Введение к работе
Актуальность темы. Наследственные изменения в структуре аполипопротеинов, участвующих в метаболизме липопротеинов, играют существенную роль в Формировании дислипопротеидемии. и возможно, способствуют прекдевременному развитию атеросклероза, т.к.' обусловливают их структурные и Функциональные изменения, связанные с дефектом в биосинтезе, секреции и катаболизме /Assman et al, 1985/.
К числу влияющих на транспорт липопротеидов, относятся гены аполипопротеинов A-i. A-II, В, C-I, C-II, c-lll, E, а также ген липопротеинлипазы и ЛНП-рецепторов.
Особенности содержания аполипопротеинов в плазме крови обусловлены комбинированным воздействием ген-ген и ген-окружающая среда, включающим сочетанное неблагоприятное влияние этих Факторов на развитие атерогенных дислипопротеидемии /Berg, 1987/. Поскольку апо В-100 является лигандом специфических ЛНП-рецепторов, он играет центральную роль в гомеостазе ХС. а также атерогенном потенциале апо в-содеркащих ЛИ. Актуальным является изучение роли генетических вариантов апо в в развитии атерогенных дислипопротеидемии и заболевании, связанных с АС.
В 3'-концевой области гена апо В, не несущей информации о синтезе белка /т.н. нетранскрибируемая область/ описан минисателлитный участок, состоящий из повторяющихся Фрагментов, каждый из которых включает 15 пар нуклеотидов с минимальными различиями в последовательности, Миннсателлит может состоять у разных лиц из разного количества, таких Фрагментов /элементов/.
Chan на основании данных, отражающих большую частоту определенных аллельных вариантов длин этой области у пациентов, перенесших инфаркт миокарда, выдвинул гипотезу, что определенные
- З -аллельные варианты этого минисателлита могут быть ассоциированы с концентрацией в плазме ХС, апо В, а также преждевременным раовитием AC /Chan L. , 1989/.
Хорошо изучен дефект рецептора ЛНП, открытый Brown и Goldstein в 19Э6 г., являющийся причиной семейной гиперхолестеринемии /Brown M.S.. Л.L.Goldstein, 1986/. Однако, нарушение захвата частиц ЛНП клеткой может быть обусловлено также патологией лиганда рецептора ЛНП, т.е. самого апо В, что обусловливает снижение сродства ЛНП к. рецептору /Soria. 1989/. В 1989 году L.Soria описал мутацию в домене ' гена апо В. ответственном за связь с ЛНП-рецептором. приводящую к замене аргинина на глутамин в 3500 аминокислотном остатке. Были получены доказательства того, что именно эта мутация ассоциирована с гиперлипидемией и ИБС. Она была названа наследственным дефектом апо В-100 /Soria L., 1989/. Наследственный дефект апо В-100 встречается в различных популяциях с частотой 1:500-1:700 /Jnnerarity et ді.,1990/
Цель настоящего исследования: выяснение роли аллельных зариантов гена апо Б как Факторов. взаимосвязанных с итерогенными нарушениями липид-транспортной системы плазмы крови.
Задачи исследования.
1. Изучить аллельные варианты длин полиморфного
:инисателлита 3'-нетранскрибируемой области гена апо В, а также
ать сравнительную оценку частот различных аллелей в выборке
ужчин из популяции г. Москвы и в группе больных ИБС.
2. Выявить ассоциацию между длиной минисателлита
єна апо В и показателями /липидными и апобелковыми/ спектра
япопротеидов плазмы крови у представителей популяции мужчин
- A -
г. Москвы и у больных ИБС.
3. Провести поиск, наследственного дефекта апо В-100: точечной мутации с заменой аргинина на глутамин в положении -.500 аминокислотного остатка. т.е. в области взаимодействия с ЛНП-рецептором среди лиц с высоким уровнем апо В /> 160 мг/дл/, и изучить взаимосвязь этого дефекта с наличием и характером семейной гиперлипидемии, с проявлениями коронарного и периферического атеросклероза.
Новизна исследования.
На материалах обследования случайной выборки из популяции мужчин г. Москвы и группы больных ИБС мужчин возраста 40-54 лет при изучении аллельных вариантов и характера распределения длин минисателлита 3'-нетранскрибируємоїі области гена апо В наиболее распространенной оказалась длина минисателлита, соответствующая 34-36 Фрагментам, каждый из которых состоит из 15 повторяющихся пар нуклеотидов.
