Антиоксидантное действие различных доз пробукола убольных ишемической болезнью сердца сгиперхолестеринемией Каминный, Александр Иванович

Введение к работе

Актуальность темы. В настоящее время сердечно-сосудистые заболевания продолжают оставаться основной причиной смертности и инвалидизации населения России. Среди указанных заболеваний ведущее место занимает атеросклероз, а ИБС является его самым серьезным и частым проявлением. Хотя механизм возникновения атеросклероза еще недостаточно изучен, установлено, что одним из патогенетических факторов риска возникновения этого заболевания является повышенное содержание в плазме крови липопротеидов атерогениых классов - ЛИП и ЛОНП.

Вывод о том, что повышение содержания ХС в крови, а именно ХС ЛИП, является фактором риска развития ИБС и смертности от нее, сделан на основании многочисленных экспериментальных, эпидемиологических и клинических исследований (Чазов Е.И. 1992, Перова Н.В. 1989, Грацианский Ы.А. 1994, Davies М.,1993, Juccma X, 1995), однако, анализ многочисленных исследований, в которых больным атеросклерозом проводили интенсивную гиполипидемическую терапию и ангиографический контроль до и после лечения, показал, что существует ряд больных атеросклерозом с исходно низким уровнем общего ХС и ХС ЛИП, у которых интенсивная пшояииидемическая терапия не вызвала улучшения ангиографической картины. Известно, также, что развитие коронарного атеросклероза в 32-56% случаев может происходить и при нормолипидемии. В связи с этим становится понятным, что существует необходимость воздействовать на другое звено патогенеза атеросклероза, а именно на процессы перекисиого окисления липидов, которые, как было доказано в последние годы, играют важную роль в патогенезе атеросклероза (Ланкин В.З., Тихазе А.К., 1975-1998, Steinberg D., 1989-1997).

Таким образом, встает вопрос о комплексном подходе к лечению атеросклероза для воздействия не только на уровень липидов в плазме крови, но и на процесс перекисного окисления липидов. В многочисленных исследованиях обсуждается возможность применения ангиоксидантов в лечении ИБС. В исследованиях последних лет доказана высокая эффективность синтетического антиоксиданта пробукола в предупреждении рестенозов у больных после баллонной ангиопластики (Yokoi II., 1997, Rodest J. 1998). Тем не менее, в настоящее время отсутствуют данные, позволяющие четко обосновать дозу пробукола, необходимую для обеспечения его антиоксидантних свойств с помощью тестов, контролирующих уровни первичных и

вторичных продуктов перекисного окисления липидов и состояние активности антиоксидантних ферментов. Поэтому, настоящая работа, посвященная изучению возможности применения пробукола в качестве антиоксиданта в комплексной терапии гиперхолестеринемий, определению оптимальной дозы препарата для защиты ЛНП от окислительной модификации и исследованию информативности тестов для оценки антиоксидантной активности применяемых препаратов in vivo представляется важной и актуальной.

Цель исследования. Исследовать антиоксидантное действие различных доз (250 мг/сут и 1000 мг/сут) гаполипидемического препарата пробукола при терапии ишемической болезни сердца с гиперхолестеринемией.

Задачи исследования:

1. Исследовать влияние различных доз пробукола (250 мг/сут и 1000 мг/сут) на изменение параметров липидного обмена (общий ХС, ХС ЛНП и ХС ЛВП) в процессе 6-ти месячной терапии больных ИБС с гиперхолестеринемией.

2. Исследовать влияние различных концентраций экзогенного пробукола на кинетику Си²⁺-индуцированпого свободнорадикального окисления ЛНП человека in vitro.

3. Методом ЭПР-спектроскошш исследовать возможность взаимодействия пробукола, включенного в ЛНП больных ИБС с гиперхолестеринемией in vivo в процессе длительной терапии, со свободными радикалами липидов.

4. Исследовать динамику окисляемости атсрогештых ЛНП при терапии больных ИБС с гиперхолестеринемией различными дозами пробукола (250 мг/сут и 1000 мг/сут).

5. Исследовать изменение содержания первичных (липопероксиды) и вторичны* (вещества, реагирующие с 2-тиобарбитуровой кислотой) продуктої свободнорадикального окисления в ЛНП плазмы крови в процессе длительной терапиі больных ИБС с использованием различных доз пробукола (250 мг/сут и 1000 мг/сут).

