Содержание к диссертации
Введение
ГЛАВА 1. Обзор литературы 13
1.1 Гиперхолестеринемия как фактор риска атеросклероз-ассоциированных заболеваний 13
1.2 Семейная гиперхолестеринемия 14
1.3 Белок пропротеиновая конвертаза субтилизин-кексинового типа 9 (PCSK9) 1.3.1 Факторы, влияющие на уровень PCSK9 в крови 19
1.3.2 Популяционные исследования, посвященные определению уровня PCSK9 в крови 24
1.3.3 Исследования, посвященные влиянию уровня PCSK9 в крови на сердечнососудистый прогноз 30
1.4 Полиморфизмы гена PCSK9 34
1.4.1 Мутации усиления функции PCSK9 35
1.4.2 Мутации потери функции PCSK9 37
1.5 Моноклональные антитела против PCSK9 40
ГЛАВА 2. Материалы и методы исследования 50
2.1 Дизайн исследования 50
2.2 Характеристика обследованных пациентов селективной клинической группы и популяционных подгрупп, которым выполнялось биохимическое исследование уровня PCSK9 и оценка отдаленного прогноза 51
2.3 Методы биохимического исследования 57
2.4 Методы оценки отдаленных результатов 57
2.5 Характеристика обследованных пациентов, которым выполнялось молекулярно-генетическое исследование 57
2.6 Молекулярно-генетические методы исследования 58
2.7 Статистическая обработка 60
ГЛАВА 3. Результаты собственных исследований 61
3.1 Уровни белка PCSK9 в крови и полиморфизм гена PCSK9 у мужчин и женщин с СГ 61 3.2 Уровни белка PCSK9 в крови в мужской популяции и в популяционных подвыборках мужчин с гипер- и гипохолестеринемиями 63
3.3 Молекулярно-генетический анализ rs505151, rs562556, rs11591147 гена PCSK9 в популяции и в популяционных подвыборках лиц с гипер- и гипохолестеринемиями 66
3.4 Ассоциации белка PCSK9 с rs505151, rs562556, rs11591147 гена PCSK9 и с липидными показателями крови на популяционном уровне 69
3.5 Связь уровня белка PCSK9 в крови с отдаленным неблагоприятным сердечнососудистым прогнозом 75
ГЛАВА 4. Обсуждение результатов 77
Заключение 88
Выводы 90
Практические рекомендации 92
Список сокращений 93
Список литературы
- Семейная гиперхолестеринемия
- Исследования, посвященные влиянию уровня PCSK9 в крови на сердечнососудистый прогноз
- Характеристика обследованных пациентов, которым выполнялось молекулярно-генетическое исследование
- Молекулярно-генетический анализ rs505151, rs562556, rs11591147 гена PCSK9 в популяции и в популяционных подвыборках лиц с гипер- и гипохолестеринемиями
Семейная гиперхолестеринемия
На данный момент не существует общепринятых референсных значений уровня белка PCSK9, но по данным исследований установлено, что нормальный диапазон PCSK9 у человека в крови колеблется от 50 до 600 нг/мл (Lagace T.A. et al., 2006), хотя уровень белка между различными исследованиями разнится значительно. Отмечены незначительные различия в уровнях PCSK9 между мужчинами (608 нг/мл) и женщинами (646 нг/мл) (Mayne J., Raymond A., Chaplin A. et al., 2007). Кроме того, на уровень PCSK9 в крови у женщин влияет климактерический статус: в постменопаузе наблюдаются более высокие значения белка, чем в пременопаузе. В то же время заместительная терапия эстрогенами не имеет влияния на уровень циркулирующего PCSK9. Предполагается, что факт менопаузы модулирует уровни PCSK9 независимо от уровня эстрогена (Lakoski S.G., Lagace T.A., Cohen J.C. et al., 2009), хотя эти выводы не согласуются с тем фактом, что этинилэстрадиол снижает экспрессию PCSK9 у крыс в исследовании Persson L. и соавторов (Persson L., Galman C., Angelin B., Rudling M., 2009). Также существуют данные об отличии в динамике изменения концентрации белка с возрастом у детей в зависимости от пола (Baass A. et al., 2009).
