Введение к работе
Актуальность проблемы. Botrytis сіпегеа Pars, широко распространен в природе, ко преимущественно встречается в регионах с влажным климатом. Он является факультативным паразитом, поражает свьтае ?00 видов культурных и дикорастущих растений из различных семейств, (пасленовых, бобовых, зонтичных, крестоцветных, сложноцветных), у которых вызывает скручивание и опадание листьев, цветов и гниение плодов. Болезнь развивается не только в период вегетации, но и после уборки урожая. В.отегеа является наиболее агрессивным возбудителем кагатной гнили капусты, гнили сахарной свеклы и моркови.
Среди поражающих факторов гриба чаще всего отмечают его высокую ферментативную активность - пектолитическуга, амилолити-ческую, протеолитическую ( Рубин, 1953; Picol, 1965; Domsoh, Gams, 1969; Urbanek et al., 1978 ), а также способность к образование шавелевой, лимонной и ряда других органических кислот (Рубин и др., 1964; Kamoen et al., 1974), некоторых метаболитов, таких как ботридкаль (Fehlhaber et al., 1974;), фитотокси-чеоких полисахаридов (Аксенова, 1952; Аксенова и др.,1964; Vannel,199l).
Однако, текие исследования выполнены преимущественно на отдельных штаммах и не дают четкого представления о токсигенном потенциале вида в целом.
Остается не выясненным механизм фунгистатического и, в большинстве случаев, фитотоксического действия, не изучена токсикология вида и его потенциальная опасность для окружающей среды. Актуальной представляется разработка методов выделения фитотоксических метаболитов (ФТМ) В. oinerea, их идентификация и возможное применение в селекции растений in vitro.
Цель и задачи работы. Цель» настоящей работы было изучение ФТМ В. сіпегеа, особенности их образования, свойств и биологической активности. Достижение поставленной цели предусматривало решение ряда конкретных задач:
отобрать на основе полученных данных наиболее активные культуры;
разработать метод выделения ФТМ, изучить их некоторые физико-химические свойства и биологическую активность, включая возможность использования их в качестве селективных маркеров
- г -при выведении устойчивых сортов растений;
- изучить некоторые аспекты механизма фитотоксического
действия выделенных метаболитов.
Основные положения, KOTopfcg выносятся на защиту. В результате выполнения поставленных задач сформулировано ряд поло-тений, основные из которых выносятся на задиту:
-
Исследуемые штаммы В.оілегеа характеризуются идентичным компонентным составом. Отмечаемые различия носят количественный характер.
-
Из культуральннх фильтратов В. cinerea 109815 выделено в кристаллическом виде два вещества. На основании сравнительного анализа полученных данных и данных, имеювіихпя в литературе, можно утверждать, что вещество D? является новым, ранее неизвестным для этого гриба, фитотоксическим метаболитом.
-
Впервые покарано, что ФТМ В. cinerea могут быть использованы в качестве селективных агентов при получении устойчивых сортов винограда методом культуры ткани in vitro.
4. Разработан метод выделения ФТМ В.cinerea.
Научная новизна работы характеризуется следующим:
Впервые с использованием большого числа штаммов исследован токсигенный потенциал B.oinerea. Показана идентичность компонентного состава токсических метаболитов исследуемых штаммов.
Отработаны условия синтеза ФТМ, в том числе и 14С~ФТМ, наиболее активными штаммами .
Проведена частичная идентификация отдельных компонентов фитотоксического комплекса д. cinerea. Выделенные вещества отличаются от известных ранее.
Изучена антибиотическая и фитотоксическая активность ФТМ B.oinerea.
Фитотоксическая активность метаболитов B.oinerea связана с действием на синтез пигментов, что, по всей видимости, определяется их способностью ингибировать синтез белка.
Впервые показана принципиальная возможность использования ФТМ В.cinerea для селекщш устойчивости винограда in vitro.
Практическое значение работы состоит в том, что изучение токсигенных свойств штаммов B.oinerea позволяет реально оценить потенциальную опасность этих грибов для сельскохозяйственного производства.
Изучение ФТМ B.oinerea и особенностей их действия на рас-
тети открывает широкую перспективу испольаовэния их для селекции устойчивых сортов растений, поражаемых этим грибом.
Апробация работа. Материалы диссертационной работы были представлены на конкурсе фундаментальных работ института микробиологии и вирусологии им. Д.К.Заболотного АН Украины(Киев,1994)
Публикация результатов исследований. По материалам диссертационной работы опубликовано 7 печатных работ.
Структура и объем работы. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, экспериментальной части, включающей 6 глав, обсуждения результатов, выводов, списка цитированной литературы.