Введение к работе
Актуальность проблемы. Проблема лечения псевдотуберкулезной инфекции продолжает привлекать большое внимание исследователей и клиницистов в связи с тем, что в настоящее время отмечается снижение эффективности ранее применявшихся при данном заболевании антибиотиков (аминогликозидов, тетрациклинов, хлорамфеникола), связанное с их низкой способностью проникать внутрь клеток и оказывать действие на внутриклеточно расположенные иерсинии псевдотуберкулеза. Поэтому на данном этапе остается актуальным поиск новых лекарственных средств эффективных при лечении инфекций с внутриклеточной локализацией возбудителя.
На сегодняшний день одно из ведущих мест среди новых антимикробных средств в лечении различных заболеваний завоевывают синтетические антибактериальные препараты - фторхинолоны (ципрофлоксацин, пефлоксацин, офлоксацин и др.), прототипом которых послужила налидиксовая кислота. Эта группа химиопрепаратов характеризуется высокой антимикробной активностью в отношении многих грамотрицательных, ряда грамположительных микроорганизмов (стафилококков, стрептококков), оптимальной фармакокинетикой и хорошей переносимостью (Б. Н. Падейская, В. П. Яковлев, 1995; В. Буш и соавт., 1993). Фторхинолоны хорошо проникают в различные ткани и клетки макроорганизма, кроме того отмечается высокая степень накопления их в фагоцитирующих клетках (макрофагах и лейкоцитах), что обосновывает их применение в лечении инфекций с внутриклеточной локализацией возбудителя. Большинство фторхинолонов можно вводить не только парентерально, но и внутрь, что позволяет завершить курс лечения одним и тем же антибактериальным препаратом (сначала внутривенно, а затем внутрь). За очень небольшой срок фторированные хинолоны привлекли большое внимание исследователей, а в клинической практике оказались в числе' важнейших препаратов для лечения бактериальных инфекций различной этиологии
и локализации, особенно в случаях, вызванных полирезистентными штаммами. В
настоящее ' к время фторхинолоны выпускаются многочисленными
фармацевтическими фирмами в различных.странах, отечественных официнальных препаратов группы фторхинолонов пока нет. В то же время единичные сообщения о применении препаратов этой группы в лечении больных псевдотуберкулезом диктует необходимость углубленного изучения антибактериальной активности отечественных фторхинолонов (щшрофлоксацина, пефлоксацина и норфлоксацина) в отношении штаммов Yersinia pseudotuberculosis.
Цель'работы - оценить чувствительность штаммов Y. pseudotuberculosis к отечественным фторхинолонам (ципрофлоксацину, пефлоксацину, норфлоксацину), исследовать некоторые механизмы действия данных препаратов в отношении микроба' (элиминация плазмиды вирулентности, влияние па адгезию) и экспериментально обосновать применение их в лечении псевдотуберкулеза.
Основные задачи исследования:
1.Изучить чувствительность штаммов Y. pseudotuberculosis различного происхождения, различного плазмидного профиля и относящихся к разным популяциям к изучаемым химиопрепаратам.
2.Изучить чувствительность антибиотикорезистентных штаммов Y. pseudotuberculosis с различным спектром плазмид к отечественным фторхинолонам (ципрофлоксацину, лефлоксацину и норфлоксацину).
ЗіИсследовагь элиминирующий эффект фторхинолонов на плазмиду вирулентности у штаммов псевдотуберкулезного микроба.
4.Изучить действие фторхинолонов на адгезию Y. pseudotuberculosis к
клеткам организма. ..;.-
5.Исследовать терапевтический эффект пефлоксацина при экспериментальной псевдотуберкулезной инфекции. ,
Научная новизна .и .теоретическая значимость работы.
Впервые проведено сравнительное экспериментальное изучение действия новых отечественных фторхинолонов на штаммы Y. pseudotuberculosis различного
происхождения, различного плазмидного спектра, относящихся к разным популяциям микроба.
Установлено, что чувствительность псевдотуберкулезного микроба к изучаемым фторхинолонам значительно выше, чем к антибиотикам, широко применяющимся в настоящее время для лечения псевдотуберкулеза.
Обнаружено, что штаммы Y. pseudotuberculosis, характеризующиеся
множественной антибиотикорезистентностыо, также являются
высокочувствительными к данным препаратам, что указывает на отсутствие детерминант резистентности к изучаемым химиопрепаратам в структуре выявленных R-плазмид.
Впервые установлено, что элиминирующее влияние трех отечественных фторхинолонов (ципрофлоксацина, пефлоксацина и норфлоксацина) на плазмиду вирулентности у штаммов псевдотуберкулезного микроба неоднозначно и, возможно, зависит от особенностей самого штамма и плазмидной ДНК, и может быть одним из механизмов обезвреживающего действия изучаемых химиопрепаратов.
Впервые установлено, что отечественные препараты группы фторхинолонов влияют на адгезивные свойства псевдотуберкулезного микроба по разному (от снижения до увеличения).
Впервые на модели экспериментальной псевдотуберкулезной инфекции показана химиотерапевтическая эффективность пефлоксацина.
Практическая значимость.
Полученные данные обосновывают возможность применения новых отечественных препаратов группы фторхинолонов (ципрофлоксацина, пефлоксацина и норфлоксацина) в лечении больных псевдотуберкулезной инфекцией.
Результаты исследований вошли в состав материалов, представленных в Фармакологический комитет МЗ и медицинской промышленности для получения разрешения на клиническое изучение и применение пефлоксацина. В настоящее время
6 получено разрешение на клиническое применение пефлоксацина при инфекционных болезнях, в том числе при особо опасных инфекциях.
Апробация материалов диссертации. ;i. . .
Диссертация апробирована на заседании Ученого Совета НИИ эпидемиологии и микробиологии СО РАМН (Владивосток, 1998).
Материалы диссертации представлены на III Российском национальном конгрессе "Человек и лекарство" (Москва, :1996), на выездной сессии общего,, собрания Сибирского отделения Российской Академии медицинских наук, (Владивосток, 1996).
По материалам диссертации опубликовано 7 печатных работ.
Объем и структура работы.