Концентрация PCSK9 в крови имеет свой суточный ритм с низким уровнем этого фермента в период между 15.00 и 21.00 и ночным его пиком в 04:30, причем амплитуда колебаний не превышает ±15%. Persson L. и соавторы в 2010 году выяснили, что концентрация PCSK9 также зависит от приема пищи - у здоровых добровольцев концентрация PCSK9 в крови снижается на 20-35 % после 18 часов голодания (Persson L., Cao G., Stahle L et al., 2010).
В 2007 году Alborn W.E. и соавторы выявили положительную ассоциацию между уровнями белка PCSK9 и ХС-ЛНП в крови (Alborn W.E. et al., 2007). Эта ассоциация подтверждена у людей разной этнической принадлежности, включая европейских американцев, латиноамериканцев, афроамериканцев, китайцев. Она также присутствует у пациентов с сахарным диабетом (Cui Q. et al., 2010). Статины снижают уровень ХС-ЛНП за счет снижения синтеза ХС в печени, в результате чего повышается SREBP-2 и активность рецепторов ЛНП, следовательно, увеличивается поглощение ХС-ЛНП печенью. Однако, лечение статинами, как стало известно после исследования Dubuc G. и соавторов, повышает циркулирующие уровни PCSK9, что может ограничивать их эффективность (Dubuc G., Chamberland A., Wassef H. et al., 2004). Несколько исследований показали, что статины повышают уровень PCSK9 крови на 14-47% в зависимости от типа и дозы используемого статина, а также продолжительности лечения (Dubuc G., Tremblay M., Pare G. et al., 2008; Lakoski S.G., Lagace TA., Cohen J.C. et al., 2009; Costet P. et al., 2010; Welder G., 2010). Тем не менее, в одном из исследований 10 мг симвастатина не изменяли концентрацию PCSK9, несмотря на торможение синтеза ХС печенью и значительное снижение уровня ХС-ЛНП (Lakoski S.G., Xu F., Vega G.L. et al., 2010). Это может быть связано либо с низкой дозой статина, либо c индивидуальным эффектом симвастатина в отношении уровня изучаемого белка. Во время исследования, проведенного с 80 мг аторвастатина, максимальный подъем PCSK9 (47%) наблюдался на 4 неделе и поддерживался в течение 16 недель лечения (Welder G. et al., 2010). Хотя в исследовании Costet P. и соавторов 10 мг аторвастатина значительно повышали концентрации PCSK9 на 24% уже после первого дня применения (Costet P. et al., 2010).
Фибраты, как было показано, подавляют экспрессию PCSK9 как in vitro в культуре клеток гепатоцитов человека (Kourimate S. et al., 2008), так и in vivo у мышей посредством рецепторов, активируемых пероксисомными пролифераторами (PPAR, Peroxisome proliferator-activated receptors) (Lambert G., Jarnoux A.L., Pineau T. et al., 2006). Однако, эффект фибратов на уровень циркулирующего PCSK9 в организме человека остается спорным. Анализ данных исследования FIELD (Fenofibrate Intervention and Event Lowering in Diabetes) впервые показал, что 6-недельное лечение фенофибратом (200 мг/сут) умеренно снижает концентрацию PCSK9 на 8,5% у пациентов с сахарным диабетом 2 типа (Lambert G., Ancellin N., Charlton F. et al., 2008). Также было обнаружено, что фенофибрат в дозе 145 мг в сутки снижает уровень PCSK9 в крови на 13% в небольшой группе пациентов с сахарным диабетом 2 типа, получавших ранее статины, и что величина снижения уровня PCSK9 положительно коррелирует со снижением уровня ХС-ЛОНП в крови (Chan DC, Hamilton SJ, Rye KA, et al., 2010). В противоположность этому по крайней мере три независимых группы исследователей сообщили, что фибраты увеличивают уровень PCSK9 как у пациентов с сахарным диабетом, так и у не страдающих диабетом пациентов (Mayne J., Dewpura T., Raymond A. et al., 2008; Troutt J.S. et al., 2009; Costet P. et al., 2010). По данным исследования Troutt и соавторов 12-недельное лечение фенофибратом в дозе 200 мг в сутки привело к 25%-ному увеличению циркулирующего PCSK9, которое отрицательно коррелировало с процентами изменений в ХС-ЛНП (Troutt J.S. et al., 2009). Также были получены данные, что сочетание фенофибрата в дозе 160 мг в день и аторвастатина в дозе 10 мг в день не влияет на концентрацию в крови PCSK9 по сравнению с каждым из препаратов в монотерапии (Costet P. et al., 2010).
