Введение к работе
Актуальность темы. Проблема воспалительных заболеваний киїїшч вика, вызванных условно-патогенными микроорганизмами, в настоящее время приобретает важное социальное значение в связи с увеличением их частоти. .Возрастание роли условно-патогенных Микроорганизмов, активизапия их факторов патогенности, связаны с продолжающимся ухудшением экологических условий на планете, П|.н водящих к изменению традишонных взаимоотношении микробов и орга низма человека ( Р.Н.Реброва, 1979, 1989; В.И.Покровский 198.0, 1989; С.А.Дратвин 1989 ).
Ассоциативный характер участия условно-патогенных микрооріа-ішздіов при нарушениях микробного .бяопеноза кишечника, не вызываем сомнений ( Р.Н.Реброва, 1979, 1991; В.Н.Кросноголовеи, 1989 ).
Значительное место среди условно-патогенных микроорганизмов занимают грибы рода Кандида и кишечные иерсиний ( В.М.Ле-щенко, 1989; И.В.Смирнов, 1991; Р.Н.Р.еброва, IS92 ). В последние годы появились отдельные публикации, указывающие на возможность одновременного выделения из окруааюцей среды и от взрослых и детей, больных острыми кишечными дирекциями ( ОНИ ) ассопиашй грибов рода Кандида и иерсиний ( Т.А.Абдыкеримова, 1982; Н.И.Александрова с соавт., 1388; В.И.Пушкарева с соавт., 1989, 1991 ).'
Однако, вопросы взаимодействия грабов рода Кандида и кишечных иерсиний остаются неизученными. Неизвестно, как влияют грибы на рост иерсиний в смешанных культурах, на течение экспериментальной иерсиниозной инфекции, на патогенность и некоторые другие биологические свойства кишечных иерсиний. В литературе отсутствуют сведения и рекомендации по способам и питательным средам для совместного культивирования кишечных иерсиний и грибов рода Кандида.
Исходя из изложенного, мы поставили пель - изучить влияние о.albicans на факторы патогенности и некоторые другие биологические свойства кишечных иерсиний в условиях in vitro и in. vivo.
Для достижения поставленной пели необходимо было решить следующие задачи:
изучить распространение грибов рода Кандида у больных острыми кишечными инфекциями и здоровых лип;
разработать способы совместного культивирования кишечных иерсиний и грибов в условияхіп vitro a in vivo
исследовать влияние грибов на патогенные и некоторые другие
биологические свойства кишечных иерсиний, неоущах плазмаду ви-рулентности и их безплазмядных вариантов, в условиях in vitro к in vivo.
Научная новизна.
Впервые разработав способ совместного культивирования кишечных иерсиний и грибов на питательном.бульоне, содержащем пептон, сорбит, хлорид натрия, двузамещенный фосфат калия, метисний, тначина бромид ( способ защищен авторским свидетельством, 1991 ). При совместном культивировании вдавлено взаимное стимулирующее влияние и передний, и грибов на кинетику размножения мяхроба-ассогианта.
Впервые воспо»яведена аерсгнисснс-кандидозйая инфекция у белых беспороднвх мышей при пероралйном заражении грибными клоткаш и кишечными иерсяяиями, несущими плазмиду вирулентности и безплазыадныьш вариантами. Показано отягощающее влияние да течение экспериментальной иерсиниозной инфекпяи.
Ваервне установлена способность кишечных иерсиний быстрее гемолавировать эритроциты,'взятые от белых беспородных мышей при иерсиниозно-кандидозаой инфекции, чем от здоровых нивотных. Среда с конго-красным использована для выявления вирулентных штаммов клиечяых иерсиний и Для изучения относительной активности ферментов дыхания. Установлено, что деревний, несущие плазмиду вирулентности, обладали более выраженной активностью ' ферментов дыхания, чем их безплазшдные варианты..
Разработан оригинальный способ определения -адгезивной активности, кишечгах иерсиний к полистиролу, позволивший установагь выраженное влияние грибов на этот вакный фактор патогедности.