Было обнаружено, что большая длина изучаемого минисателлита, состоящая из 46-50 Фрагментов, встречается у обследованных больных коронарным атеросклерозом в 2 раза чаще, чем в случайной выборке из популяции мужчин. Выявлена ассоциация между большой длиной минисателлита гена апо В, состоящего из 46-50 повторяющихся Фрагментов, с повышенным уровнем в сыворотке крови ХС, ХС ЛНП. ТГ и апо В, т.е. атерогенными сдвигами в системе липопротеидов.
Триглицеридемия, встречающаяся в выборке из популяции мужчин - носителей короткого минисателлитного участка /30 Фрагментов/ не сопряжена с повышенным ХС ЛНП и пониженным ХС ЛВП. что позволяет расценивать ее как неатерогенную, тогда как у лиц, имеющих длинные минисателлитные участки /46-50 Фрагментов/,
триглицеридемия сопряжена с атерогенными сдвигами в системе липидного транспорта: сниженным уроЕнем ХС ЛВП и повышенным соотношением апо В/апо A-I.
Впервые в популяции г. Москвы описан случай наследственного дефекта апо В, который явился причиной наследственной гиперлипидемии, ассоциированной с ИБС. Показано, что наследственный дефект апо В может быть одним из Факторов, обусловливающих полигенную гиперлипидемию в семье. Показан положительный эффект применения ловастатина для коррекции гиперлипидемии. обусловленной этой мутацией.
Практическая ценность работы.
Сравнительное изучение характера распределения длин минисателлита 3'-нетранскрибируемой области гена апо В в выборке из популяции г. Москнн и у больных ИБС позволило установить, что аллельные варианты длинного минисателлита, соответствующие 46-50 Фрагментам, ассоциированы с повышенным уровнем ХС, ХС ЛНП. ТГ и апо В плазмы крови и могут быть использованы в качестве маркеров для выявления пациентов с врожденной предрасположенностью к возникновению атерогенной ДЛП. Этим лицам строго показано проведение профилактических и лечебных мероприятий по коррекции дислипопротеидемии и контролю других Факторов риска ИБС.
Обнаружено, что длина указанного минисателита гена апо В состоящего из 30 Фрагментов. может быть ассоциирована с триглицеридемией, которая не сопряжена с атерогенными сдвигами в холестерин-транспортной системе. Пациенты. имеющие такую триглицеридемию не нуждаются в медикаментозном вмешательстве, им можно рекомендовать только гиполипидемическую диету в пределах Физиологической норми.
- б -
Получены данные, свидетельствующие о том, что в популяции г. Москвы наследственный дефект апо Б-100, обусловленный мутацией арг/3500/-глу. может быть одной из причин семейной гиперхолестеринемии. ассоциированной ,с ИБС. Наследственная гиперхолестеринемия. обусловленная этой мутацией. поддается медикаментозной коррекции при использовании ловастагина -препарата из группы ингибиторов ГМГ-Ко-А-редуктазы. что отличает ее от наследственной гиперхолестеринемии. обусловленной дефектом апо В. Е-рецептора. Очевидно. эффективность ловастатина обьясняется тем. что у гетерозиготных носителей этой мутации часть апо В сохраняет способность нормально связываться с ЛНП-рецепторами. активность которых возрастает при воздействии препаратами из группы ингибиторов ГМГ-Ко-А-редуктазы.
Внедрение результатов исследования. Результатом работы явилось внедрение молекулярно-биологических методов исследования в практическую деятельность 1 клинико-профилактического отделения ГНЩ ПН.
Апробация диссертации. Апробация диссертации состоялась на заседании Ученого Совета ГНЩ ПМ 22.09.93 г.
Основные положения работы доложены на 62 Конгрессе Европейского Атеросклеротического общества /Израиль, 1993 г./
Публикации. По теме диссертации опубликованы 2 научные работы: статья в журнале "Кардиология" и тезисы на 62 Конгрессе Европейского атеросклеротического общества /Израиль. 1993/.
Обьем и структура диссертации. диссертация изложена на 89 страницах машинописи и включает введение. 4 главы, выводы, практические рекомендации, содержит 7 таблиц и 7 рисунков,-
библиографический указатель содержит 10 наименований работ отечественных и 99 - зарубежных авторов.