Введение к работе
Актуальность темы. Ишемическая болезнь сердца (ИБО, основой которой является атеросклероз коронарных артерий, по-прежнему остается основной причиной инвалидности и смертнбсти среди наиболее трудоспособной части населения во всех индустриально развитых странах, в том числе в России.
Согласно данным экспериментальных и эпидемиологических исследований обнаружена выраженная связь между высоким уровнем холестерина (ХС) сыворотки крови, особенно ХС липопротеинов низкой плотности (ЛНП), и развитием атеросклероза и ИБС (Орехов А.Н. и соавт., 1995; Константинов В.В. и соавт., 1996; Климов А.Н., Ни-кульчева Н.Г., 1984). ЛНП представляют собой гетерогенный класс липопротеинов. по-скольку внутри их плотностного градиента (1,019-1,063 г/мл) обнаружены субпопуляции частиц, различных как по физикохимическим свойствам, так и по биологическим функциям (Chapman M.J. et al., 1988; Krauss R.M., 1991; Campos H. et al.. 1992).
В последние годы интенсивно проводятся исследования, выясняющие роль отдельных субфракций ЛНП в обмене липопротеинов как в норме (Krauss R.M.. 1982; Campos Н. et al.. 1992; Esterbauer H., Jurgens G., 1993), так и при атеросклерозе и ИБС (De Graaf J. et al., 1992; ChapmanVJ. et al., 1995. 1996). Было обнаружено, что с увеличением плотности субфракций ЛНП увеличивается содержание в них свободного ХС и его эфиров. Мелкие плотные субфракции ЛНП слабо связываются с В/Е рецепторами In vitro (N1-gon F. et al., 1991; Chappey B. et al.. 1995), длительное время присутствуют в плазме in vivo (Caslake M.J. et al.. 1993) и вызывают накопление ХС в культивируемых гладкомышечных клетках (Austin М.A. et al.. 1990). Таким образом, мелкие плотные частицы ЛНП являются наиболее атерогенными. поэтому исследование субфракционного состава ЛНП имеет определенное значение для понимания патогенетических механизмов развития атеросклероза и предшествующих ему дислипопротеинемий (ДЛП).
Недавно были получены доказательства, что наряду с повышенным содержанием ХС в ЛНП, ключевую роль в инициации и развитии атеросклероза играет окислительная модификация ЛНП (Stelnbrecher U.P.. 1990; Esterbauer Н. etal., 1990, 1992; Климов А.Н.. Ни-кульчева Н.Г.. 1995). Эта концепция базируется на следующих экспериментальных результатах: 1) ЛНП, экстрагируемые из атероскле-
ротических бляшек человека и животных имеют физические и биологические свойства, подобные свойствам окисленных in vitro ЛНП. и проявляют способность к повышенному взаимодействию ср скэвенд-жер-рецепторами макрофагов, которые трансформируются р пенистые клетки ( Via D. P. etal.. 1985; Haberland М.Е. etal.. 1988; Sparrow С. P. etal., 1989; Steinberg D.. 1992; Keldar S. etal., 1994); 2) обнаружено, что некоторая часть ЛНП в русле крови больных атеросклерозом прявляет свойства окисленных ЛНП (Palins-kl W. et al.. 1989); ЗІ окисленные ЛНП являются иммуногенными частицами и антитела против полученных in vitro окисленных ЛНП взаимодействуют с эпитопами ЛНП. полученных из атеросклеротичес-ких бляшек (но не из нормальной сосудистой ткани) (Shaikh М. et al.. 1988); 4) некоторые антиоксиданте, такие как пробукол. препятствуя окислительной модификации ЛНП, оказывают положительный эффект, по крайней мере при экспериментальном атеросклерозе (Климов А.Н., Никульчева Н.Г.. 1995).
Однако даже у больных с выраженным атеросклерозом не удается обнаружить значительной окислительной модификации ЛНП, циркулирующих в крови, так как существует целый комплекс антиокси-дантных систем (Меньшикова Е.Б. и соавт., 1994). Тем не менее. По некоторым данным. ЛНП. выделенные из крови больных коронарным атеросклерозом более чувствительны к окислению, чем ЛНП здоровых лиц (Орехов А.Н. и соавт.. 1995). Детальных исследований резистентности к окислению отдельных субфракций ЛНП у больных ИБС проводилось мало.
Настоящая работа посвящена изучению субфракционного состава и. резистентности к окислений ЛНП у больных ИБС и атерогенныт ДЛП и разработке простого способа исследования резистентности к окислению ЛНП сыворотки крови.
