Введение к работе
Актуальность проблемы. Вопросы формирования микробиоцаноза кишечника у новорожденных недоношенных детей я значимость раціонального питания в этом процессе относятся к числу актуальных проблем педиатрии и привлекают пристальное внимание клиницистов, микробиологов, биохимиков ( Г.И.Гончарова, 1986; А.З.Смо-лянская, l$B7;d.%urt1 1983 > .
Сохранение естественного вскармливания как самого физиологичного и оптимального для детей первого года жизни остается наиболее существенным фактором, гарантирующим нормальное развитие и здоровье ребенка.
В настоящее время достигнуты значительные успехи в исследовании химического состава и биологических свойств грудного молока. Наличие в нем комплекса биологически активных соединений и иммуиокомпетентных клеток обеспечивает специфическую и неспецйфичоскую противоинфекционную резистентность, способствует элиминации из желудочно-кишечного'тракта патогенной и условно патогенной микрофлоры и стимулирует рост индигенных шкроор-ганиэмов - бифидобактернй, лактобактерий, эубактерий и т.д., что приводит к формированию нормобиоценоза кишечника.
Однако, в настоящее время появляются данные о снижении защитных свойств грудного молока и появлении в нем ряда повреждающих факторов ( пищевые аллергены, медиаторы воспаления и др. ) , что сопровождается значительным возрастанием периода становления биоценоза кишечника и нередко -развитием энгерального синдрома у новорожденных ( И.Б.Куваева, 1986; Е.М.Фатеева о соавт., 1986, 1989; Г.И.Гончарова с.соавт., 1SS7, 1989; $.H&vrttb etcU.} 1976; Cf. fcLkoStsun.ef(*txmb и др.) .
Поэтому предметом специальных исследований явилось изучение роли мембранних биологически активных фосфолшіидов и их метаболитов, -участвующих в воспалительном процессе. Среди них наибольшего внимания заслуживают производные фосфатидилхолина -лизофосфатидилхолин( Ш1 ), фактор активации тромбоцитов (ФАТ) и его аналог лизо^АТ. Обладая чрезвычайно высокой биологической активностью, а в определенных концентрациях и токсическими свойствами, эти соединения могут вызывать повреаденив и нарушение функции биологических мембран и принимать участие в патогенезе
- 2 - ' различных, в том числе яелудочно-кшечных заболеваний < В.О.Поздняков о соавт., lWliW.Hsue/L fioA,t986; ^аі.1985).
Наличие в грудном ыолоке лимфоцитов, макрофагов, а также нейтрофилов, способных активно оинтезировать ФАТ и лизофосфа-тида, свидетельствует о возможности появления этих соединений в грудноы молоке. Обладая выраженной мембранотропной активностью, данные фосфолишды могут привести к изменениям адгезивностн микробных клеток - одного из важнейших слагаемых механизма шшробт ной колонизации кишечника представителями нормальной микрофлоры.
Изложенные соображения могут служить обоснованием актуальности выявления взаимосвязи между особенностями фосфолипидного состава грудного молока и развитием дагабиоценоза кишечника у новорожденных и детей первого года жизни, находящихся на естественном вскармливании, для разработки методов повышения эффективности лечения этого контингента детей.
Целью работы явилось установление роли лизоформ холиковых фосфолинидов в формировании биоценоза кишечника у новорожденных недоношенных детей и обоснование целесообразности фармакологической коррекции фосфолипидного состава грудного молока.
Задачи исоледованияЛУотановить наличие лизоформ холиновых , фосфолинидов в грудном молоке у преждевременно родивших женщин и течение первого месяца лактации в зависимости от состояния их здоровья, определить активность фосфолипазы А в грудном молоке.
-
Изучить в модельных исследованиях на эритроцитах человека влияние грудного молока с различным фосфолипидным ооставом, экстрактов фосфолипидов молока, стандартных препаратов ФАТ, лизо-ФАТ, фосфатидилхолина, лизофосфатидшпеолана и лизоцима на адгезию штаммов бифидобактерий B,iip'durrvl, b.a.do2escentis 1Ю-42 и B.to(t0u.nuh 379М.
-
Определить фагоцитарную активность макрофагов и общую антибактериальную активность грудного молока с различным содержанием лизо-ФАТ и лизофосфатидилхолина.
-
Исследовать состояние биоценоза кишечника у новорожденных недоношенных детей в зависимости от их гестационного возрас та и фосфолипидного состава грудного молока.
-
Изучить влияние кверцетина при его назначении кормящим
матерям на фосфолгашдннй состав грудного молока, показатели фагоцитоза, общую антибактериальную активность молока, а также на адгезивные свойства бифидобактерий под дэйствиом молока в опытах in тгЛго. Оценить эффективность применения кверцетина у кормящих матерей одновременно с назначением бпфидумбактерипа их детям на мккрофлору кишечника я клиническое состояние новорожденных.
6. Исследовать эффективность применения комплексной биологически активной добавки БАД-2, содержащей лнзоцим и бифидобактерий, у недоношенных новорозденных детей, получавших донорское грудное молоко о. измененным фосфолипидннм составом.
