Введение к работе
Актуальность. Проблема микробных ассоциаций и, п частности, ассоциаций Enterobacteriaceae и Candida остается одной из наиболее важных в связи с большой распространенностью заболеваний этой этиологии. (Вашмакова М.А. и др.,1980, Носов С.Д., 1982, Кулаков В.И., ЗаК Й.Р., Куликова Н.Н., 1984, Ульянова Н.Ф., 1985, Gibson М.,1986, Сидельникова В.М., Слепцова СИ., Чаклин А.В., 1988, Анкирская А.С., Гуртовой Б.Л., Елизарова И.П., 1989]
Еще в семидесятые годы [С.Г.Смирнов, 1978] была поставлена и обоснована необходимость изучения поведения микроассоциаций, как открытых периодических систем. С тех пор в практику микробиологических исследований внедрено множество методов оценки разнообразных физических параметров микроорганизмов и культур. Многочисленными исследованиями {Иванов В.Н., Угодчиков Г.А., 1984, Беляков В.Д. и др., 1986, Варфоломеев С.Д., Калюжный СВ., 1990] накоплен большой материал по изучению закономерностей роста и разбития микробных культур И ассоциаций, существенной модернизации подверглась техника обеспечения й проведения эксперимента.
До сих пор не создано полностью эквивалентных органам и
системам Человека биологических и физических моделей [Шлегель Г.,
1987], отсутствуют и адекватные способы представления и оценки
результатов тестирования биохимических возможностей
микроорганизмов, до сих пор остающиеся на уровне качественной оценки
их как "наличие/отсутствие усвоения" соответствующего субстрата
[Готтшялк Г., 1982, Арутчева А.А., 1984, Покровский В.И., 1985],
Поэтому разработка и совершенствование техники измерений и собственно
параметров жизнедеятельности развивающихся ассоциаций
микроорганизмов, использование их для углубленной характеристики штаммов иа каждом этапе развития представляет весьма сложную задачу.
Введение в научно-исследовательскую й практическую деятельность врача-микробиолога информационных характеристик, представленных в виде формализованных показателей и позволяющих оценить биохимические возможности изучаемого микроорганизма, позволит полнео выявить сложный комплекс взаимодействий развивающєііся совокупности культур микроорганизмов и макроорганизма-хозяинп. Такая возможность Приблизит нас к получению достоверной информации о характере процесса адаптации развивающейся ассоциации культур микроорганизмов к меняющимся условиям макроорганизма, как среды обитания.
Все вышеизложенное позволяет нам следующим образом обосновать цель и задачи настоящею исследования.
Цель работы-- исследовать принципиальную возможность и целесообразность разработки и применения формализованных информационных показателей для биохимической характеристики культур микроорганизмов (на примере ассоциаций энтеробактерий и кандида), существующих на слизистых родовых путей женщин с разной степенью выраженности невынашивания беременности, оценить их теоретическое и практическое значение.
В соответствии с указанной целью были поставлены следующие задачи:
-
Выявить культурально-биохнмические особенности, разработать и дать комплексную количественную оценку энтеробактерий и грибов рода Candida на протяжении гестационного периода;
-
Разработать и отобрать наиболее информативные формализованные показатели для характеристики микроорганизмов из группы энтеробактерий и грибов рода Candida;
-
Произвести теоретическую оценку возможности применения формализованных показателей в практике работы;
-
На основании полученных данных сделать попытку обоснования возможности использования разработанных формализованных показателей для описания ассоциаций энтеробактерий и кандида при неосложненном протекании беременности и при угрозе невынашивания и для совершенствования комплексной оценки здоровья беременной женщины.
Научная новизна
В результате проделанной работы впервые показано, что для количественного биохимического описания микроорганизма применимо использование биокода, как интегральной метахарактеристики, дающей возможность не только выразить в краткой форме, в виде одного семизначного числа все основные биохимические особенности исследуемого микроорганизма, но и «спользовать полученную числовую характеристику для дальнейшей математической обработки, позволяя перейти к количественным методам оценки культурально-биохимических особенностей микроорганизма.
