Изучение связывания пептидов, соответствующих области гомологии альфа2-интерферона и альфа1-тимозина, с рецепторами иммунокомпетентных клеток Володина, Ева Юрьевна

Введение к работе

Актуальность тєяьі. Изучение взаимосвязи между структурой и Функцией Селксв-иммунорегуляторов помимо обогащения Фундаментальных знания имеет большое прикладное значение -Синтетические пептиды, гомологичные активным центрам белков, способны проявлять самостоятельную биологическую активность. Химический синтез небольших пептидов несложен и экономичен. Это создает предпосылки для использования их в качестве лекарственных средств.

И.нтерфероны - белки, обладающие комплексом активностей: противовирусной, противоопухолевой, иммунорегуляторной. В соответствии с антигенными, биологическими и химическими свойствами интерфероны подразделяются на четыре класса: ИФН-ы лейкоцитарный !, ИФН-|ї( фибробластныя ), ИФН-у! иммунный 1 и ИФН-и. Завьяловым В.П. и Денесюком А.И. на основании теоретического конформационного анализа были предсказаны пространственные структуры а/р и у -иктерферонов '1962 ) и локализованы последовательности, участвующие в образовании функциональных центров. Для одного из этих участков Наволейкой Е.В. была обнаружена гомология с а-тимозином (гормоном тимуса). На этом основании было сделано предположение, что данная последовательность соответствует иммуноре-гулчторному центру интерферона. Дальнейшие исследования (1986) показали, что пептид ИФН-а (131 -138 ), соответствуешь области наибольший гомологии НФН-а, и тимозина-а , обладает иммунорегуляторной активностью. Одним из важнейших условии проявления биологической активности пептидов является их связывание с клеточными рецепторами. Это и определило цель и задачи настоящей диссертации.

Цель исследования. Исследовать связывание пептидов, соответствующих области гомологии о -интерферона и и -тимоэмна, с рецепторами иммунокомпетенткых клеток.

Основные задачи исследования. і

1. йаучуть связывание пептида ИФН-с» (131-136) с рецеп- оаыи нммунокомпет

зенки и перитонеальных макрофагов) мышея, определить параметры связывания.

1. Изучить наличие рецепторов на поверхности иммуно-компетентных клеток для пептида ТМ-с^ (16-23!. Проверить предположение о том, что а -интерферон и а -тимззин связываются одним'.і и теми же рецепторами (на примере тимоцитов).

2. Исследовать связывание .пептидов: ИФг1-с«₂( 131-135 ), ИФН-а₂! 131-135), ИФН-а,(126-135), ИФН-с^!123-135!, ТМ-а^П-20). ИФН-а₂Суз(Асш)( 131-138), H*H-a₂(Cys( AcmH131-136 ) i₂ с клеточными рецепторами.

3. Найти области прикладного использования изученных пептидов.

Научная новизна. В результате проведенных исследований обнаружено, что:

1 1 последовательность 131-13S <*₂-интерферона человека ответственна за связывание с рецепторами иммунокомпетентных клеток МЫШИ;

2. гомологичная ИФН-а (131-138) последовательность в а -тимозине-ТМ-а (16-23 ) отвечает за связывание а -тимозина с этими же рецепторами;

3. а -интерферон и а -тимозин конкурирует за общие рецепторы на поверхности иммунокомпетентных клеток;

4. а -протимоэин конкурирует с ИФН-а (131-133) за связывание с рецепторами на тимоцитах.

Теоретическая и практическая значимость работы.

Результаты, полученные при выполнении данной работы является свидетельством общности эволюционного происхождения о-интерферонов и а-протимозина, а также функциональной взаимосвязи системы интерферонов и гормонов тимуса.

Высокое сродство пептида ИФН-а₂<131-138I (авторское название - пептоферон) к клеточным рецепторам позволяет использовать.этот пептид s качестве адреса при создании гибридных молекул направленного действия. Здесь возможен широкий диапазон его практического применения: пептоферон может слудшть проводником лекарственных вешзств или в исследовательских целях в зависимости от назначения функциональной

части.

Пептсферон может быть использован для поиска рецепторов к о-'р-интерферокан и а -тимсзину, т.к. синтез его достаточно прост, a S' *⁵ он метится лучда интерферона.

Е силу сеоєи бласт-траксформирусшеи активности пептофе-рон мохет Сыть использован в качестве лекарственного средства при нарушении дифференцировки Т-глеток из тимичес-ких предшественников.

Основные положения, выносимые на завиту.

1. Последовательность 131-136 а -интерферона человека
ответственна за связывание с рецепторами иммунекомпетентных '
клеток мыши.

2. 5а взаимодействие с рецептором в о -тимозине
отвечает гомологичная ИФН-о 1131-138) последовательность -
16-23. о -интерферон и а -тимозик конкурирует за обшие ре
цепторы на поверхности иммунскомпетентных клеток мыши.

Апробация диссертационного материала.

Основные материалы диссертации были доложены на Всесоюзном симпозиуме по химии пептидов /Рига, 1990/; Всесоюзном симпозиуме "Биохимия рецепторных систем" /Таллинн, 1990/; Всесоюзном симпозиуме с участием зарубежных ученых "Mononuclear phagocyte system In normal and pathological states" /Новосибирск, 1990/.

В завершенном виде работа была доложена на заседании научного семинара отдела инженерной иммунологии Института иммунологии FAO "Биопрепарат" 5 апрели 1994 года.

Публикации.

По теме"диссертации опубликовано f> работ в отечественной и зарубежной печати.

Структура и объем диссертации.