Эзетемиб является гипохолестеринемическим препаратом, который снижает кишечную абсорбцию ХС (Jeu L. et al., 2003). Интересно, что лечение эзетемибом в комбинации со статинами было связано со значительным увеличением уровней PCSK9 крови по сравнению с пациентами, получающими только статины, показывая, что снижение ХС-ЛНП на фоне терапии эзетимибом может непосредственно привести к увеличению PCSK9 (Dubuc G., Tremblay M., Pare G. et al., 2010). Lakoski S.G. и соавторы рассмотрели взаимосвязь между уровнями PCSK9 и ответами на эзетимиб, статин или эзетимиб плюс статин у пациентов с дислипидемией, но в этом исследовании не было выявлено четкой взаимосвязи между уровнем PCSK9 и реакцией на снижение уровня ОХС (Lakoski S.G., Xu F., Vega G.L. et al. 2010). Кроме того, Okada K. и соавторы опубликовали исследование, показывающее, что добавление к лечению эзетимиба не повысило уровень PCSK9 у пациентов, уже получающих статины (Okada K. et al., 2012). В более позднем клиническом исследовании, опубликованном Berthold и соавторами, с помощью эзетимиба достигалось значительное снижения ХС-ЛНП (до 22%), но незначительное изменение уровня PCSK9 крови (до 9.9 %) (Berthold H.K. et al., 2013). Таким образом, необходимы дальнейшие исследования, чтобы определить влияние фибратов и эзетемиба на метаболизм PCSK9.
Также согласно недавно проведенным исследованиям уровень PCSK9 статистически значимо повышается при остром ИМ (Almontashiri N. et al., 2014) и при сепсисе (Boyd J.H. et al., 2016).
Исследования, посвященные влиянию уровня PCSK9 в крови на сердечнососудистый прогноз
Средний Лп(а) в селективной группе составил 22,4±9,36 мг/дл (минимальное значение - 9,84 мг/дл, максимальное - 48,65 мг/дл). Отличие между полами незначимые. У 18,8% пациентов концентрация Лп(а) превышала референсное значение 30 мг/дл.
Средний АпоА-1 равнялся 149,95±27,26 мг/дл (минимальное значение -116,2 мг/дл, максимальное - 203,8 мг/дл). Отличия между полами незначимые. У 20% пациентов значения превышали референсные (120-190 мг/дл у женщин и 110-170 мг/дл у мужчин).
Средний АпоВ составлял 144±29,7 мг/дл (минимальное значение - 76,8 мг/дл, максимальное - 184,7 мг/дл). Отличия между полами незначимые. У 93% пациентов значения превышали референсные (100 мг/дл).
Среднее отношение АпоВ/АпоА-1 равнялось 0,99±0,29 (минимальное - 0,64, максимальное - 1,59). Отличия между полами незначимые. У 93% пациентов значения превышают референсное ( 1). Повышение печеночных трансаминаз было зарегистрировано у 32% пациентов. Из них у половины присутствовало повышение как аланинаминотрансферазы (АЛТ), так и аспартатаминотрансферазы (АСТ), а у половины - изолированное повышение АЛТ.
По данным эхокардиографии (ЭхоКГ) стеноз аортального клапана присутствовал у 11,3% пациентов (I степени – 7,5%, II степени – 3,8% от общего количества обследованных). Пациентам было выполнено УЗИ СА с измерением ТИМК ОСА в дистальном сегменте на протяжении 10 мм от бифуркации по дальней стенке сосуда в режиме on-line. Рассчитывался средний показатель из 3-х измерений с обеих сторон, в анализ включали максимальный средний показатель (справа или слева); ТИМК ОСА, превышающая 0,9 мм, была у 54% пациентов.
