Введение к работе
Актуальность проблемы. В настояние время утвердилось іірсдртав.гіение о том, что в процрссс филогенетического развития и организме человека сформировалась мнкроэкологическая система : присущим ей сложным динамическим равновесием между фтиолаи-ческим статусом макроорганизма и микробными популяциями, его засслягацими (ЕЙ. Беляев,1988; Ф.ЮГариб и др,1992; А А.Воробьев,1997; А.В.БондаренкоЛ998; T.Matsuoca,1990).
Микрофлора человека, нредггавляюшая один из основных элементов данной системы является важнейшим фактором нсспепифической резистентности организма Её защитная функция в первую очередь связана с блокированием рецепторного аппарата клеток макроорганизма с непосредственной антимикробной активностью и с вшдейепшем на иммунную систему и другеє защитные механизмы (В.Г.Акимкин,1997; T.Lyons et al,1986; S.Gorbach et aL, 1988; Hernchard,l 989; S.Barefood,1991).
Изменения динамичесшо равновесия меж/у компонентами мик-робиоірюза макроорганизма, приводящие к развитию дисбиозов, происходят чаще всего под воздействием антимикробных препаратов, гормонов, нсстероидных противовоспалительных нрепарагов, антацидов, иммунодепрессантов, облучения, в условиях стресса, ітекуріш, инфекционных и неиифещюнных болезней (ЭРПогасвс-кий, 1997; T.Matsuoca.1990).
В связи с этим хсликобактерная инвазия, как инфекционное заболевание, вызывающее гастродоеденальньс поражения, также приводит к дисбиотическим шрунклпймжелудочно-кш печного іракта (ЖКТ), усуіубляющим, и сіюю очередь, основной иатологаческий процесс (Т.КЛонатина и др.,1997; T.Lyons et al., 1986; S.Goibach etal.,1988).
В последние годы при лечении гастродуодсіїальньгх заболеваний (ГДЗ), ассоциированных с Helicobacter pylori (HP), значительно рипирилась нгактика применения атимикробньк препаратов широкого спектра действия и их комбинаций (Н.В.Сафонош и . др.,1995; В.М.Бондарснко,1995; ВР.АкимкинД997). При этом вместе с нежелательными микрооранизмами уничтожается и нормальная микгххрлора, со всеми вьттекающими отсюда последствиями. Поэтому, одним из адекватных путей борьбы с хсликобактсриозом
может явиться восстановление нормального микробиоценозг желудка, в маетности, с помощью эубиотиков (T.Lyons el al.,1986; S.Gorbach et al.,1988). Кроме того, введение в схем} терапии хеликобактерассоциированной * гастродуоденальш» патологии препаратов нробиотиков, содержащих молочно-кисльк бактерии, юложительно отражается на показателях клеточного і гуморального иммунитета. Установлено также противоопухолевое дейепше Lactobacillus delbrueekii, L.casei и других лактобактерш (А.А.Шсіггуліш, 1999; А.П.Златкина,1999; S.Barefood,1991 D.Grachametal.. 1997).
В связи с этим актуальш.ш и перспективньім является изуче ние микробиологических связей в микробиоценозе желудкї больных ГДЗ и возможности коррекции дисбноішісских нарупкнга
МИКробиоЦСШЗа СІЮМОШЬЮ нробиошков.
Цель работы. Установление основных компонент микробиоирноза желу/іка, их свойсш и характера взаимодойсгеия ір хеликобактериозе, а также возможности коррекции выявленны» нарушений.
Задачи исследования.
1 .Усовершенствовать методику оценки микробного биоценоз; желудка.
2.Изучить частоту выделения и биологические свойства ос wnv.ibix компонентов микробиоценоза желудка.
З.Изучить влияние кислотносги желудочного сока (ЖС) ш микробиоценоз желудка.
4.Изучить аигмбиотикочувствительноегь представителей мик робиоцсноза желудка при гастродуоденальномхеликобакгериозе
5.Изучшъ взаимоотншюния между компонентами микробшфно за желудка инвшро.
б.Оиределить возможность коррекции микробиоценоза с но мощью эубиотиков.
Научная новизна. Усоверніснсшовата методика микробиологи ческой оценки микробшпрноза желудка больных ДГД коюрая обес печивает возможность адекватного аїредзления не только HP, но і грибов рода Кандида (ГРК) и лакігййктсрий (Л).
Разработана питательная среда для культивирования и хранс нйя Л на оснош стандартных компонентов: тиогликолсвая среда і гидролизат казеина (Положительное решение Патентной ведомства на изобретение N IHDP 9900726.1 от 24.09.1999 г.).
Определена высеваемость Л и ЖС больных ГДЗ, а также частота обнаружении ассоциаций HP, ГРК и Л в ЖС больных ГДЗ.
Выявлена связь кислотности Ж С больных ГДЗ с частотой обнаружения HP и ГРК. Установлена зависимость кислотности ЖС от возраста больных ГДЗ.
Изучен видшой аютав ГРК и Л ЖС больных ГДЗ m основании морфолого-культуральных и физиолого-биохимических признаков в сочетании скрхтаьтатнрическим млщім цірнгификаї pi ГРК и Я
Определена чувствительность Л и ГРК к антимикробным препаратам и установлена возможность адекватной коррекции микробиоценоза желудка эубиотиками и антибиотиками.
Практическая ценность работы Разработанная методика определении микргфюры желудка позволяет оценить качественный и ко-личественньй состав мжрооргалвмов, входящих в микробиоиеноз желудкаїріГДЗ.
