Введение к работе
Актуальность темы. Бактерии рода Serratia достаточно широко распространены в природе - их обнаруживают в воде, почве, пищевых продуктах, а в последние десятилетия они все чаще обнаруживаются в различном клиническом материале от больных и здоровых людей, домашних и диких млекопитающих, рыб, рептилий, птиц. В 1996 г. отмечено 2-кратное возрастание выделения S.marcescens по сравнению с 1995 r.(Naumiuk и соавт., 1999).
С серрациями связывают возникновение у людей инфекционных процессов различной локализации и формы - сепсис и бактериемия (Н.Ю.Абрикосова и соавт., 1985; Gorts и соавт., 1987; Chmel, 1988; Watanakunakorn,1989; и др.), менингит (Gates и McCall, 1982; Landgab и соавт., 1987), инфекции мочевыводящих путей (Goto и Rawahara,1984; Serrases-Schontens, 1984), легких (Gill и соавт., 1980), желудочно-кишечного тракта (Cipoletta и соавт., 1983), послеродовой инфекции (Handrick и соавт., 1981) и др., при которых высевались различные представители рода Serratia, но чаще всего S.marcescens. Имеются указания на роль серраций в возникновении вспышек внутрибольничных инфекций (Halle и соавт., 1989; С.С. Белокрысенко и соавт., 1992), причем чаще всего в отделениях интенсивной терапии.
Этиологическая значимость при внутрибольничных инфекциях и возрастающая частота выделения серраций объясняют интерес к поискам надежных методов их типирования (эпидемиологического маркирования), которые дали бы возможность сравнительно быстро и точно разграничивать штаммы серраций от представителей других родов, а также внутри рода и внутри видов, выявлять госпитальные штаммы этих бактерий.
Методы эпидемиологического маркирования бактерий достаточно разнообразны и разграничиваются на традиционные (классические) и молекулярные. К традиционным относятся биотипирова-ние, серотипирование, фаготипирование, бактериоцинотипирование, резистенстипирование; к молекулярным - плазмидный анализ, рест-рикционный анализ, полимеразная цепная реакция, иммуноблотинг и др. (В.М. Бондаренко и соавт., 1982; Л.М. Пинчук и К.Я. Соколо-ва,1983; В.Д. Беляков и соавт., 1990; Darini, 1994).
Среди традиционных методов типирования бактерий сравнительно мало внимания уделялось бактериоцинотипированию, представление о котором с каждым годом углубляется. Явление бактериоциногении привлекает внимание исследователей в связи с тем, что является стабильным и характерным признаком большинства микроорганизмов.
Многочисленные данные свидетельствуют о способности микроорганизмов, принадлежащих к различным семействам, выделять бактериоцины. Наиболее обширные исследования проведены с представителями семейства Enterobacteriaceae.
Бактериоцины находят использование при типировании некоторых бактерий: клебсиелл, менингококков, псевдомонад и др. Способность серраций к образованию бактериоцинов и чувствительность их к действию бактериоцинов исследовались в отдельных работах (Eichenlaub и Winkler, 1974; Acker, 1976; Traub, 1991; Enfedaque и соавт., 1996).
Цели и задачи работы. Целью настоящего исследования было изучение возможности использования бактериоциногении при типировании серраций для совершенствования методов эпидемиологического маркирования этих бактерий. Для выполнения этой цели следовало решить следующие задачи:
-
Изучить распространение бактериоцинов среди серраций различного происхождения.
-
Установить возможности типирования серраций по их бак-териоциночувствительности и бактериоциногенности.
-
Выяснить связи между различными методами типирования серраций, включая метод бактериоцинотипирования.
Работа проводилась в соответствии с основными направлениями НИР Кабардино-Балкарского госуниверситета. Тема: "Разработка способов выявления и эпидемиологического маркирования условно-патогенных представителей энтеробактерий", зарегистрирована во ВНТИЦентре, N гос. регистрации 01.91.0044705.
Научная новизна. Показано, что у серраций бактериоциноге-ния встречается у 62,9% штаммов. Бактериоцины серраций являются специфичными и характеризуются различным спектром действия. Отношение к бактериоцинам может рассматриваться как эпидемиологический маркер серраций. Выявлена корреляционная связь между различными эпидемиологическими маркерами у S.marcescens.
Практическая ценность. Разработаны схемы типирования серраций по их чувствительности к бактериоцпнам, эффективные в отношении 68,5-79,6% исследованных культур, а также схема, основанная на образовании бактериоцинов, по которой типированы 50% штаммов серраций. Полученные результаты находят использование в практической работе учреждений системы санэпиднадзора Кабардино-Балкарской Республики и Карачаево-Черкесской Республики. Материалы диссертации внедрены в учебный процесс в Кабардино-Балкарском государственном университете.
Апробация работы. Материалы диссертации опубликованы в 5 работах.
Полученные данные доложены:
-
На межвузовской научно-практической конференции, посвященной 40-летию КБГУ "Актуальные проблемы биологии, медицины и сельского хозяйства в исследованиях молодых ученых КБР" (Нальчик, 1997).
-
На Северо-Кавказской региональной научной конференции студентов, аспирантов и молодых ученых "Перспектива-99" (Нальчик, 1999).
-
На научной конференции "Актуальные вопросы биологии и медицины", посвященной 30-летию кафедры микробиологии, вирусологии и иммунологии Кабардино-Балкарского госуниверситета (Нальчик, 1999).
Положения, выносимые на защиту.
-
У серраций достаточно часто выявляется образование бактериоцинов, характеризующихся специфичностью и различным спектром действия.
-
Серраций могут быть типированы на основании чувствительности к бактериоцинам и по продуцируемым бактериоцпнам.
-
Между различными эпидемиологическими маркерами серраций (патовары, фаготипы, бактериоцинотипы) имеется четкая корреляционная связь.
Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 124 страницах машинописи, иллюстрирована 29 таблицами и 10 рисунками, состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов, 3 глав собственных исследований, заключения, выводов и указателя литературы, включающего 200 источников, из которых 48 отечественных и 152 зарубежных.