Медикаментозную терапию по поводу сердечно-сосудистых заболеваний на момент первичного осмотра принимали 57% пациентов группы. Из них лечение одним препаратом проводилось у 40% пациентов, двумя группами препаратов – 43,3%, тремя различными группами препаратов – 10% и четырьмя различными группами – 6,7% пациентов. Бета-адреноблокаторы принимали 50% пациентов, получающих медикаментозную терапию на момент первичного осмотра, ингибиторы ангиотензинпревращающего фермента – 33,3%, блокаторы рецепторов ангиотензина II – 10%, антагонисты кальция - 16,7%, диуретики – 33,3%, гипотензивные средства центрального действия – 6,7%, антиагреганты -26,7%, ингибитор абсорбции холестерина – 10%.
В группе СГ для 12 пациентов с диагнозом «определенная» СГ на основании клинических критериев выполнено молекулярно-генетическое исследование - проведено таргетное секвенирование кодирующих и не кодирующих районов гена PCSK9. Средний возраст пациентов был 47,3±14,3 лет. В группу пациентов входили 10 неродственных лиц и одна семья из двух человек (мать и сын).
Также в исследование были включены 3 подгруппы мужчин из популяционной выборки жителей г. Новосибирска в возрасте 44-73 лет (средний уровень АД 145,5±0,74/90,5±0,4 мм. рт. ст., средний ИМТ 27,4±0,38 кг/м2), обследованных в рамках международного проекта HAPIEE фонда WellcomeTrust (Великобритания) «Детерминанты сердечно-сосудистых заболеваний в Восточной Европе» (руководители проекта в Новосибирске - проф. Никитин Ю.П. и проф. Малютина С.К.), популяция 9360 человек.
В программу скринингового (эпидемиологического) обследования популяционной выборки входили: демографические и социальные данные, опрос о привычке курения и употреблении алкоголя, диетологический опрос, история хронических заболеваний, употребление медикаментов, кардиологический опрос по Роуз, антропометрия, 3-х кратное измерение АД, спирометрия, запись ЭКГ, выявление «Определенной ИБС» по валидизированным эпидемиологическим (либо ИМ, определенный по ЭКГ, либо безболевая форма ИБС по ЭКГ, либо стабильная стенокардия напряжения ФК II-IV по опроснику Роуз) и клинико-функциональным критериям (по данным расшифровки ЭКГ по Минессотскому коду) и другие обследования. «Определенная ИБС» была выявлена у 21,8% мужчин, не выявлена у 78,2% мужчин.
Поскольку известно, что прием статинов связан с увеличением уровня PCSK9 в крови (Careskey Н.Е. et al, 2008), то перед формированием 3-х подгрупп из общей популяционной выборки были исключены все лица, принимающие какие-либо липидснижающие препараты, в том числе статины. Далее, используя метод случайных чисел, в собственно популяционную подгруппу мужчин были включены 266 человек (возраст 60,4±7,4 лет, ИМТ 25% кг/м2 у 63% человек, ожирение - у 22%, 50% курили, «Определенная ИБС» - у 20%, СД 2 типа - у 9%).
В подгруппу мужчин с ГХС были включены 46 человек с уровнем ОХС 194 мг/дл, или 5,0 ммоль/л, (возраст 57,2±8,3 лет, ИМТ 25% кг/м2 у 82% человек, ожирение - у 27%, 31% курили, «Определенная ИБС» - у 10%, СД 2 типа - у 20%).
В подгруппу мужчин с гипохолестеринемией были включены 18 человек с уровнем ХС 155 мг/дл, или 4,0 ммоль/л, (возраст 64,3±6,0 лет, ИМТ 25% кг/м2 у 83% человек, ожирение - у 6%, 33% курили, «Определенная ИБС» - у 44%, СД 2 типа в этой подгруппе не было).