Натчнвд новизна. Впервые показано, что у женщин с хроническими соматическими и инфекциошю-Ёоопалительннми заболеваниями, обострявшимися со время беременности а после родов, а также перенесших токсикозы беременных, в грудном молоке обнаружены фактор активации тромбоцитов и лизо-ФАТ. У этих матерей в грудном молоке также наблюдалось увеличение содержания лизо-фосфатидилхолина и его появлениэ в сыворотке молока. 7 здоровых кормящих матерей но выявлены ФАТ и лизо-ФАТ в цельном грудном молоке, а ЛФХ - в сыворотке молока.
Получены новые данные о роли лизофосфатидов - лизо-ФАТ и ЛФХ женского молока в формировании биоценоза кшючника новорожденных недоношенных детей. Показано изменение спектра фосфоли- .' дидов копрофяльтратов пра дисбактериозэ кишечника у новорожденных недоношенных детей.'
Установлено ннгкбирувдее действие лизоформ холкясодержа-тих фссфолтщдов ( лизо-ФАТ и ЛФХ ) на адгезивные свойства бифидобактерий - В.$$(/а.т1, B.adciescantis Ї.5С-42, B.Ponjtun В 379М.
Показано, что витаминный препарат "Кверцетин" подавляет активность фосфолшазн А грудного молока, нормализует его фос-фолипидный^состав в защитные свойства. Одновременное назначение кверцетина кормящим матерям и бифидумтерашш их детям способствует коррекции биоценоза кишечника и улучшает клиническое состояние новорожденных с килечным синдромом и локальными шфэк-ционно-воспалительными заболеваниями.
Впервые выявлено стимулирующее- влияние лизоцима на адгезивные свойства некоторых штаммов бифидобактерий - В.#<У«'лат.1, B.adohsceutt's Ш-42, вМ/rju/nB 379М, входящих в состав
бифидумбактерина, бифилша и биологически активных добавок БАД-1Б и БАД-2.
Получены новые данные об эффективности применения комплексной биологически активной добавки БАД-2, содержащей лизоцим и живые бифидобактерии, для лечения кишечного синдрома у новорожденных недоношенных детей, получающих донорское молоко с измененным фосфолипвдным составом.
Практическая ценность. Определение фосфолипидного состава грудного молока, особенно выявление в нем ФАТ, лнзо-ФАТ и ЛФХ, может быть использовано как дополнительный критерий в оценке наличия у кормящих матерей воспалительного процесса. Новорожденные дети этих матерей должны быть выделены а группы риска по возможности развития у них дисбакториоза кишечника и инфек-цнонно-воспалительннх заболеваний.
Предложен комплекс методов оценки защитных свойств грудного молока, который включает определение его фосфолипидного состава, фагоцитоза макрофагов, общей антибактериальной активности, а также влияние молока на адгезию бифидобактерии.
Выявлена целесообразность определения спектра, фосфолипи-дов в копрофильтратах для экспресс-диагностики дисбактериоза кишечника и возможности наблюдения за состоянием биоценоза новорожденных недоношенных детей в процессе лечзния.
Разработан патогенетически обоснованный метод коррекции защитных свойств женского молока и биоценоза кишечника новорожденных недоношенных детей с применением кверцетина у кормящих матерей з бифидумбактерина у их новорожденных детей.
Предложена схема обогащения стерильного донорского молока с измененным фосфолипидннм составом биологически активной до- бавкой БАД-2, что позволяет повысить эффективность лечения новорожденных детей с кишечным синдромом и инфекционно-воспали-тельными заболеваниями, нормализовать состав кишечной микрофлоры.
Апробация тботы. Основные положения работы были доложены и.обсуждены: на секции неонатологов общества детских врачей, г. Москва, 1989 г.; на совместной научно-практической конференции отделения физиологии и патологии новорожденных детей, клинико-диагностического отделения и лаборатории патологии обмена веществ МНИШ и ДХ МЗ РСФСР, проблемной лаборатории мадишшокой
цитологии ЦОЛИУБ МЗ СССР и коллектива врачей детских отделений городской клинической больницы МЗ г.Москвы, 5 апреля І990 г.; на научной конференции Института питания АМН СССР "Питание: здоровье и болезнь", ноябрь 1990г.
Реализадия работы. Результаты исследования и практические рекомендации внедрены в работу детских отделений городской клинической больницы №13 г. Москвы, родильного дома &2? г.Москвы.
Публикации. По тема диссертации опубликовано 5 научных работ. ,
Объем и структура диссертации, Работа изложена на 242 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, описания материала и методов, 4-х глав собственных исследований, заключения, выводов и практических рекомендаций. Библиографический указатель включает 148 источников отечественной и 165 зарубежной литературы.
Работа иллюстрирована 38 таблицами и 13 рисунками.
Диссертация выполнена в отделении детского питания (рук. - д.м.н. Харькова P.M. ), отделении физиологии и патологии новорожденных детей (рук. - д.м.н. Дементьева Г.М. ) ШИИПиДХ Щ РСФСР и в проблемной научно-исследовательской лаборатории медицинской цитологии ЦОЛИУВ МЗ СССР (зав. - д.б.я., профессор Щербакова Э.Г. ).