Электронная библиотека диссертаций и авторефератов России
dslib.net
Библиотека диссертаций
Навигация
Каталог диссертаций России
Англоязычные диссертации
Диссертации бесплатно
Предстоящие защиты
Рецензии на автореферат
Отчисления авторам
Мой кабинет
Заказы: забрать, оплатить
Мой личный счет
Мой профиль
Мой авторский профиль
Подписки на рассылки



расширенный поиск

Молекулярная фармакологияглюкокортикоидов на основе природных и синтетических структур наноразмеров Малкин Пётр Александрович

Молекулярная фармакологияглюкокортикоидов на основе природных и синтетических структур наноразмеров
<
Молекулярная фармакологияглюкокортикоидов на основе природных и синтетических структур наноразмеров Молекулярная фармакологияглюкокортикоидов на основе природных и синтетических структур наноразмеров Молекулярная фармакологияглюкокортикоидов на основе природных и синтетических структур наноразмеров Молекулярная фармакологияглюкокортикоидов на основе природных и синтетических структур наноразмеров Молекулярная фармакологияглюкокортикоидов на основе природных и синтетических структур наноразмеров Молекулярная фармакологияглюкокортикоидов на основе природных и синтетических структур наноразмеров Молекулярная фармакологияглюкокортикоидов на основе природных и синтетических структур наноразмеров Молекулярная фармакологияглюкокортикоидов на основе природных и синтетических структур наноразмеров Молекулярная фармакологияглюкокортикоидов на основе природных и синтетических структур наноразмеров Молекулярная фармакологияглюкокортикоидов на основе природных и синтетических структур наноразмеров Молекулярная фармакологияглюкокортикоидов на основе природных и синтетических структур наноразмеров Молекулярная фармакологияглюкокортикоидов на основе природных и синтетических структур наноразмеров Молекулярная фармакологияглюкокортикоидов на основе природных и синтетических структур наноразмеров Молекулярная фармакологияглюкокортикоидов на основе природных и синтетических структур наноразмеров Молекулярная фармакологияглюкокортикоидов на основе природных и синтетических структур наноразмеров
>

Диссертация - бесплатно, доставка 10 минут, круглосуточно, без выходных и праздников

Автореферат - бесплатно, доставка 10 минут, круглосуточно, без выходных и праздников

Малкин Пётр Александрович. Молекулярная фармакологияглюкокортикоидов на основе природных и синтетических структур наноразмеров: диссертация ... кандидата медицинских наук: 14.03.06 / Малкин Пётр Александрович;[Место защиты: ГБОУ ВПО РНИМУ им. Н.И.Пирогова].- Москва, 2014.- 104 с.

Введение к работе

Актуальность

В настоящее время топические стероиды активно применяются при лечении

различных воспалительных и аллергических заболеваний кожи -

атопического, контактного аллергического дерматитов, псориаза и других

дерматозов. Использование гидрокортизона, первого препаратa в данной

группе, в дерматологической практике выявило недостаточную его

эффективность при тяжелых и хронических процессах (Шимановский Н.Л.,

2005; еt al., 2010). Поиск препаратов, имеющих более выраженный

противовоспалительный эффект привел к созданию галогенизированных

стероидов, вызывающих выраженные системные и местные побочные

эффекты (синдром Кушинга, снижение иммунитета и скорости заживления,

психозоподобные реакции и т.д.). Ранее считали, что

противовоспалительный, противоаллергический, десенсибилизирующий,

антитоксический и иммунодепрессивный эффекты стероидов реализуются

через один рецептор и поэтому неотделимы друг от друга et al.,

1998). Однако использование современных инновационных технологий

открывает новые возможности в этом направлении, в частности применение

нанотехнологий для разделения фармакологических эффектов

глюкокортикоидных препаратов et al., 2010). Заданное изменение

свойств лекарственных веществ с помощью нанотехнологического подхода

включает два основных способа (Шимановский Н.Л. и др., 2010). Первый

подход - синтез лекарственных соединений, имеющих наноразмеры на

основе полимерной модификации лекарственных веществ (конъюгация

молекулы лекарственного вещества и полимера) (Wang, Y.S., 2002). Второй -

включение лекарственного вещества в состав наноматериалов

представленных мицеллами, дендромерами, сферами (фуллерены) (Boas U. et

al., 2004). Одной из новых возможностей, связанной с получением

синтетических структур глюкокортикоидов наноразмеров (наностероидов),

является изучение молекулярных механизмов ранних, мембранотропных

эффектов глюкокортикоидов на клетки-мишени. За последние годы

появились серии публикаций, описывающих быстрые экстрагеномные
мембранотропные эффекты стероидов et al., 2008; et
al., 2008; 2009). К ним можно отнести инотропное и
вазоконстрикторное действие альдостерона, быстрые нейрональные эффекты
прогестерона, ранние эффекты витамина Д3 на уровень кальция и цАМФ в
клетках костной ткани. Получены также сведения об участии мембранных
рецепторов эстрогенов и гестагенов в регуляции активности