Характеристика обследованных пациентов, которым выполнялось молекулярно-генетическое исследование
В настоящем исследовании были изучены концентрации белка PCSK9 у женщин и мужчин с СГ. Средний уровень PCSK9 в крови в селективной клинической группе (мужчины и женщины) в нашем исследовании составил 288,5 ± 16,2 нг/мг. Наши данные практически не отличаются от данных Raal F. и соавторов, в исследовании которых у пациентов с гетерозиготной СГ, получающих статины, средний уровень PCSK9 был 278±20 нг/мл (338±50 нг/мл при гомозиготной СГ) (Raal F., Panz V., Immelman A., Pilcher G. 2013). Полученный результат, свидетельствующий о том, что у женщин с СГ уровень PCSK9 в крови в 1,9 раза выше, чем у мужчин с СГ (р 0,01), отличается от результатов Маупе и соавторов и Cui Q. и соавторов (данные популяционных исследований). Маупе и соавторы отметили незначительные различия в уровнях PCSK9 крови между женщинами (646 нг/мл) и мужчинами (608 нг/мл) в своем исследовании в 2007 году (разница в 1, 06 раза) (Маупе J., Raymond A., Chaplin А. et al, 2007). При оценке половых различий уровня PCSK9 Cui Q. и соавторами в их исследовании было выявлено, что уровни PCSK9 в крови были немного выше у женщин (71.00 ± 32.17 нг/мл), чем у мужчин (68,29 ± 28,73 нг/мл) (р 0,05) (разница в 1,04 раза). После стандартизации по клиническим и биохимическим характеристикам, значительные различия в уровнях PCSK9 крови между полами сохранялись (р 0,01) (Cui Q., Ju X., Yang Т. et al, 2010). Полученные нами данные в большей степени согласуются с данными Lakoski и соавторов (популяционное исследование), которые обнаружили, что средние уровни белка PCSK9 значительно выше у женщин (517 нг/мл), чем у мужчин (450 нг/мл) (разница в 1,15 раз) (р 0,0001), причем значительные различия в уровнях в крови PCSK9 между полами сохранялись в их исследовании после корректировки по возрасту, этнической принадлежности, ИМТ, систолическому АД, климактерическому статусу, уровню глюкозы, ХС-ЛНП, ХС-ЛВП, триглицеридов и СРБ (р 0,0001) (Lakoski S.G., Lagace T.A., Cohen J.C., Horton J.D., Hobbs H.H., 2009). Учитывая также данные о том, что статины повышают уровень PCSK9 крови на 14-47%, в зависимости от типа и дозы используемого статина, а также от продолжительности лечения (Lakoski S.G., Lagace T.A., Cohen J.C.et al., 2009; Dubuc G., Tremblay M., Pare G. et al., 2010), можно сделать предположение о возможном большем эффекте статинов на уровень PCSK9 у женщин, чем у мужчин, что требует дальнейших исследований.
Нами были получены данные о том, что уровень белка PCSK9 коррелирует с уровнями ОХС и ХС-ЛНП при СГ. Данные результаты не противоречат результатам Мешкова А.Н. и соавторов (у пациентов с СГ), Alborn и соавторов, Lakoski и соавторов (популяционные исследования), которые в своих исследованиях отмечали от небольшой до умеренной корреляционной связи между уровнем PCSK9 и уровнями ОХС и ХС-ЛНП (Мешков А.Н. и соавт., 2012; Alborn W.E. et al., 2007; Lakoski S.G. et al., 2009). Также по данным исследования Raal и соавторов в объединенной группе (пациенты с СГ, не получающие лечения (гетерозиготная СГ 20 человек, гомозиготная СГ 20 человек) и 20 человек группы контроля) была выявлена корреляция уровня PCSK9 с ХС-ЛНП (r=0,6769; p 0,0001) и с ОХС (r=0,6745; p 0,0001). Тем не менее корреляция с ОХС и ХС-ЛНП утратила значимость после терапии высокими дозами статинов (Raal F., Panz V., Immelman A., Pilcher G. 2013).
Полученная нами отрицательная корреляция уровня PCSK9 с возрастом, свидетельствующая о том, что у лиц среднего возраста уровни в крови PCSK9 более высокие, чем у пожилых лиц, согласуется с данными исследования Мешкова А.Н. и соавторов (2012). В то же время наши данные не совпадают с данными Mayne и соавторов: в своем исследовании они установили, что уровень PCSK9 крови не коррелирует с возрастом (Mayne I.J. et al., 2013). Также наши результаты не согласуются с результатами исследования 3138 пациентов из когорты DallasHeartStudy Lakoski и соавторов, где в однофакторном анализе было обнаружено, что концентрация PCSK9 в крови была достоверно положительно связана возрастом, хотя коэффициент корреляции был низкими (r 0,20), также после оценки корреляции у женщин и мужчин была найдена лишь слабая корреляция между уровнями PCSK9 крови и возрастом у женщин (r=0,2) и никакой существенной корреляции с возрастом у мужчин (Lakoski S.G. et al., 2009).