Представленные дамп.іе о чувспшгелі>носпі HP, ГРК и Л к антимикробным нреіиратам моїут был» использованы для повышения адекватности антимикробной терапии хеликобактериоза.
Изученные антагонистические свойства эубиагикои позволяют целе направлено коррегировать микробный состав желудка и близлежащих отделов ЖКТ.
Учет полученных данных о влиянии хронобиологических факторов и кислотности ЖС на частоту обнаружения и эбсемененность грибами ЖС больных ГДЗ повышает эффективность планирования и проведения профилактических и лечебных мероприятий.
Положения, выносимые на защиту.
1 .Разработанная методика микробиологической оценки микро-жоценоза желудка больных ГДЗ доступна и эффективна.
2.Частота обнаружения HP и ГРК взаимосвязана с кислот-гостью ЖС, которая в свою очередь детерминирована возрастом юльных.
З.Выс(жис ангагошктические свойства зубиотиков,в часгаосги Т, по отношению к различным условно-патогенным и патогенным шрооргашгзмам, ііозі5оляют коррегировать микробися^нш желудка, юрмализуя его.
Внедрение в практику. Усовершенствованная методика» ізучения микробиоценоза желудка у больных с ГДЗ внедрена в
практику бактериологической лаборатории НЦХ им. акад. В.Вахидова МЗ РУз.
Методика выделения, идентификации и определения чувстви-тельиости ГРК к антимикробным препаратамвнедрена на кафедре ЛОР - болезней I ТашГосМИ, методика выделения, культивирования и идентификации Helicobaeter (Campylobacter) pylori внедрена в баклаборатории СЭС Медико-санитарного объединения при МЗ РУз, изготовление и использование дисков с современными антимикробными препаратами для определении гшіібюгикоігшмьі хеликобакіеров, лактобактсрий и грибов внедрено к баклаборатории СЭС МСО МЗ РУз, в лаборатории Молекулярной эпидемиологии и специфической профилактики іщрещюннькзахшваншіНИЮМИЗМЗРУзивРКБ N 1.
По результатам исследований составлено и утверждено МЗ РУз информационное письмо "Использование препарата Контролок при эрадикации Helicobacter pylori у больных язвенной болезнью желудка и двенадцатиперстной кишки" (2000 г.).
Апробация работы Материалы и основные положения диссергащюнной работы доложены го Реаіубликаїской научне-пракпркской конференции ''Вахидовские чтения - 98. Актуальны; вопросы гекешгрукітаной хирургии ишірю;р и желудка" (Таіікснг,1998), на Ршіу&пжанском коллоквиуме, посвященном независимости Узбекисгана "Наука Узбекистану" (Таіпкенг,1998), га Научн" ііракггической конференции, і юаіяі ценной 80-летию ^ чіНИИВС (Таікент,1999), на симпозиуме "Н2-блокаторы в гастроэнтерологии. Квамател - фамотидин завода Гедеон Рихтер" (Тапкент,1999), на заосдании Реаіубликанского общества врачей-лаборангов (Ташкент, 2000), на IV Ингсрнащошыюм Евро-Азиатском ївсгрозніїегхілоіическсм Коирсссе (ТаїкеїиДХЮ), го П съезде микробиологов Узбекисгана (ТашенгДШ), ш Рсаіубликанской конференции го внутгмбольничньм инфекциям (ТашкенгЛШ), на межлабс|игорной конферешрі НЛО НЦХ им ВБахидога (ТапкенгДХЮ) , на шжотдедаиеском научном семинаре НЦХ им.ВВахидова (Ташке нт,2000), на Ученом совете Инстигута микробиологии АН РУз (ТшкенгДХЮ), на научном семинаре ТапИУВ МЗ РУз (ТапкснгДЮ), на шучном семинаре в институте Генетики и жтериметэдьной биологии расгсний АН РУз (ТаикенгДЮО).
Публикации. По материалам диссертации опубликовано 19 научных рабаг (и т.ч. 6 журнальных статей).
Ооъем и структура диссертации. Диссертация написана на 139 страницах машинописного текста. Обстоит из введения, 5 глав, заключения, выводов, практических рекомендаций. Библиографический указатель включает 215 источников, из которых 137 авторов СНГ, а 78 - зарубежных авторов. Работа иллюстрирована 16 таблицами и 28 рисунками.
Настоящая работа выполнена и соответствии с планом НИР Научного цеіггра хирургии им. академика В.Вахидова МЗ РУз в рамках тем ГНТП: "Оптимизация хирургической тактики и результатов лечения при заболеваниях пищевода и желудка с применением новых технологий " ( N Гос.регистрации 01.970005026) и "Разработка методой очистки организма от неблагоприятных химических факторов среды обитания, эндотоксинов и коррекция гомсостаза" (N Гос.регистрации 01.970005033).
Благодарность. Автор выражает глубокую благодарность доктору медицинских наук Баженову Леонилу Григорьевичу за всестороннюю подірржку и научное руководство при работе над диссертацией.
Автор признательна /директору НЦХим. академика В.Вахидова МЗ РУз профессору Акилову Х.А. за предоставленную возможность для выполнения данной работы.
Огромную благо/іаріюсть автор выражает коллективу баклабо-ратории и лаборатории иммунологии научно-лабораторного агдела НЦХ имени В.Вахидова за помощь в проведении исследований.
Автор признательна заведующей лаборатории, "Генетики молочнокислых бактерій" Института микробиологии АН РУз Огай Дарье Киссновне за помощь в методическом плане при освоении методик но изучению лактобакте рий.