И. Мечникова в январе 1992 г. и на научной конференции кафедры микробиологии РГМУ в цае 1S93 г.
Структура диссертации.
Диссертация написана на русской языке, на страницах иа-шинописн, состоит из введения, 4 глав, выводов и указателя литературы. Библиография включает источник, в той числе работ отечественных авторов и работ зарубежных авторов. Диссертация иллюстрирована таблицами , рисунками.