Хотя взаимосвязь уровня PCSK9 и возраста показана в исследовании Cui Q. и соавторов, где с помощью многофакторного регрессионного анализа было показано, что возраст (наравне с ОХС, ТГ, систолическим АД, полом) является параметром, который оказывает значительное влияние на уровень PCSK9 крови и является предиктором уровня PCSK9 у женщин (Cui Q. et al., 2010), все же не согласуются с нашими результатами, так как авторы описывают прямую корреляцию уровня белка с возрастом. Можно предположить, что взаимоотношение уровня PCSK9 и возраста различно в разных этнических группах.
В нашем исследовании была показана положительная корреляционная связь уровня белка PCSK9 с ТИМК ОСА у пациентов с СГ. Наши данные не протеворечат данным исследования PLIC (Progression of Lesions in the Intima of the Carotid, (n=1518)), где уровень PCSK9 слабо коррелировал с максимальной ТИМК СА (r=0,056, p=0,034 r=0,081, p 0,01), но не со средней ТИМК (r=0.026, p=0.331) (Tibolla G., et al., 2014). По данным исследования Raal и соавторов в объединенной группе (пациенты с СГ, не получающие лечения (гетерозиготная СГ 20 человек, гомозиготная СГ 20 человек) и 20 человек группы контроля) была выявлена умеренная корреляция с ТИМК ОСА (r=0,3916; p 0,0022) (Raal F., Panz V., Immelman A., Pilcher G. 2013), что практически совпадает с нашими данными. Полученные нами результаты не совпадают с данными Zhu и соавторов, которые не выявили корреляции между PCSK9 и ТИМК в когорте пожарных, не страдающих ССЗ. Также в своем исследовании они не нашли связи уровня PCSK9 с прогнозом, о чем, напротив, свидетельствуют наши результаты, полученные при исследовании популяционной выборки.
Молекулярно-генетический анализ rs505151, rs562556, rs11591147 гена PCSK9 в популяции и в популяционных подвыборках лиц с гипер- и гипохолестеринемиями
В нашем исследовании не было выявлено корреляционной связи уровня PCSK9 крови с ТГ, хотя такая связь была обнаружена в исследованиях Cui Q. и соавторов (Cui Q. et al., 2010), в исследовании Lakoski S.G. и соавторов (Lakoski S.G. et al., 2009), Tibolla G. и соавторов (Tibolla G., et al., 2014), Brouwers M. и соавторов (Brouwers M.C.G.J., et al., 2011), Chernogubova E. и соавторов (3 когорты POLCA, OLIVIA, CORONA) (Chernogubova E., et al., 2012), Zhu Y.M. и соавторов (Zhu Y.M., et al., 2015).
При корреляционном (однофакторном) анализе нами не было получено связи между возрастом мужчин, их ИМТ, уровнем систолического и диастолического АД, наличием сахарного диабета 2 типа, «Определенной ИБС» и уровнями PCSK9. Наши данные практически совпадают по этому аспекту с результатами исследования Mayne I.J. и соавторов (2013), но не согласуются с результатами других исследований (Lakoski S.G. et al., 2009; Cui Q. et al., 2010), в которых была получена корреляция уровня в крови PCSK9 с возрастом мужчин, их ИМТ, уровнями систолического и диастолического АД, хотя авторами отмечены низкие коэффициенты корреляции (r 0,20).
В настоящем исследовании использованием модели многофакторного регрессионного анализа было показано, что вариабельность показателя PCSK9 обусловлена влиянием таких факторов, как показатели липидного профиля крови, глюкозы, вчСРП, возраст мужчин, ИМТ, уровни систолического и диастолического АД, наличие сахарного диабета 2 типа и «Определенной ИБС», лишь на 15% (R Square =0,155, p 0,001). Было получено значимое влияние только уровня ХС-ЛВП (стандартизованный коэффициент Beta=0,238, p=0,023), ТГ (Beta =0,253, p=0,049) и ХС-ЛНП (Beta =0,751, p=0,009) на концентрацию белка PCSK9. Полученные результаты не согласуются с данными исследования Cui Q. и соавторов (2010), в котором авторы заключили, что уровни ОХС, систолическое АД, пол и возраст являются параметрами, оказывающими значительное влияние на уровень PCSK9 крови.
