Введение к работе
Актуальность проблемы. Для диагностики и специфической га.му-
гатерапии аллергических заболеваний, связанных с сенсибилизацией <. клещам домашней пыли рода Dermatophagoides, пр:іменяпт препарата, предетавлягские собой водно-солеЕые экстракты из культуры кле-цей. Недостатком таких препаратов, в склу их аллергешюсти и сла-Знх юялуногенных свойств, является необходимость проведения продолжительного курса инъекций, а такта риск возникновения аллергических осложнений при специфической иммунотерапии. Кроме гого, в проявлении силптомов аллергических заболзвэнип кле-цевой этиологии не отмечается сезонности, что затрудняет гзтгхвидуальннй подбор начальних доз аллергенных препара-хв из іслещой „омашкей пыли и увеличивает. героятность_спрово-НФсвать у больного аллергические реакции- местного или
ЗИСТЄМН0ГО Характера (Bousquet J., 1985; Platts-lUlls Т.А.Е.,
1S87). Снижение аллергешюсти водно-солевых препаратов
аллергенов путем модификации их различны».::! химическими агентами целает специфическую шдаупотерзшта более безопасной и
Эффективной (Grammar L., 1985; Bousquet J., 1989; Noraan Ph.,
1990). 3 этой связи разработка еознх лечебных форм клещевых аллергенов является осоСнлно актуальной.
В последние годы широкое распространение в клігнической прак-нке получил? зллоргоидн - препараты аллергенов,моифщігровашшх альдегидами. Использование в качестве модифлщтрую'ддх агентов формальдегида Й ГЛУТЭРОВОГО альдегида (Harsh D., 1970; Patterson R.,
1973} позголило создать целый ряд эллзргоидор из различного
- г -
SJKSJT-OEHOrO СЫРЬЯ (I.arsti D. , 1981; Mueller U. ,1982; Puttonsn E І32; Hakada SI»., 1985; Guerra F., 1993). В НЗШЄЙ Стране
ocsose одноэтапного метода формалинизациг получены аллергоида шльщ амброзии и другії', растений (Райкис Б.Н., 1987). Показан что применение кх для гкпосенсибилизацки дает положительный тер
ПЗВТИЧЄСКИЙ ЗффЗКТ (РайКИС Б.Н., 1901; ВороНКИН Н.И., 1936; В
рлчкина Л.А., 1990; Ересил Г.Г., 1993). Однако до настоящего врі мени способы изготовления отечественных шдафщированных препар; тов из клещей домашней шли разработаны не были.
Цель к задачи исследования. Целью настоящей работы явилао
разработка технологии получения аллергоида из клещ
Derratophjgoidcs farinae И характеристика ЄГО фіЗИКО-ХК.ІИЧеСКНХ
і:~'іуноОі:о;.ог;>:сс:с:-Х свойств. Исходя из этого бнлк ноставлеш еле душке задачи:
- разработка технологии получения аллергоида кз клеще
С.Гагіпае НЭ ОСН0БЄ МОДЕфИКЗЦИК КЛЄЩЄВОГО аллергена ЗЛЬДЄГИДа№
характеристика фізико-химических свойств полученного мода: фпогровакного препарэта;
исследование антигенні;?, свойств клещевого аллергоида;
сравнительное изучение аллергенной актіїзности аллергоида
аллергела ИЗ КЛЗЦЄЙ D.farinae.
Научная новизна. На осеоеє метода одноэтапной кодифгканп
формальдегидом была разработана технология изготовления клеяевог сллоргохдэ. Впервые получен отечестве кеші модифадироБаншй пр&пс
РЭТ аллергена (аЛЛерГОИД) ИЗ КЛЄТ,ЗЙ D.farinae.
Изучено влиянко модификации эрмгльдегидс; і на фізико-химл ческиз свойства клещевого аллергена, /становлено, что в рззульта їв фор:*.злишзз:і-тж происходят химичьсхие и конфорчзшіоннке ПрООО
раззвятпія компонентов клетевого аллергена. Для модифицированного ггрепаратз (клещзвого аллергоида) показано изменение величин изоз-лектрическид точек Оелков и значительная потеря эстеразной активности.
Исследованы антигенные свойства клетевого аллергоида. Показано, что молзйпцировэнный препарат способен индуцировать выработку специфических антител к немодиїицирсванному клесевому аллергену в организме животных ( кролика и морской свинки). Обнаружено, что аллергоид вызывает выработку антител того же спектра, что и кленевой аллерген.
Сравнительный анализ аллергенных свойств двух препаратов выявил снижение способности клешевого аллергоида связывать специфические igE-зятителз человека. На модели секреции гистаминэ тучкы-.ш клетками кшсы показано, что аллергенная активность аллергоида з 5оо раз нляе активности клетевого аллергена.
Практичеек -я значимость работы. Разработанная технология по-ЮЕ5НЧ в основу ";!нструкции по изготовление и контролю аллергоида
!Э КЛЄПЄЙ Dernatophagoides farinae". Экспериментальные серии Пре-
іарате, изготовленные совместно со Ставропольским КІТО "Аллерген", росли проверку в ГИСК ил. Л.А.Тарасевичз и Комитетом по МпЕП азреїлеш для испытания на ограниченных контингентах больных
ПРОТОКОЛ N 7 ОТ 15.07.1993).
Применение методов изоэлектрофокусирсЕания и определения стеразной активности ферментов позволило выявить степень мсяифи-ацші клеиеюго аллергена формальдегидом. Зтк методы могут Сыть спользованы в дальнейшем для стандартизации препарата клетевого лдергслда.
Для характеристики аллергенной активности модифицированного
препарата (клеяевого аллергоида) методом высвобождения гнетами подобраны оптимальные условия пассивной сенсибилизации перитоне льннх тучных кяетох крысы сыворотками Сольных.
Полохапия, виносихяе па защиту.
разработанная технология формалинизации клещевого аллерп на позволяет получить модифицированный препарат из клеи d.farina*, обладаний! свойствами аллергоида;
контроль модификации клещевого аллергена может осущес вляться с помощьп физико-химических методов: изоэлектрофокусир взния ( опрзделенве pi ) н измерения эстеразной активности пр парата;
полученный клесевой аллергоид обладает высокой икмуногеї ностьо и еншанноа аллергенной активностью, что позволит повыси: эффективность н безопасность специфической иммунотерапии п;
КЛеСаООІІ СЄВСН62ДИ32ЦНИ.
Апробация роботы диссертация апробирована на научной конф
решеа отдела аллергологии и инфекционной иммунологии НИИБС га И.Ії.Кочнзхова РАМН з.оа. 199« года. По тема диссертации опубл ковано s работ, список которых приводится в конце автореферата.
Структура е объзы диссертации. Диссертация состоит из введе
нпя, обзора литература, описания материалов и методов исследовг ная, двух глав собственных исследований, заключения, выводов списка литературы. Работа изложена на ... страницах мапшнописног текста, содержат 5 таблиц, г схемы и is рисунков. Список литерг
туры включает наименований работ отечественных и ззрубежнь
авторов.