Введение к работе
Иерсиниоз в большинстве стран мира, по данным ВОЗ, занимает в настоящее время второе место после сальмонеллезов среди инфекционных заболеваний человека. Ввиду широкого распространения, борьба за снижение этой заболеваемости - одна из наиболее острых проблем медицинской науки и практического здравоохранения. Сложность проблемы в разнообразии клинических проявлений этой инфекции и большом количестве спорадических случаев заболеваний.
Актуальность проблемы. Ввиду схожести морфологических и биохимических свойств, идентификация разных видов иэрсинпй и внутривидовая дифференциация вида Yersinia enterocolitica приобретает особое значение. Практикой лабораторных исследований доказано, что важным методом в диагностике ч противоэпидемической работе является метод фаготипировзния, которнй в некоторых случаях является единственным способом выявления эпидемиологических и эпизоотологических СЕЯЗЗЙ.
Б настоящее время в мире нет стандартного наборэ изрсзниоз-ных фагов и схемы для тшшрования вида Yersinia enterocolitica , как например в случае брюшного тифа и некоторых других микробов семейства Snterobacteriaoae.B некоторых европейских странах пользуются схемами фаготигшровакия, предложенными Нпколем с соавторами в 1967 году я Нгоіен с соавторами в 1969 году. Однако по этим схемам не всегда удавалось типировгть штамма Yersinia enterocolitica , выделенные в других странах, и учеными СМ, Канады, Японии предложены свои схемы титрования разными наборами фагов, зачастую выделенными авторами схем в тех же стра- . нах, для которых они предлагают использовать.
У Вас В Стране фаГОТИПИрОВаНВе ИТамМОВ Yersinia enterocoli-
tika на проводилось, хотя иерсиниознне фаги выделялись и изучались некоторыми исследователями. Таким образом, в Советском Союзе этот вопрос остается нерешенным, что определяет практическую значимость разработки усовершенствованных методов идентификации этих микроорганизмов и внутривидовой дифференциации вида Иерсинил энтероколитика.
Пель и задачи исследования. Целью данной работы являлась разработка способа ускоренной идентификации и дифференциации ВИДОВ Yersinia entarocolitica И Yersinia pseudotuberculosis и разработка схемы фаготипирования штаммов Yersinia enterocoii-tica с помощью иерсиниознш. бактериофагов.
Указанная цель потребовала решения следулдих экспериментальных задсч:
-
Изучение литического сдекгра опытных вирулентных кишеч-нс—иерсиниозных бактериофагоз, селекционированных в Тбилисском научно-производственном объединении "Бактериофаг", с целью отбора их для идентификации и внутривидовой дифференциации Yersinia enterocolitis еа.
-
Изучение лизотилических реакций игакмоз їегзіпіа entero-
pocolitica " Yersinia pseudotuberculosis,ВЫДеЛеШШХ ОТ раЗЛИЧ-
ных объектов в разных регионах СССР и за рубежом, к поливалентным иерсиниознш фагам с целью выяснения возможности их применения для идентификации к дифференциации этих видов.
., '3. Изучение ЛИЗОТИГШЧесКЛХ реакций Yersinia enterocolitica,
выделенных & Грузии и Среднеі' Азии, к отобрапша* иерспниозным фагам .с целью использования данных для виявленім закономерностей распространения штаммов, относящихся к различшш фаготи-пеа., и построения схеї.оі (^аготмшіроззнлч.
Научная новизна, 3 результате решения вышеперечисленных задач были разработаны и предложены: способ ускоренной идентификации И дифференциации ВИДОВ Yersinia enterocoiitica а Yer- cinia pseudotuberculosis с помощью вирулентных поливалент-ных иерсиниозных фагов и схема фаготигшрования шт&'лмов вида Иерсиния энтероколитика набором поливалентных и клонированных иерсиниозных фагов. Это определило конатнув задачу данной работа.
Рпактическая дендорть п реализация -результатов -работы. Впервые в наией стране проведено фаготипированип штаммов вида Yersinia enterocoiitica . Установлено территориальное распространение фаготипов и их динамика по годам в Грузки с момента выделения первых штаммов до 1989 года включительно и в Средней Азии за период с 1974 по 1988 годы.
С помощьв предложенной схемы фаготипирования установлен фаготип у 88,87$ исследованных штаммов. Результаты титрования подтверждают расшифровку эпидсвязей в случае заболеваний лвдей в г.Алма-Ата в 1984 году и эпизоотия среди мелкого рогатого скота в Киргизии' в 1984 году, среди полевых грызунов в разные годы на территории Грузии.
Разработанный метод ускоренной идентификации и дифференциации ВИДОВ Yersinia enterocoiitica и Yersinia pseudotuberculosis с помощью вирулентных иерсиниозных бактериофагов положительно оценен при апробации в ШСНИ Кавказа л Закавказья в г.Ставрополе, НИШ г.Ростова-на-Дону, НИПЧИ Средней Азии и Казахстана в г.Алма-Ата, где были исследованы штаммы разных видов иерсиний (Yersinia enterocoiitica .Yersinia p3eu
Составлены методические рекомендации по ускоренной идентя-
фИКаЦИИ И Дифференциации ВИДОВ Yersinia enterocoiitica и
Yersinia pseudotuberculosis и внутривидовой дифференциации вида їегаіпіа enterocoiitica с помощью иерсиниозных бактериофагов. Разрабатывается техническая документация по производственному изготовлению диагностических кишечно-иерсиниоэных фа-ГОВ.
Освоение положения, выносимые на зашиту:
-
Изучение литических свойств опытных кишечно-иерсиниоз-ных бактериофагов,
-
Определение серологического и фаготипового пейзажа штаммов Yersinia enterocoiitica , ввделенних в Грузии, и фаготипового ПОЙЭЬЖа штаммов Yersinia enterocoiitica , выделенных в Средней Азии.
-
Разработка и предложение метода ускоренной идентификации и дифференциации видов иерсиний - enterocoiitica и' рсеи-
, iiotuborculoais с помощью поливалентных иерсиниозных баКТерИО-фаГОВ.
4. Создание набора фагов, разработка и внедрение схемы фа-
1'ОТЕДИрОВания штаммов ВИДЭ Yersinia enterocoiitica.
^.нтюбетая -работа. Основные положения и результаты работы доложены и положительно оценены на научных конференциях Грузинской противочумной станции Министерства здравоохранения СССР, на УІ Краевой научной конференцип яо особо опасным инфекциям в 1ШТЧИ Кавказа и Закавказья Министерства здравоохранения СССР, на ХУІ и ШІ Республиканских конференциях молодых ыэдиков Грузии, на Всесоюзных научных конференциях по Еопросач иерсиниоаов, . проводившихся в г.іЗладивостоко в 1986 и 1989 годах, на I Республиканской конференции по вопросам региональных комплексных ме-дако-географическю: атласов и их роли в улучшении внтропо-эко-
логической обстановки, проводившейся в г.Тбилиси.
Публикаши. По теме диссертации опубликовано П статей, утверждены и изданы Методические рекомендации.
Объем -работы. Диссертация "состоит из введения и 4-х разделов (в первом разделе дан обзор специальной литературы, в последующих разделах изложены и обсуждены собственные исследования) и списка использованной литературы. Диссертация изложена на 102 страницах, включая 13 таблиц и приложения (акты апробации методаидентификации и дифференциации, методические рекомендации).
Список использованной литературы содержит 201 наименование, в том числе 87 отечественных и 114 зарубежных авторов.