Установлено, что грибы активировали выработку лепитиназы у . кишечных иерсиний и адаптировали к повышенному содержанию хлорида натрия иерсиний, несущие плазмиду вирулентности.
Впервые предложен оригинальный способ выделения кишечных иерсиний с применением питательного бульона с сорбитом а ген-пиапвиолетом ( ПБСГ ) из субстратов, конташнированных различными видами бактерий а грибов. .
Практическая генность. Диссертационная- работа проводилась в соответствии с планом научно-исследовательской работы института. Тема': " Биологические свойства ї.еа-terocoiitica в условиях микробных ассопиа-ішй с С.albicans "( номер юерегистраиия 0І90ОО409ОЗ ).
На основе изучения датательних потребностей кишечних передний и грибов рода Кандида, кляетлм и роста на различных питательных средах в условиях оиеаанвщ культур разработан "Способ совместного культдвпревания кишечних иерсиний и грибов рода Кандида" ( положительное -решонге отдела пищевой прошигдел-лости и биотехнологии Щ11Ш1Э ГОСПАТВНїа СССР, сентябрь, 1991, январь, 1992 - принято ресение о ввдаче патента ),
По "Способу выделения кишечных иерсиний из субстратов, загрязнении различными видами бактерий и грибов" получено удостоверение на рационализаторское предложение ( декабрь, 1991 ), а также разработаны методические рекомевдании, внедренные в практическую работу врачей-бакгераологов г.Рязани,
По "Способу определения адіезиа кишечних иерсиний к полистиролу после совместного культивирования с грибами рода Кннди-да" получено удостоверение на рационализаторское предложение, оформлено информационное письмо, внедренное в работу генерализованной бактериологической диагностической лаборатории г.Рязани.
Предлоаена модификация "Способа определения адгезии грибов рода Какдада к эгштелиогштам слизистой оболочки ротовой полости", разработанного ранее на кафедре микробиологии Рязанского модиш'.нского института Р. 11. Ребро пой с соавт. ( І9В9 ), которая долояена на областном семинаре врачеп-ошетєриологон и внедрена в работу облСЭС и централизованную бактериологическую 'диагностическую лабораторию х.Рязани.
Апробания работы. ..
Матеряали диссертапии опубликовали в 10 научных работах. Результати исследований додокени на дьух международних симпозиумах ( г.Росток, ГДР, 1990; г. Санкт-Петербург,' 1991), на научной конференции молодых ученых, специалистов ЛагССР и студентов Рижского медишнекого института ( г.Рига, 1988 ), на итоговой объединенной конференции молодых учених , спепналистов и студентов Дагестана ( г .Махачкала, 1»89 ), на итоговой научной конференции молодых ученых а студентов ( г.Рязань, 1989 ), на конференпии "Разработка и производство препаратов биотехнологии" ( г.Махачкала,. 1990 ), на У1 Всероссийский съезде микробиологов, эпидемиологов и паразитологов ( г.Нижний Новгород, 1991 ).
Положения, выносимно на защиту:
і. Гриб с.albicans существенно влияет in vitro на некоторые1 биологические свойства y.enterocolitica , несущих плазми-ду вирулентности и их безплазмидные варианты.
2. Гриб с.albicans отягощает течение экспериментальной иер-
синуоэном ивс]ект'ии, вызванной не только плазмидосодеряавдш, но
И безплазмидным вариантом Y.enterocolitice , а также способствует колонизации иерсиний во внутренних органах и длительному бактериоБыделекпю из кишечника.
3. Разработанные оригинальные способи "Способ совместного
культивирования кишечных иерсиний к грибов рода Кандида", "Спо
соб выделения ышечньгх иерсиняіі из субстратов, загрязненных
различными видами бактерий и грибов", "Способ определения адге
зии кишечных иерсиний к полистиролу после совместного культиви
рования с грибами рода Кандида" эффективны, не требувт дорого
стоящих кокпанентов; больших трудозатрат и могут быть рекомендо
ваны к использовании в бактериологических и научно-исследова
тельских лабораториях.
Структура и объем работы.