Таким образом, выявлены корреляционные связи белка PCSK9 с уровнями в крови ОХС (0,231, р 0,01), ХС-ЛНП (0,198, р 0,01), ХС-ЛВП (0,128, р 0,05), не-ХС-ЛВП (0,217, р 0,01), а также с глюкозой крови (0,211, р 0,01). Многофакторный регрессионный анализ показал, что вариабельность PCSK9 обусловлена влиянием других факторов лишь на 15% (RSquare =0,155, p 0,001). Выявлено значимое влияние уровня ХС-ЛВП (стандартизованный коэффициент Beta =0,238, p=0,023), ТГ (Beta =0,253, p=0,049) и ХС-ЛНП (Beta =0,751, p=0,009) на уровень в крови белка PCSK9.
В нашем исследовании были выявлены статистически значимые различия между генотипами полиморфизма E670G (rs505151) гена PCSK9 с показателями липидного профиля крови в европеоидной популяции Западной Сибири. Оказалось, что гетерозиготы по данному полиморфизму имеют более низкий уровень ОХС и индекса атерогенности, результаты не отличались между полами. Подобный характер ассоциации может зависеть от совокупности вклада факторов образа жизни и окружающей среды, а также других генетических особенностей индивидов, и требует дальнейшего изучения.
В нашем исследовании не было выявлено статистически значимых различий между генотипами полиморфизма V474I (rs562556) гена PCSK9 с показателями липидного профиля крови в европеоидной популяции Западной Сибири
Также в нашей работе не было выявлено статистически значимых различий между генотипами E670G (rs505151) и V474I (rs562556) гена PCSK9 с показателями липидного профиля крови в группе с гиперхолестеринемией.
В проведенном исследовании не было выявлено статистически значимого отличия в уровнях PCSK9 между гомозиготами по дикому типу и гетерозиготами E670G (rs505151) PCSK9 среди пациентов популяционной группы и группы гиперхолестеринемии. При выполнении анализа различий в уровне белка PCSK9 между различными генотипами V474I (rs562556) PCSK9 в группе пациентов с гиперхолестеринемией не было обнаружено статистической значимости.
В группе с нормальными и низкими значениями ОХС выполнен анализ ассоциации мутации R46L (rs11591147) гена PCSK9 с показателями липидного профиля крови. Выявлена статистически значимая ассоциация редкого аллеля Т с низким уровнем ОХС. Подобный характер ассоциации для данной мутации определяется и в других популяциях мира (Abifadel M. et al. 2009, Humphries S.E. et al., 2009).
В работе были изучены отдаленные результаты в течение 7 лет после проведения однократного популяционного обследования мужчин (у 6,8% мужчин развился ИМ, у 4,4% мужчин была зарегистрирована ССС). Показатели липидов крови не отличались между лицами с благоприятным и неблагоприятным прогнозом.
При проведении корреляционного анализа в нашем исследовании была показана связь уровня белка PCSK9 с сердечно-сосудистой смертностью (коэффициент корреляции Пирсона = 0,144, р 0,05), но не с наличием ИМ в период проспективного наблюдения.
При проведении многофакторного регрессионного анализа была выявлена значимая независимая ассоциация уровня белка PCSK9 с фактом сердечнососудистой смерти в 7-ми летний отдаленный период (ОШ=1,01 95% ДИ 0,89-1,35 р=0,048). Полученное значение ОШ указывает на то, что у мужчин при увеличении уровня в крови белка PCSK9 на 1 нг/мл относительный риск развития сердечно-сосудистой смерти в течение 7 лет после обследования (независимо от других изученных нами параметров) увеличивается на 1%. Наши данные совпадают с данными проспективного когортного исследования Leander и соавторов, где было показано, что концентрация в крови PCSK9 связана с риском будущих СС событий независимо от установленных факторов риска (ОШ 1,48 95% ДИ 1,12-1,95) (Leander K. et al., 2016). Но они не совпадают с данными исследования Zhu и соавторов, которые не выявили значимой связи между концентрациями PCSK9 и сердечно-сосудистыми событиями у мужчин-пожарных, не страдающих ССЗ (Zhu Y.M. et al., 2015).