Показано, что для интерпретации результатов биохимического исследования микроорганизма целесообразно использование размерных информационных' величин и предложен комплекс формализованных
показателей На, Hk и Ни, обозначаемых соответственно как мера биохимической активности микрофлоры изучаемого биотопа в определенный период времени (На), мера биохимически обусловленной гетерогенности микрофлоры изучаемого биотопа в определенный период времени (Hk) и мера удельной биохимической гетерогенности микрофлоры изучаемого биотопа в определенный период времени (Ни); что позволило перейти от чисто описательной оценки состояния микроассоциации любой степени сложности к информационному анплизу ее.
Показано, что' большим преимуществом использования информационных параметров является их логарифмический характер, позволяющий еще На этапе первичной обработки материала абстрагироваться от случайных значений изучаемых параметров, одновременно позволяя нагляднее выделить имеющиеся тенденции в их изменении.
Показано, что Hk, На и Ни более полно отражают динамику приспособления микроассоциаций к изменившимся в результате беременности условиям внешней (для микрофлоры) среды (макроорганизма), позволяют устранить погрешности, возникающие в результате накопления случайных ошибок и артефактов, выделить тенденции в изменениях этих факторов и, следовательно, могут быть использованы Для формализованной оценки степени приспособления ассоциации микроорганизмов.
Установлена взаимосвязь Между содержанием ряда гормонов (кортизол, SHBO, пролактии) и факторов иммуноиифекционного статуса (иммуноглобулины IgG к возбудителям цитомегаловирусной, токсоплазменной и краснушной инфекций) в организме женщин с различным течением процесса гестации и выявляемой у отих лее беременных микрофлорой.
Установлено отсутствие зависимости микрофлоры от уровней иммуноглобулинов IgM К возбудителям цитомегаловирусной, токсоплазменной и краснушной , инфекций, от антигенов Chlamydia trachomatis, Neisseria gonorrhoeae и Streptococcus серогруппы "A". .
Показано, что предложенный Комплекс показателей позволяет п условиях макроорганизма полнее оценивать результаты других методов исследования, в частности таких, как определение иммуно-инфекционного и гормонального фона и поэтому может применяться в клинической практике.
Практическая ценность 1. Разработана модификация метода определения теста GerniTube для
грибов рода Candida.
-
Разработан метод прямого посева аналитического материала с использованием ті чепортно-культивациошшй кассеты.
-
Разработан комплекс программных средств для лаборатории иммуноферментного анализа.
!. Разработаны формализованный информационные показатели, которые могут быть использованы для количественной биохимической характеристики культур микроорганизмов и для совершенствования комплексной оценки одоровья беременной женщины.
Внедрение результатов в практику
Разработанные в результате настоящего исследования методы внедрены в практику работы лаборатории ABB0TT-DBLF1A и Перинатального Центра Ивановского НИИ материнства и детства MB РФ с положительным эффектом.
Обучение специалистов проводилось на семинарах и в виде подготовки специалистов на рабочих местах в 4-й женской консультации (сентябрь 1091 г.), в 1-й детской клинической больнице г.Иваново (февраль-март 1993 г.), в перинатальном центре ИвНИИмид (февраль 1990 г., март 1991 г., январь 1992 г.).
Материалы диссертации используются в учебной программе по курсу микробиологии в Ивановском государственном медицинском институте им.А.С.Бубнова.
Изданы информационно-методические документы:
-
информационное письмо "Критерии диагностики внутриутробных инфекций по данным иммуноферментного анализа";
-
информационное письмо "Критерии диагностики инфекций передающихся половым путем по данным иммуноферментного анализа".
Апробация работы и публикации
результаты работы доложены на совместной конференции
Ивановского НИИ материнства и детства МЗ РФ, кафедры микробиологии
и вирусологии- Ивановского медицинского института им.А.С.Бубнова и
кафедры акушерстве и гинекологии Ивановского медицинского института
им.А.С.Бубнова.
Материалы диссертации доложены на 46-й Ивановской областной научно-практической конференции . врачей дермато-венерологов, акушеров-гинекологов и работников СЭС (ноябрь 1992 г.), на научно-практических конференциях в перинатальном центре ИвНИИмид, в том числе: "Лабораторная диагностика внутриутробной инфекции плода" (январь 1993 г.), "Методы иммуноферментного определения
внутриутробных инфекций" (март 1990 г., февраль 1993 г.), "Правила подготовки аналитического материала для ИФА-исследования" (сентябрь 1991 г., март 1993 г.).
По теме диссертации опубликовано 8 научных работ.
Объем и структура диссертации