Введение к работе
Актуальность проблемы. Несмотря на значительные достижения медицины в вопросах диагностики и лечения сердечно-сосудистых заболеваний (ССЗ), они продолжают лидировать в структуре заболеваемости и смертности наиболее трудоспособной части населения большинства экономически развитых стран, в том числе и нашей страны. (Чазов Е.И., 1985, Assmann G., 1993, Оганов Р.Г., 1996) Инфаркт миокрада (ИМ) является одним из грозных исходов тех ССЗ, которые сопровождаются нарушением коронарного кровотока. В большинстве случаев ведущей причиной инфаркта миокарда является атеросклероз коронарных сосудов, что подтверждается данными селективной коронарографии. (Salfitz I.E., 1987, Шпектор А.В., 1996) Как известно, разработаны общие положения о ведущих факторах риска развития атеросклероза и ИБС, на их основе широко применяются различные методы лечения и профилактики ИБС. Но предпринимаемые меры недостаточно результативны. Наряду со средовыми факторами риска ИБС в этиологии заболевания значительную роль играет наследственная предрасположенность. (Дзизинский А.А., Пузырев В.П., 1977, Berg К., 1996) Поэтому в настоящее время возрасла актуальность исследований в области генетики ИБС. В результате многочисленных эпидемиологических, медико-генетических исследований притли к выводу о том, что без учета особенностей генетической конституции успех в ранней диагностике, профилактике и лечении ИБС не будет полным.
К потенциальным генам-кандидатам ИБС относят, прежде всего, гены, детерминирующие формирование физиологических процессов, нарушения которых создают риск развития ИБС. Среди них выделяют группу генов апо-липопротеинов, как белков, занимающих центральное место в липидном обмене (Breslow J., 1988, Целуйко В.И., Чернышов В.А., 1991, Chan L., 1992), и генов ренин-ангиотензиновой системы (РАС), играющих ключевую роль в регуляции артериального давления (АД). (Lifton R.P., 1995, Hegele R.A., 1996)
С внедрением новых методов молекулярной генетики в практику медико-биологических исследований стало возможным изучать полиморфизм ДНК кандидатных генов с помощью генетических маркеров, например, микро- и минисателлитов, полиморфизма длин рестрикционных фрагментов и т. д. (Неагпе СМ., 1992, Cooper D.H., 1988)
Заболеваемость и смертность от ИБС характеризуются этно-
географической неоднородностью. В литературе представлены довольно противоречивые данные об ассоциациях тех или иных аллельных вариантов кандидатных генов с развитием ИБС. По всей видимости, на формирование наследственной предрасположенности к развитшо заболевания оказывает влияние генетический фон популяции. (Fisher Е.А., 1989) Поэтому необходимы исследования полиморфизма ДНК кандидатных генов ИБС для каждой, отдельно взятой популяции.
Проблема ИБС весьма остро стоит и для населения республики Башкортостан. Однако, специальные исследования, посвященные изучению кандидатиых генов ИБС и их связи с проявлением заболевания, в России единичны (Степанов В.А. и соавт., 1992, Шварц Е.И. и соавт., 1995, Погода Т.В., 1995, Сломинский П.А. и соавт. 1995), а в Башкортостане не проводились.
Таким образом, работа, выполненная в рамках поиска ассоциаций генетических маркеров в области генов метаболизма липопротеинов и генов РАС с инфарктом миокарда и уровнем липидов плазмы крови у жителей Башкортостана, представляется весьма актуальной.
Цель работы состояла в изучении ассоциаций аллельных вариантов генов аполипопротеинов В и Е (апоВ и апоЕ) и гена ангиотензин-превращающего фермента (АПФ) с инфарктом миокарда и изменчивостью концентраций липидов в сыворотке крови у жителей Башкортостана.
Для достижения этой цели были поставлены следующие задачи:
-
Изучить липидный спектр сыворотки крови, оценить распространенность дислипопротеидемий, провести их фенотипирование у больных ИМ;
-
Изучить распространенность артериальной гипертонии среди больных ИМ;
3. Провести сравнительный анализ аллельных вариантов 3'-
минисателлита гена апоВ у больных ИМ и у здоровых лиц;
-
Провести сравнительный анализ аллельных вариантов гена апоЕ у больных ИМ и у здоровых лиц;
-
Провести сравнительный анализ инсерционно-делеционного полиморфизма гена АПФ у больных ИМ и у здоровых лиц;
-
Исследовать взаимосвязь показателей липидного спектра сыворотки крови с аллельными вариантами изучаемых полиморфных ДНК - локусов у больных ИМ и у здоровых лиц;
-
Изучить полиморфизм взятых в исследование генов и липидный спектр сыворотки крови в семьях больных ИБС.
Научная новизна работы.
Впервые для населения Башкортостана описан полиморфизм генов апоВ, апоЕ и гена АПФ у больных ИМ и среди лиц без клинических признаков ИБС. Получены данные о влиянии полиморфных локусов этих генов на наследственную предрасположенность к ИБС и обозначены аллельные варианты, детерминирующие пониженный и повышенный генетический риск развития ИБС, осложненной ИМ. Обнаружено "взаимодействие" двух генетических систем (гена апоВ и гена АПФ) при формировании генетического риска ИМ. Показано влияние полиморфизма ДНК кандидатиых локусов на вариабельность уровня липидов в сыворотке крови. Полученные результаты дополняют сведения о генетических локусах, патогенетически значимых для сердечно-сосудистых заболеваний и могут стать основой последующих ис-
5 следований по определению генетических факторов риска развития ИБС у населения Башкортостана.
Практическая значимость работы.
На основе проведенного анализа полученных данных по полиморфизму кандидатных генов ИБС (генов апоВ, апоЕ и АПФ) были выявлены аллели пониженного риска развития ИМ (аллели апоВ 30 и апоВ34), аллели повышенного риска (апоЕ2 и апоЕ4 , аллель D гена АПФ) и неблагоприятные комбинации генотипов апоВЗб-L с гомозиготами DD гена АПФ. В дальнейшем полученные результаты могут быть использованы для разработки методов раннего выявления лиц, предрасположенных к ишемической болезни сердца, осложенной ИМ в возрасте до 55 лет, до появления фенотипических признаков, а также разработки новых индивидуальных принципов профилактики и лечения.
Апробация работы. Материалы диссертации докладывались и обсуждались на 61-й научной конференции студентов и молодых ученых БГМУ (Уфа, 1996), на конференции «Проблемы клинической медицины» (Уфа, 1996), семинарах лаборатории популяционной генетики наследственных болезней человека ОБЦ УНЦ РАН, на 9-м Международном Конгрессе Генетики человека (Рио-де-Жанейро, 1996), на Международном Конгрессе Молекулярной Медицины (Берлин, 1997).
Публикации По материалам диссертации опубликовано 12 печатных работ.
Структура и объем диссертации. Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов, результатов исследования и обсуждения, общего заключения, выводов и списка литературы. Работа изложена на 128 страницах машинописного текста, содержит 19 таблиц и 14 рисунков. Список литературы включает 254 работы, в том числе 211 публикаций на иностранных языках.