6. Исследовать изменение скорости ферментативной утилизации активных форл кислорода (активность супероксиддисмутазы) и липоиероксидов (активності глутатионпероксидазы) в крови больных ИБС с гиперхолестеринемией при лечении и: пробуколом в дозах 250 мг/сут и 1000 мг/сут.

Научная новизна.

1. Впервые показано, что в процессе дительного лечения больных ИБС с
гиперхолестерипсмией пробуколом в дозах 250 мг/сут и 1000 мг/сут содержание
лииопероксидов и вторичных продуктов свободпорадикального окисления в ЛНП
пациентов снижается, по не зависит от дозы препарата.

2. Доказано, что в процессе длительного лечения больных ИБС с гипсрхолестсрипемией пробуколом в дозах 250 мг/сут и 1000 мг/сут активность глутатионпероксидазы и супероксиддисмутазы повышается независимо от дозы препарата.

3. Установлено, что пробукол, включенный в ЛШТ in vivo при лечении больных ИБС с гиперхолестерипсмией в дозе 250 мг/сут, эффективно взаимодействует со свободными радикалами липидов (как "ловушка радикалов"), генерируемыми в модельной системе.

Практическая значимость.

1. На основании изучения различных тестов, характеризующих антиоксидантное
действие пробукола у больных ИБС с гиперхолестсринемией (Си²""-индуцированного
свободпорадикального окисления ЛІШ, оггределения содержания липопероксидов и
продуктов, реагирующих с 2-тиобарбитуровой кислотой, активность
глутатионпероксидазы и супероксиддисмутазы) выявлено, что наиболее
информативным тестом является определение общего содержания липопероксидов в
крови больных при помощи реакции Fe"' с ксиленолоранжем (после окисления Fe²⁺ до
Fe³⁺ в присутствии липопероксидов) до и после добавления восстанавливающего
линопероксиды трифепилфосфина. Метод является простым, чувствительным и
специфичным. Он пригоден для использования в клинических условиях для оценки
эффективности действия антиоксидаптных препаратов.

2. Результаты исследования подтверждают, что использование пробукола в качестве
гиполипидемического препарата в дозе 1000 мг/сут не совсем оправдано из-за его
низкой гиполипидемической активности, достоверного снижения уровня ХС ЛВИ и
других побочных эффектов. Тем не менее, в дозе 250 мг/сут пробукол не оказывает
влияния на параметры липидного обмена и не вызывает побочных эффектов, обладая
выраженным антиоксидантами действием. Это открывает перспективу для дальнейшего
клинического исследования действия низких доз пробукола, с целью возможного
использования сто в комплексной гиполипидемической терапии больных ИБС с
гиперхолестеринемией.

Внедрение. Полученные результаты внедрены в практическую и научную деятельность

Института клинической кардиологии имени А. Л.Мясникова РКЕШК МЗ РФ.

Апробация диссертации состоялась 19 марта 1999г. на межотделенческой

конференции Института клинической кардиологии имени Л.Л.Мясникова РКНПК МЗ

РФ.

Публикации. По теме диссертации опубликовано 11 работ. Материалы представлены

на:

1.2-ом съезде биохим. об-ва РАН, Пушило, 1997.

4. 10-ой межд. конф. по химии органических и элементоорганических пероксидов, ИХФ РАН, Москва, 1998.

5. 1-ом региональном научно-медицинском съезде " Роль свободных радикалов в здоровье и болезни" Иерусалим, Израиль, 1998.

4. 7-ом конгрессе Европейского Общества Атеросклероза, Женева, Швейцария 1998.

5. 10-й международной встрече сосудистых биологов, Каирнс, Австралия 1998.

6. 5-ой межд. конф. "Биоантиоксидапт", ИБХФ РАН, Москва, 1998.

Объем и структура диссертации. Диссертация состоит из введения, четырех глав, выводов, {фактических рекомендаций и списка литературы, включающего 45 отечественных и 98 иностранных источников. Дисертация изложена на страницах машинописи, иллюстрирована 10 таблицами и 13 рисунками.