Целью настоящей работы являлось исследование состава и резистентности к окислению отдельных субфракций ЛНП. а также ЛОНП у больных ИБС.
Задачи исследования.
-
Исследовать состав и резистентность к окислению отдельных субфракций ЛНП .у здоровых людей.
-
Исследовать состав и резистентность к окислению отдельных субфракций ЛНП у больных ИБС с ДЛП Пб типа.
-
Исследовать состав и резистентность к окислению отдельных субфракций ЛНП у больных йнсулиннезависимым сахарным диабетом с таким же типом ДЛП, как и больных ИБС.
4. Разработать простой способ исследования резистентности к окислению ЛНП сыворотки крови.
Научная новизна. Наряду с исследованиями, которые нашли свое отражение в научной литературе, большинство данных было получено нами впервые. Изучены особенности субфракционного состава и резистентности к окислению ЛНП у больных ИБС с дислипопротеи-немией 116 типа.
Впервые была показана связь между изменениями содержания холестерина, белка, исходного уровня продуктов ПОЛ и резистентности к окислению ЛОНП и отдельных субфракций ЛНП со степенью тяжести ИНЗСД.
С целью внедрения в клиническую практику был разработан оригинальный способ определения резистентности к окислению ЛНП сыворотки крови, который позволяет сравнительно быстро оценивать предрасположенность ЛНП к окислительной модификации.
Теоретическое и практическое значение работы.
Теоретическое значение данной работы состоит в выяснении особенностей во-первых, липидно-белкового состава отдельных субфракций ЛНП и, во-вторых, их резистентности к окислению у больных ИБС, а также у больных ИНЗСД. Полученные данные свидетельствуют о том, что у больных ИБС с ДЛП Нб типа вероятно в результате нарушения нормального процесса трансформации ЛОНП в субфракции ЛНП, а также снижения скорости их метаболизма, наблюдается повышенное количество ХС-нагруженных ЛОНП, более легких и более плотных субфракций ЛНП. Кроме того, подобные изменения холестерин-белкового спектра ЛОНП и отдельных субфракций ЛНП обнаружены и у больных ИНЗСД, особенно его тяжелой формой. Установлено, что ЛОНП и все исследованные субфракции ЛНП, как у больных ИБС с ДЛП 116 типа, так и у больных тяжелой формой ИНЗСД обладают сниженной резистентностью к окислению по сравнению со здоровыми людьми. Причем снижение резистентности к окислению наиболее выражено у более плотных субфракций ЛНП. Полученные результаты позволили заключить, что»у больных ИБС с дислипопротеинемией 116 типа и у больных тяжелой формой ИНЗСД наблюдаются сходные изменения в ЛОНП и во всех субфракциях ЛНП, в частности, повышение содержания холестерина и снижение резистентности к окислению.
Практическое значение настоящей работы заключается в том, что с целью внедрения в клиническую практику разработан методически простой способ исследования резистентности к окислению ге-парин-осажденных ЛНП сыворотки крови. Разработанный способ явля-
ется достаточно информативным и позволяет быстро оценить предрасположенность ЛШ1 к окислительной модификации, являющейся одним из риск-факторов развития атеросклероза. На защиту выносятся следующие положения:
У больных ИБС с ДЛП 116 типа содержание холестерина повышено в основном в более плотных субфракциях ЛНП.
У больных ИБС наиболее плотные субфракции ЛНП обладают повышенным исходным уровнем продуктов ПОЛ и сниженной резистентностью к окислению.
У больных ИБС с ДЛП 116 типа и у больных тяжелой формой ин-сулиннезависимого сахарного диабета в субфракциях ЛНП наблюдаются сходные изменения холестерин-белкового состава и резистентности к окислению.
Апробация работы. Основные положения и выводы данной диссертационной работы были доложены на Сибирской кардиологической конференции "Диагностика, лечение и профилактика сердечно-сосудистых заболеваний" (Новосибирск. 1996), конференции "Современные лечебные и диагностические технологии в медицине" (Новосибирск, 1997) и I Конгрессе Ассоциации кардиологов стран СНГ (Москва. 1997).
Публикации. По теме диссертации опубликовано 7 печатных работ.
Объем и структура диссертации. Данная работа изложена на 154 страницах машинописного текста, содержит 15 таблиц. 22 рисунка и состоит из введения, литературного обзора, описания собственных исследований, включающего материалы и методы, 4 главы собственных результатов и их обсуждение, а также выводов и списка литературы, состоящего из 211 источников.