мембранносвязанных ферментов аденилатциклазы, протеинкиназы С, 5'-

нуклеотидазы в норме и при опухолевом росте et al., 2012). Ранее
было показано, что повысить тропность стероидных гормонов к
плазматическим мембранам и модифицировать их генотропную активность
можно с помощью комплексирования с полимерными материалами, в
частности с поливинилпирролидоном (Духанин А.С. и др., 2003). Комплекс
поливинилпирролидон–глюкокортикоид, не проникая в клетку, способен
через мембранные структуры усиливать эффекты (пермиссивное действие)
адреномиметиков (изадрина), и свободного глюкокортикоида на модели
тимоцитов крыс – повышать уровень цАМФ и цитостатическую активность
глюкокортикоидов. Создание комплексов, не проникающих в клетку, но
потенцирующих, например, эффекты адреномиметиков и антиаллергических
средств может позволить создать новые антиаллергические,

противовоспалительные средства с избирательным типом действия.

Цель исследования

Целью данной работы было определение фармако-биохимических

особенностей действия на фибробласты мономерных глюкортикоидов и наноразмерного кортизол-полимерного комплекса.

В качестве объекта исследования были выбраны фибробласты кожи – клетки-мишени фармакологического действия глюкокортикоидов, участвующие в воспалительных и аллергических реакциях при дерматозах.

Задачи исследования

  1. Разработать экспериментальную модель для изучения геномных и негеномных эффектов глюкокортикоидов с использованием культуры клеток фибробластов.

  2. Определить фармако-биохимических маркеры начальных этапов апоптоза фибробластов, индуцированного глюкокортикоидами.

  3. Провести сравнительное исследование геномного и негеномного действия глюкокортикоидов на фибробласты с помощью наноразмерного кортизол-полимерного комплекса.

  4. Провести исследование молекулярных механизмов влияния наноразмерного кортизол-полимерного комплекса на обмен вторичных мессенджеров в культуре фибробластов кожи.

Научная новизна

Впервые показано, что ранние этапы апоптоза фибробластов,

индуцированного глюкокортикоидами, включают изменение

внутриклеточного гомеостаза, которые определяются уменьшением pH цитоплазмы и увеличением внутриклеточной концентрации ионов кальция. Молекулярными мишенями действия глюкокортикоидов являются Na/H-обменник и Са-каналы плазматических мембран фибробластов. Впервые показано, что величина внутриклеточного рН может служить ранним дифференциальным маркером апоптотической и некротической форм гибели фибробластов. Впервые установлено, что в терапевтической области концентраций кортизол подавляет кальциевый ответ фибробластов на ангиотензин II (АII). В физиологическом диапазоне концентраций кортизол потенцирует действие АII, его эффект опосредован взаимодействием с мембранными рецепторами минералкортикоидов.

Практическая значимость

Предложен новый подход для изучения молекулярных механизмов ранних,
мембранотропных эффектов глюкокортикоидов на клетки-мишени,

основанный на использовании наноразмерных глюкокортикоидов.

Применение наноразмерного кортизол-полимерного комплекса позволяет
избирательно регулировать функциональную активность фибробластов на
уровне мембранной рецепторной системы, что открывает новые предпосылки
дальнейшей эволюции топических глюкокортикоидов, применяемых в
дерматологии, с помощью наноразмерного дизайна оригинальных

молекулярных комплексов - разделение терапевтического и побочных эффектов гормонотерапии.

Положения, выносимые на защиту

1. Ранние этапы апоптоза фибробластов, индуцированного
глюкокортикоидами, включают изменение внутриклеточного гомеостаза,
которые определяются уменьшением pH цитоплазмы и увеличением
внутриклеточной концентрации ионов кальция. Молекулярными мишенями
действия глюкокортикоидов являются Na/H-обменник и Са-каналы
плазматических мембран фибробластов.

2. Использование наноразмерного кортизол-полимерного комплекса
позволяет разделить геномные и негеномные механизмы регуляции
активности клетки-мишени.

3. Выявлены два типа экстрагеномного влияния глюкокортикоидов на
фибробласты: 1) потенцирующее действие ГК на эффект AII, реализуемое
через минералкортикоидные рецепторы; 2) антагонистический
мембранотропный глюкокортикоидов, выявляемый при использовании
фармакологических концентраций стероидов.

Внедрение результатов исследования

Результаты настоящего исследования используются в учебной работе кафедры молекулярной фармакологии и радиобиологии им. академика П.В.Сергеева ГБОУ ВПО РНИМУ им. Н.И.Пирогова Минздрава России.

Апробация работы

Основные положения диссертации доложены на 7-ой международной научно-
практической конференции «Достижения фундаментальных наук в решении
актуальных проблем медицины», май 2010 г., Астрахань; на совместной
научной конференции кафедры молекулярной фармакологии и

радиобиологии и НИЛ молекулярной фармакологии РНИМУ им Н.И.Пирогова.

Публикации

По теме диссертационной работы опубликовано 6 печатных работ, в том числе 3 работы в журналах, рекомендованных ВАК Минобрнауки России.

Объем и структура работы

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов, 4-х глав собственных результатов, обсуждения результатов, выводов и списка цитируемой литературы, включающего 130 источников. Работа выполнена на 103 страницах машинописного текста, содержит 26 рисунков, 9 таблиц и 3 схемы.