Введение к работе
Актуальность темы: Как известно, иммунный ответ это интегральный процесс, включающий в себя различные виды специфической реактивности. При этом, основными видами клеточноо-посредованного и гуморального иммунного ответа на воздействие ксеноантигена, соответственно, является генерация Т-зф-фекторов (Тз) гиперчувствительности замедленного типа и формирование антителообразующих клеток (АОК). Реакция гиперчувствительности замедленного типа (РГЗТ) является одним из важнейших механизмов, обеспечивающих устойчивость организма к действию большинства инфекционных возбудителей (Авербах М.М., 19S5). В свою очередь, антитела также способны усиливать активность фагоцитирующих клеток, но на фоне выраженного антителогенеза (АТГ) отмечается снижение активности Тз (Кульберг А.Я., 1986).
В настоящее время считается (Pilarski, Gibney, 1991; Кетлинский С.А., Калинина Н.М.,1995), что основным механизмом, определяющим соотношение двух видов иммунной реактивности, являются цитокинопосредозанкые взаимодействия двух типов Т-хелперов. Однако, данная теория не в полной мере способна объяснить всю гамму неоднозначных эффектов взаимодействия двух видов иммунного ответа, регистрируемую в опытах in vivo, а также не рассматривает возможность влияния на данный признак органо- и стадиоспецифичных механизмов, ассоциированных со специализированными Т-супрессорами (Тс).
По-видимому, решение этой проблемы невозможно без анализа соотношения двух составляющих иммунного ответа на уровне целостного организма. Последнее позволит выявить и классифицировать типичные варианты соотношения РГЗТ и АТГ в зависимости от влияния генетических и фенотипических факторов; установить основные критерии их характеризующие и уточнить некоторые механизмы, лежащие в их основе.
Цель и задачи исследования. Целью работы является выявление основных закономерностей взаимосвязи клеточноопосредо-ванного и гуморального видов иммунного ответа на уровне целостного организма; расшифровка некоторых определяющих их механизмов.
Подлежат решению следующие задачи:
-
Установить основные количественные критерии, характеризующие взаимоотношение РГЗТ и АТГ у подопытных мышей.
-
Определить органспецифичную роль селезенки и регионарного лимфатического узла в развитии РГЗТ и АТГ на внут-рибрюшинное или подкошюе введение различных доз эритроцитов барана.
-
Оценить влияние на соотношение двух видов иммунного ответа генетических, половых, возрастных и некоторых средо-вых факторов.
-
Оценить динамику соотношения АТГ и РГЗТ на фоне изменения активности Тс РГЗТ (Тс-ГЗТ) и развития различных вариантов вторичного иммунного ответа.
-
Выявить и охарактеризовать стадиоспецифичные клетки- супрессоры селезенки, контролирующие функцию сформировавшихся АОК в зависимости от активности Тэ.
Научная новизна. В ходе выполнения работы выявлены основные критерии оценки взаимоотношения РГЗТ и АТГ, определяющим из которых является соотношение порогов антигенной чувствительности для их развития. Установлено наличие чёткой органспецифичности в характере данного взаимодействия. Впервые выявлены и охарактеризованы два генетически детерминированных типа взаимоотношения двух видов иммунного ответа как на первичное, так и на повторное введение антигена (АГ). Определена зависимость типового подразделения иммунного ответа от определенных гашютипов используемых мышей. Произведена оценка влияния на соотношение РГЗТ и АТГ половых и возрастных различий, голодания, экзогенного глюкагона; различных вариантов активности фагоцитирующих клеток, фиксируемых в НСТ-тесте; сопутствующего действия АГ золотистого стафилококка и блокады простагландинсинтетазы вольтареном. Обоснована возможность генерации низкодозовых Тс-ГЗТ и показано их опосредованное стимулирующее влияние на АТГ в селезёнке. Выявлена и охарактеризована субпопуляция антиидиотипических Т-супрессоров, ограничивающих продуктивную фазу генерализованного АТГ в зависимости от активности Тэ.
Научно-практическое значение. Полученные данные позволяют решить проблему тестирования in vivo иммуномодулирующих препаратов, способных направленно изменять соотношение между клеточным и гуморальным видами иммунного ответа. Они будут
полезны для определения оптимальных доз АГ и схем его введения при вакцинациях и ревакцинациях, а также для уточнения состояния иммунного статуса при голодании и некоторых формах эндокринной дисфункции, связанных с гиперглюкагонемией. Результаты исследования могут быть задействованы в учебном процессе на ряде кафедр медико-биологического профиля. Полученные в работе данные неоднократно использовались в докладах и выступлениях на научных кворумах различного уровня. Основные положения, выносимые на защиту.
-
В зависимости от соотношения порогов антигенной чувствительности АТГ и РГЗТ, а также их выраженностей, первичный иммунный ответ на ЭБ у мышей подразделяется на два оппозитных генетически детерминированных типа. Межтиповые различия усиливаются на фоне селективного вторичного Т-клеточного ответа.
-
Признак не сцеплен с полом, "главные гены" его кодирующие ассоциированы с МНС. Фенотипическое проявление признака зависит от возраста животных и влияния средовых факторов.
-
Взаимоотношения между двумя видами иммунного ответа органспецкфичны: в селезёнке они конкурентны, а в регионарном лимфатическом узле - относительно независимы друг от друга.
-
Низкодозовые Т-супрессоры регулируют соотношение АТГ и РГЗТ через подавление формирования и активности Тэ; анти-идиотипические Т-супрессоры ограничивают в селезёнке функцию сформировавшихся АОК в прямой зависимости от активности Тэ.
Апробация работы и публикации. Работа апробирована на совместном заседании кафедры биохимии и проблемной комиссии по иммунологии Пермской государственной медицинской академии. По теме диссертации опубликована 31 работа. Основные результаты диссертационной работы были изложены в докладах и тезисах на семи научных съездах, симпозиумах, конференциях республиканского и международного уровня, в том числе: на 1-м Всесоюзном иммунологическом съезде, 1-м съезде иммунологов России, 1-м международном научном конгрессе "Традиционная медицина и питание".
Объём и структура диссертации. Диссертация изложена ка 200 страницах машинописи и состоит из введения, обзора лиге-
.-4-
ратуры, материалов и методов, результатов собственных исследований и их обсуждения (7 глав), вьшодов. В диссертации 57 рисунков и 23 таблицы. Прилагаемый список цитированной литературы включает 304 наименования (83 отечественных и 221 иностранных).